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Détermination précise des antigènes libres dans 100% du sérum avec gyrolab
Date :2025-11-05Lire :1


La mesure précise de la concentration d'anticorps / antigène libre dans le sérum est essentielle dans le processus de développement de médicaments, en particulier dans les études pharmacocinétiques / pharmacocinétiques (PK / PD) d'anticorps monoclonaux / anticorps polyspécifiques. Les méthodes traditionnelles entraînent souvent des résultats biaisés en raison de la dilution de l'échantillon, d'une incubation trop longue ou d'un complexe anticorps - antigène instable.


Gregor Jordan et al., de roche, ont développé une méthode d'immunoanalyse pour la détection d'antigènes libres dans le sérum entier, basée sur la plateforme gyrolab, qui vise à relever les défis de l'analyse des substances libres suivantes:



La dilution de l'échantillon conduit à la dissociation du complexe antigène - anticorps,Surévaluation de la concentration en antigène libre


Le complexe anticorps - antigène a une courte demi - vie (< 100 secondes) et ne peut pas être capturé avec précision par les méthodes LBA traditionnelles


En présence d'anticorps thérapeutiques, il est difficile de distinguer les antigènes à l'état libre de ceux à l'état lié

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

Cette méthode utilise le principe d'immunoanalyse pontée avec les étapes spécifiques suivantes:

1

Package d'anticorps de capture après Marquage sur une colonne d'affinité de Streptavidine

2

rejoindreéchantillons de sérum non dilués, permettant à l'antigène libre de se lier aux anticorps de capture

3

rejoindreAnticorps de détection marquésLiaison à un autre épitope de l'antigène

4

Détection des signaux, quantification des antigènes libres

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

Exigences clés de la méthode






Capture des anticorps vs détection des épitopes antigéniques reconnus par les anticorpsPas de chevauchement


Anticorps de capture vs anticorps thérapeutiquesLe même épitope de l'antigène de liaison compétitif


Temps d'incubation extrêmement court (de préférence < 2 secondes)


Aucune dilution de l'échantillon nécessaire pour éviter la dissociation du complexe

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定
使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定
使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

Objectif de l'étude

Évaluer l '« efficacité d'élimination » du CCl2 par les médicaments anticorps, c'est - à - dire si les anticorps se lient efficacement et éliminent le CCl2 libre.

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

研究La méthode

Plateformes et méthodes

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定
使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

Conception expérimentale

01

Courbe d'étalonnage et contrôle de la qualité

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

Plage d'étalonnage: 2430 pg / ML → 10 pg / ml

échantillon de QC:

Qualité élevée : 1820 pg/mL

QC moyen : 230 pg/mL

Basse qualité : 30 pg/mL

Normes acceptées:

± 20% de déviation, CV < 15%

02

Groupe d'intervention pharmaceutique

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

Cnto0888: anticorps anti - CCl2 monospécifique (contrôle)

Cklo2 - sg1095: anticorps bispécifique anti - CCl2 (groupe expérimental)

Réglage de la concentrationPour:

Faible dose: 7,5 ng / ML ou 15 ng / ml

Dose élevée: 10 μg / ml

Résultats et discussion

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定


Cnto0888 élimine presque complètement le CCl2 libre à des concentrations élevées


L'efficacité d'élimination du cklo2 - sg1095 est légèrement inférieure, mais reste nettement supérieureGroupe vide


Double anti a encore une clairance modérée à faible dose, suggérant sa dépendance à la dose




使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定
使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

Objectif de l'étude

La concentration du complément C5 libre a été déterminée rapidement et avec précision dans des échantillons de sérum non dilués pour évaluer l'efficacité pharmacologique in vivo des médicaments anticorps anti - C5 tels que l'eculizumab, le crovalimab.

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

研究La méthode

Plateformes et méthodes

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定
使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

Expérimentationsrésultat


Plage linéaire de courbe Standard: 0,55 – 3000ng / ml


LOQ:0.5 ng/mL, Suffisant pour détecter < 0,1% de C5 libre(C5 humain total ≈ 400 nm)

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定
使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

Résumé

Avantages techniques de la méthode

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

La plate - forme gyrolab a un mode de pénétration de flux sans incubation,Réduit considérablement la liaison non spécifique dans la matrice, réduit efficacement les interférences de la matricePeut soutenir dans l'analyse des matières libresTest de sérum completEtRéduit la dissociation du complexe anticorps - antigène due à l'incubationRendre l'analyse des matières libres plus précise et efficace.






Références:

[1] Méthode de détermination de l'antigène libre d'un anticorps dans un échantillon, Gregor Jordan, Martin Schaefer, Maria Viert; Pub n° US2023/0393125 A1.