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instrumentb2b>Solution>Comparaison des performances d'une colonne SPE traditionnelle avec un Extractant magnétique avec l'extraction de l'angiotensine I
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Utilisation de l'angiotensineJeExtraction plus traditionnelleSPEPropriétés de la colonne avec Extractant magnétique

Mots clés

AngiotensineJe, chromatographie liquide spectrométrie de masse, extraction en phase solide,Angiotensine I,Ang I,Renin,LC-MS/MS,SPE

Préface

AngiotensineJe(Ang I), est l'un des marqueurs les plus courants de l'examen préliminaire, par l'intermédiaire de l'angiotensineJeTest d'effet d'extraction, capable d'évaluer efficacement l'applicabilité clinique et les performances techniques de divers moyens de traitement pré - échantillon.

Cet article compare certaines marques d'importation célèbres disponibles dans le commerceHLB 96PositionSPEPlaques perforées etHLBMagnétiqueSPEEXTRACTANTS EXTRACTANTSAng ILes indicateurs méthodologiques de l'essai comparent visuellement les performances des deux. Aussi cliniqueSPELes perspectives de développement de la technologie de traitement pré - échantillon fournissent une référence très précieuse.

Conception expérimentale

Comme indiqué dans le tableau ci - dessous, en utilisant1 % de BSAPréparation de quatre niveaux de concentration deAng ISérie de solutions standard, complétées par des marqueurs isotopiques stablesAng IL'étalon intérieur.

Ang I

Concentration (ng) et

Concentration étalon interne (ng) et

LOQ

0.5

10

Niveau bas (L) et

7.5

10

Niveau moyen (M) et

30

10

高水平(H) et

80

10

Fixe les conditions suivantesSPE, appliqué à une marque importée célèbreHLB 96PositionSPEPlaques poreuses. Utiliser une pression positive adaptée96Le trouSPEL'unité de fonctionnement exécute l'échantillon.

nom

opération

Activation

utiliser500 μLActivation du méthanolSPEPlaque deux fois

équilibre

utiliser500 μL5 %Activation d'une solution aqueuse d'acide formiqueSPEPlaque deux fois

L'échantillon supérieur

500 μL LOQFaible (L), au milieu (M), élevé (H) sur l'échantillon

Douche à laver1

utiliser500 μL5 %Solution aqueuse formique pour le lavageSPEPlaque deux fois

Douche à laver2

utiliser500 μL20 %Solution aqueuse de méthanol pour le lavageSPEPlaque deux fois

élution

Chaque trou rejoint250 μLMéthanol, collecte de l'éluant en96Dans la plaque de trou

2.png

Correspondant à cela, pourAUTO M32Extracteur entièrement automatique réglé comme suit pour exécuter l'échantillon, chaque échantillon utilise2 mg de HLBExtractant magnétique.

Directives

La solution

Position du trou

Quantité de solvant (μL) et

Activation

Méthanol

1

500

équilibre

5%甲酸水溶液

2

500

L'échantillon supérieur

Solution d'échantillon

3

500

Douche à laver1

5%甲酸水溶液

4

500

Douche à laver2

20%Solution aqueuse de méthanol

5

500

élution

Méthanol

6

250

Évacuation des déchets

/

2

600

3.png

Données et comparaisons

Quatre échantillons standard tels que décrits dans le plan expérimental, chaque échantillon étant répété avec trois extractions, après comparaison de l'extraction par les deux méthodes de prétraitement,LC-MS/MSL'écart - type relatif mesuré ci - dessus, les résultats sont présentés dans le graphique ci - dessous. Parmi eux, la colonne bleue gauche pour l'utilisation d'une marque importée célèbreHLB 96PositionSPERésultats du dosage après extraction de la plaque poreuse, colonne orange droite résultats du dosage après extraction à l'aide d'un Extractant magnétique.

4.png

5.png

Figureb, Faible niveau (l) reproductibilité

6.png

7.png

On peut voir que les deux méthodes de pré - traitement ne diffèrent pas significativement dans l'écart - type relatif sur la surface du pic externe, la surface du pic d'étalonnage interne, la concentration calculée, mais les résultats de l'extracteur magnétique sont légèrement meilleurs que les traditionnels à la plupart des niveaux.96PositionSPEPlaques poreuses.

Dans la comparaison des taux d'extraction, nous sélectionnons une certaine marque d'importation célèbreHLB 96PositionSPEL'aire du pic mesurée après extraction de la plaque poreuse est la référence (100%), à laquelle est comparée la surface du pic mesurée après extraction par l'Extractant magnétique. Comme le montre l'image ci - dessous, la colonne bleue gauche est l'utilisation d'une certaine marque d'importation célèbreHLB 96PositionSPERésultats du dosage après extraction de la plaque poreuse, colonne orange droite résultats du dosage après extraction à l'aide d'un Extractant magnétique.

8.png


Enfin, comme illustré ci - dessous, les niveaux de loq sont extraits par les deux méthodes après chromatographie mrm obtenue en LC - MS / Ms. La figure A est un chromatogramme obtenu à l'aide d'une plaque poreuse SPE 96 positions classique et la figure B est un chromatogramme obtenu avec un extracteur magnétique. On voit qu'à tous les niveaux de concentration, l'aire du pic mesuré pour l'extraction par extracteur magnétique est significativement meilleure que celle du traditionnel96PositionSPEPlaques perforées, et toutes dépassent ces dernières50%Au - dessus, le plus élevé a même atteint environ1.8Le multiple.

9.png

Discussion des résultats
Manifestement, dans leLOQAu niveau, l'extraction magnétique de l'Extractant donne des pics chromatographiques plus élevés que les traditionnels96PositionSPEExtraction de plaques poreuses, ce qui est cohérent avec les résultats de taux d'extraction *.

En comparant les données ci - dessus, nous pouvons obtenir les résultats décrits dans le tableau ci - dessous.

Répétabilité absolue

Répétabilité relative

Taux d'extraction

LOQqualité

Mode de fonctionnement

Une marque importée célèbre96PositionSPEPlaques perforées

Mieux

Mieux

Modéré

Modéré

manuelLe +Dispositif de pression négative

Extractant magnétique

Mieux

Mieux

Excellent50%Ci - dessus

Mieux

Petite quantité manuelleLe +Équipement automatique


Supérieure à une marque importée célèbreHLB 96PositionSPEPlaques poreuses. En même temps,AUTO M32Les modes de fonctionnement « pipette primaire » et « sans surveillance » inhérents à l'extracteur entièrement automatique réduisent la participation humaine au traitement préalable de l'échantillon tout en augmentant considérablement le niveau d'automatisation.