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Principes et applications du Spectrophotomètre UV - visible
Date :2017-05-16Lire :0

Spectrophotomètre UV visibleIl s'agit d'un instrument d'analyse très utilisé, le domaine d'application concerne la recherche scientifique, l'enseignement et d'autres aspects dans les domaines de la pharmacie, de la santé, de la chimie, de la métrologie, de l'agriculture, de la foresterie, de la pêche, etc. pour effectuer des analyses qualitatives, des contrôles de pureté, des analyses structurelles, la composition des complexes et la détermination des constantes de stabilité, des études cinétiques de réaction, etc.

Spectrophotomètre UV visibleIntroduction aux principes:

La base analytique quantitative de la spectrophotométrie UV - visible est la loi de Lambert - beer. C'est - à - dire que l'Absorbance d'une substance à une certaine concentration est proportionnelle à l'épaisseur de son milieu absorbant.
La couleur de la matière et sa structure électronique sont étroitement liées, et lorsque le rayonnement (Photon) provoque une transition électronique qui fait (ou ion) monter de l'état fondamental à l'état excité, (ou ion) prend une absorption de lumière dans la zone visible ou dans l'ultraviolet, l'apparition ou le changement de couleur est lié à la déformation de la structure électronique normale de la molécule. Contenant un ou plusieurs gènes chromogènes (c'est - à - dire des groupes atomiques avec des liaisons insaturées), le rayonnement provoque des modifications de l'énergie des électrons moyens.
Si deux chromophores sont séparés par un atome de carbone, un groupe conjugué se forme, ce qui déplace la bande d'absorption vers une longueur d'onde plus longue (c'est - à - dire vers le rouge) et augmente considérablement l'intensité de la bande d'absorption. Il y a également un effet de décalage vers le rouge lorsqu'il contient des groupes auxiliaires de couleur (avec des groupes qui ne partagent pas de paires d'électrons). Les groupes aides à la couleur communs sont: - Oh - NH2, - SH, - CL, - BR, - I

Spectrophotomètre UV visibleIntroduction à l'application:

(1) analyse quantitative
Selon la loi de Luang - ber - beer, la concentration et l'Absorbance de l'échantillon sont directement proportionnelles, plus la concentration est grande, plus la valeur d'absorption est élevée, de sorte que le spectrophotomètre utilise plus ou une analyse quantitative, il existe de nombreux types d'analyse quantitative, voici une introduction à plusieurs méthodes d'analyse quantitative couramment utilisées:
A、 Méthode: la méthode est l'une des nombreuses méthodes d'analyse utilisées par le Spectrophotomètre UV - visible. Il s'agit d'une méthode d'analyse basée sur la loi de Luang - beer a = εbc, où la valeur de ε d'une certaine substance à une certaine longueur d'onde est une constante, et le trajet optique d'une cuvette de quartz est connu et une constante. On dispose donc d'un Spectrophotomètre UV - visible à la longueur d'onde λ Max, qui détermine la valeur d'Absorbance a de la solution d'échantillon. On peut alors déterminer la teneur ou la concentration de cette solution d'échantillon en déterminant C = A / ε b Selon la loi de Luang berbeer.
B、 Méthode standard: à la longueur d'onde sélectionnée et dans les mêmes conditions d'essai, l'Absorbance de l'échelle C de la solution d'échantillon standard et de l'échelle C de la solution d'échantillon testée est testée séparément pour l'échelle a et l'échantillon a. Ensuite, appuyez sur la formule pour obtenir la concentration ou le contenu de la solution d'échantillon.
C - like = a - like / a - scale × C - scale
C、 Méthode de courbe standard
La méthode d'analyse quantitative couramment utilisée pour les spectrophotomètres UV - visible est la méthode de courbe standard. C'est - à - dire formuler une solution à une certaine concentration avec une substance standard, puis formuler cette solution en une série de solutions standard. À une certaine longueur d'onde, l'Absorbance de chaque solution standard est testée, la valeur d'Absorbance est en ordonnée, la solution standard correspond à la concentration en abscisse, la courbe standard est tracée. Après cela, la solution d'échantillon est mesurée pour la valeur d'Absorbance selon le programme de tracé de courbe standard, sur lequel la concentration ou la teneur correspondante de la solution d'échantillon est trouvée.
A、 Autres méthodes d'analyse
En plus des méthodes d'analyse fréquemment utilisées en plus des quelques méthodes d'analyse décrites ci - dessus, il existe également la méthode du coefficient d'absorption spécifique, la méthode de la petite multiplication par deux, la méthode de la cubométrie dissoute et la photométrie différentielle illustrée.
2) analyse qualitative
On peut considérer qu'il s'agit du même composé si les grandes longueurs d'onde de crête d'absorption λ Max, les petites longueurs d'onde de crête d'absorption λ min, les grands coefficients d'absorption molaire ε Max du spectre d'absorption UV de l'inconnu, ainsi que le nombre, la position, le point d'inflexion des pics d'absorption sont en accord avec les données spectrales standard. L'objectif principal de l'analyse qualitative est de savoir quelle substance se trouve dans l'échantillon analysé.
L'analyse quantitative et l'analyse qualitative sont les deux principales fonctions du spectrophotomètre, en particulier l'analyse quantitative. D'autres analyses devraient être développées à partir de ces deux fonctions.