1. Plusieurs concepts en chromatographie en phase gazeuse:

Chromatographie en phase gazeuse:

Une technique de séparation pour la séparation d'échantillons complexes en utilisant le gaz comme phase mobile, en fonction des différences dans la répartition des forces telles que l'adsorption entre les composants et la phase stationnaire. L'objet de séparation est un échantillon volatil et thermiquement stable, dont le point d'ébullition ne dépasse généralement pas 500 degrés.

Gaz:

Gaz porteur – gaz utilisé pour transporter un échantillon à travers tout le système.

Gaz détecteur – gaz de soutien requis pour certains détecteurs, tels que, FID。

Introduction des échantillons:

Processus d'introduction de vapeur d'échantillon dans le gaz porteur. Ce processus devrait avoir un impact moindre sur la vapeur de l'échantillon.

Colonne chromatographique:

Réaliser la séparation des composants de l'échantillon.

Le détecteur:

Identification et réponse des composants de l'échantillon de la colonne de sortie.

Acquisition de données:

Le signal du détecteur est converti en chromatogramme pour une analyse qualitative et quantitative manuelle ou automatique.

2. Pourquoi piège à gaz dans la route de gaz; Quelles sont les catégories de pièges de capture dans GC?

Les polluants courants dans le gaz porteur GC sont l'humidité, l'oxygène, les composés hydrocarbonés et les hydrocarbures halogénés, qui ont un impact important sur la durée de vie de la colonne de chromatographie et la détection des ANALYTES, les effets indésirables comprennent:

水分：

Est une cause fréquente de dégradation de la phase stationnaire de la colonne chromatographique; Peut endommager l'instrument;

Oxygène:

Polluants communs; Est une cause fréquente de dégradation de la phase stationnaire de la colonne chromatographique et de diminution des performances de la gaine d'entrée d'échantillon; Peut provoquer une décomposition de l'Analyte instable;

Composés hydrocarbonés et hydrocarbures halogénés:

Réduire la sensibilité du détecteur en augmentant le bruit de fond du détecteur; Il peut également provoquer des dérives ou des fluctuations de la ligne de base, des pics de chromatographie des polluants, du bruit ou une compensation élevée de la ligne de base.

L'humidité, l'oxygène, les pièges de piégeage d'hydrocarbures sont les pièges de piégeage utilisés dans GC.

3. Quel type de piège les différents détecteurs devraient - ils être assortis séparément?

Fid, NPD, FPD - air, soufflage de queue, hydrogène → piège à hydrocarbures (par exemple, 5060 - 9096)

Fid, NPD, FPD, TCD - gaz porteur → humidité, piège à oxygène (par exemple, ot3 - 2)

ECD - soufflage de queue → piège à humidité et à oxygène (par exemple, ot3 - 2)

TCD - gaz de référence → piège à hydrocarbures (par exemple, 5060 - 9096)

MSD - hélium, méthane → déshydratation, oxygène, piège combiné pour les hydrocarbures (par exemple, rmsh - 2) et piège indicateur d'oxygène (par exemple, IOT - 2 - HP)

Le piège ci - dessus est recommandé de changer de 6 à 12 mois, en fonction de la fréquence d'utilisation du client.

4. Quels sont les consommables impliqués à l'extrémité d'entrée du GC?

Seringue, tampon d'admission, joint torique 5188 - 5365, manchon, plaque plane (joint plaqué or), joint métallique 5061 - 5869, joint graphite, écrou à colonne.

5. Pourquoi remplacer le coussin de séparation d'échantillon entrant? Quels sont les types de coussins? Comment choisir un coussin d'isolation d'échantillon selon les besoins du client?

Les coussinets doivent être changés régulièrement et peuvent empêcher: fuites d'air, décomposition, perte d'échantillon, chute du débit de colonne ou du débit de dérivation, pics de fantômes, diminution de l'effet de colonne. Différents espaceurs ont des propriétés différentes:

Séparateurs optimisés pour la perte et la température (BOT): 5183 - 4757

Large plage de température, faible perte → convient à la spectrométrie de masse, entrée haute température de 400 degrés, réduire la colle tachetée à l'entrée de l'échantillon.

Rembourrage longue durée 5183 - 4761

Pré - perforation pour prolonger la durée de vie et réduire la nucléation; L'admission automatique de l'échantillon est de préférence un coussin d'espacement, adapté pour fonctionner toute la nuit; Échantillonnage jusqu'à 400 fois et 350 degrés de température élevée.

Espaceur vert 5183 - 4759

Les trois types de séparateurs ci - dessus sont des séparateurs avancés, traités par plasma, non tachés de séparateurs adhésifs

Rembourrage de type universel:

Température 350 degrés, le nombre de fois jusqu'à 200 fois, économique et économique;

6. Comment choisir le tapis de graphite avec l'écrou de colonne?

Découvrez d'abord les deux matériaux du tapis graphite:

Graphite → matériau doux, haute limite de température.

Vespel → fabriqué à partir de Polyimide résistant aux températures élevées, le matériau est dur et les températures élevées créent des pertes.

Tapis de graphite avec écrou de colonne:

Coussin court avec chapeau court, coussin long avec chapeau long (par exemple, MS interface goujon 05988 - 20066 devrait être livré avec pré - vieillissement 85% vespel, 15% graphite coussin long, universel goujon peut être livré avec 85% vespel, 15% graphite coussin Court)

Le choix du tampon de graphite (doit être basé sur le matériau et la taille du diamètre intérieur de la colonne chromatographique), la fréquence de remplacement généralement remplacer la colonne chromatographique, les fuites sont remplacées.

7. Quel est le rôle du liner et quand le remplacer? Quels sont les facteurs à prendre en compte lors du choix d'un tube de revêtement?

Le tube de revêtement est l'élément central du système d'échantillonnage, où l'échantillon s'évapore en gaz. Le remplacement régulier du tube de revêtement dépend principalement de ce qui suit: comparaison des spectres réalisés précédemment; Degré de propreté de l'échantillon; Si les pics chromatographiques présentent des anomalies: apparition de pics fantômes, changement de pics, mauvaise reproductibilité, décomposition à haute température de l'échantillon, etc.

Facteurs à prendre en compte pour le choix du tube de revêtement: type d'entrée / technique d'entrée, volume du tube de revêtement, traitement ou désactivation du tube de revêtement, propriétés spéciales (coton de quartz, gobelet de quartz, cône de diamètre fin, etc.)

8. Pourquoi utiliser des doublures désactivées et de la laine de verre? Quelle substance utilise un tube de revêtement sans laine de verre?

Le point actif sur la gaine d'entrée d'échantillon peut adsorber les composants de l'échantillon, provoquant un glissement des pics chromatographiques, une perte de sensibilité et de reproductibilité.

Lorsqu'il n'y a pas de shunt dans l'échantillon et l'analyse des composés légèrement polaires, il convient de recommander un tube de revêtement désactivé.

Utilisation de laine de verre:

A. réduire la discrimination thermique et fournir une surface suffisante pour la volatilisation des échantillons *

B. capture des composants non volatils et des débris de rembourrage afin qu'ils ne pénètrent pas dans la colonne de chromatographie

C. essuyez l'échantillon sur l'aiguille de la seringue, améliorant ainsi la reproductibilité et évitant le résidu de l'échantillon sur le tampon.

Les composés utilisés pour la désactivation sans Liner de laine de verre sont: les Phénols, les acides organiques, les pesticides, les Amines, les drogues abusives, les composés polaires réactifs, les composés thermolables.

Mode d'admission sans dérivation: analyse des traces, faible concentration de l'échantillon, faible débit, petite quantité d'admission.

Mode d'admission de flux partiel: concentration élevée de l'échantillon, grand débit, grande quantité d'admission.

9. Anneau o d'hydrocarbures fluorés et anneau o de graphite

Halocarbure o - ring: pas facile à déformer, facile à remplacer, utilisé dans la plupart des cas

O - ring en graphite: facile à déformer et à peler, utilisé lorsque la température de l'entrée d'échantillon est supérieure à 350 degrés.

Fréquence de remplacement: les deux remplacent généralement le joint torique en même temps lors du remplacement du tube de revêtement

10. Comment nettoyer la plaque de dérivation (joint plaqué or)

A. nettoyage par ultrasons dans le solvant, séchage;

B. désactivation avec un réactif non chlorosilylant: hmds (hexaméthyldisilane) ou bstfa (n, O bis (* ylsilyl) ou BSA (n, O bis (* ylsilyl) acétamide) ou Tsim, Tsim (n - * ylsilanimidazole)

C. nettoyage avec solvant, d'abord inerte - toluène, puis alcool - méthanol, séchage.

11. Quels sont les détecteurs NPD, ECD, TCD, FID, FPD, respectivement, et quelles sont les caractéristiques de performance?

12. Quels sont les paramètres de colonne pour la colonne de chromatographie? Comment choisir une colonne chromatographique pour un client en fonction de ces paramètres?

Paramètres de la colonne de chromatographie: phase stationnaire, longueur de la colonne, diamètre intérieur, épaisseur du film.

Choix de la phase stationnaire: principe de dissolution de phase similaire.

Colonne non / faiblement polaire – normalement! Colonne de polarité moyenne – pour les séparations complexes / difficiles; Colonne de forte polarité - multi pour des applications spéciales.

Longueur de la colonne:

10 ~ 15m analyse rapide des échantillons simples en dessous de dix composants habituels

Longueur de colonne standard de 25 à 30 m pour la plupart des applications

Analyse d'échantillons complexes de 50m, 60m, 100m

Diamètre intérieur:

0.53mm grand calibre peut remplacer la colonne de remplissage peut résister à un volume plus important d'échantillon entrant, l'analyse des traces

0,32 mm de large diamètre, échantillon d'entrée shunt / no shunt, peut résister à un échantillon d'entrée de plus grand volume

Échantillon de dérivation de diamètre étroit de 0,25 mm, application GC / MS, effet de colonne supérieur

0.18mm micro - diamètre séparation plus rapide effet de colonne élevé

GC rapide de 0.10mm, séparation rapide pour des exigences élevées d'instrument

Épaisseur du film:

0.10um film, rétention et capacité de colonne faible pour les composés à point d'ébullition élevé, les échantillons denses de composants ou les composés sensibles à la chaleur 0.25 ~ 0.50um épaisseur de film Standard Large application

1.0 ~ 10.0um rétention de film épais et capacité de colonne élevée pour les composés volatils à bas point d'ébullition

Les films épais favorisent le masquage des sites actifs mais la colonne perd plus à haute température

13. Que signifient les limites de température des colonnes de chromatographie telles que 60℃ à 240℃ / 260℃?

60 ℃ - limite inférieure de la température, en dessous de laquelle l'efficacité de la colonne sera réduite, mais n'endommagera pas la colonne de chromatographie

240 ℃ - limite supérieure de température constante, peut être utilisé à cette température pendant une longue période

260 ℃ - la température de montée en température maximale du programme ne doit pas être dépassée et ne doit pas être utilisée pendant plus de 10 minutes

14. Comprendre plusieurs paramètres concernant les colonnes de chromatographie liquide et la classification et l'application des colonnes Agilent.

Surface - la somme de la surface extérieure et de la surface des pores intérieurs des particules, exprimée en m2 / gramme;

La surface élevée a une forte capacité de rétention pour la séparation des échantillons Multi - composants, la capacité de la colonne et le degré de séparation;

Le remplissage à faible surface peut souvent atteindre rapidement l'état d'équilibre, particulièrement important pour le lavage en gradient

Taille des pores – taille moyenne des pores ou des cavités des particules, allant de 60 à 10 000 Å

Granulés de remplissage de grands pores peuvent prolonger le temps de rétention des macromolécules de soluté à la surface de remplissage, atteindre une séparation suffisante, améliorer la forme du pic; échantillon MW ≤ 4000, diamètre des pores choisi 80 Å, échantillon MW > 4000, diamètre des pores choisi 300 Å
Couverture carbone – effet sur la séparation chromatographique, quantité de phase de liaison liée à la substance de la matrice.

Couverture de carbone élevée: résolution améliorée, long temps d'analyse; Faible couverture carbone: temps de fonctionnement réduit

Terminaison / terminaison - effet sur la séparation chromatographique, liaison de groupes hydroxyles de silicium libres à l'aide de chaînes alcanes plus courtes (liaison secondaire)

Fermeture: atténue le phénomène de traînée des pics chromatographiques résultant de la réaction du composant à tester avec les hydroxyles siliciques acides résiduels à la surface du gel de silice

Pour les échantillons polaires, il existe une nette différence de sélectivité entre la colonne non scellée et la colonne chromatographique ayant subi un traitement de fermeture

Taille des particules - - 1.8um3.5um → séparation rapide

5um → normes de l'industrie

7um → colonne de préparation

15. Comment rincer la colonne de chromatographie liquide?

Pour le rinçage de la colonne de chromatographie en phase inverse:

Rincer la colonne de chromatographie (colonne d'analyse) avec au moins 25 ml de chacun des solvants suivants:

Phase mobile sans sels tampons

100% méthanol, 100% acétonitrile, 75% acétonitrile + 25% Isopropanol, 100% Isopropanol, 100% dichlorométhane, 100% hexane

* Si la colonne chromatographique est rincée à l'hexane ou au dichlorométhane, la colonne doit être rincée à l'isopropanol avant de réutiliser la phase mobile inverse!!!

Pour le rinçage de la colonne de chromatographie en phase normale:

Rincer la colonne de chromatographie (colonne d'analyse) avec au moins 50 ml de chacun des solvants suivants:

50% méthanol + 50% trichlorométhane

100% acétate d'éthyle

16. Comment vieillir une colonne de chromatographie en phase gazeuse?

Après l'installation de la colonne de chromatographie, d'abord souffler la colonne de chromatographie avec au moins 3 fois le débit de travail habituel, puis ajuster le débit de gaz porteur au débit normal, commencer à chauffer rapidement de 100 degrés de réchauffement à la température de vieillissement, vieillissement de la colonne de chromatographie.

Température de vieillissement - au - dessus de la température finale de l'analyse de l'échantillon de 20 degrés, mais pas au - dessus de la limite supérieure de la température thermostatique de la colonne de chromatographie, la méthode de thermostatation de 2 heures vieillit rapidement une nouvelle colonne de chromatographie capillaire, le taux de réchauffement de la colonne de chromatographie au vieillissement n'est pas limité, c'est - à - dire que la colonne de chromatographie vieillit à l'aide du taux de réchauffement

17. Quels sont les composants importants d'un chromatographe liquide? Quels sont les détecteurs de la phase liquide?

Dégazeur, pompe, thermostat de colonne, échantillonneur automatique, détecteur. Les détecteurs sont:

Détecteur UV à longueur d'onde variable VWD, détecteur à matrice de diodes Dad, détecteur multi - longueur d'onde MWD, RID、 Détecteur de réfraction différentielle, détecteur de fluorescence fld.

18. Comment choisir la tête de filtre d'entrée de solvant?

Les têtes de filtration de solvant pour les phases liquides classiques et capillaires sont: tête de filtration en verre diamètre de pore 20µm (5041 - 2168), tête de connexion PTFE 5mm / 3.2mm (5062 - 8517), tête de filtration en acier inoxydable diamètre de pore 12 - 14µm (01018 - 60025)

Les têtes de filtration de solvant pour la préparation de la phase liquide sont: tête de filtration en verre 40 μm diamètre de pore (3150 - 0944), tête de connexion PTFE 7 mm / 4 mm (g1361 - 23204)

Les têtes de filtre en acier inoxydable doivent être évitées si la phase mobile concerne les solvants suivants: iodure de lithium, acide nitrique et acide sulfurique à haute concentration, solution d'acide organique dans un solvant organique, tel que l'acide acétique à 1% dans le méthanol peut corroder l'acier inoxydable, tétrachlorure de carbone et mélange d'alcool isopropylique ou de THF, etc.

Nettoyage quotidien de la cartouche en verre peut être immergé dans 35% d'acide nitrique pendant 1 heure (sans nettoyage par ultrasons, peut provoquer des fissures)

19. Guide de sélection des bassins de circulation

Colonne de chromatographie liquide capillaire (diamètre interne 0,3 ou 0,5 mm) Cellule de circulation de 500 NL;

Cellule semi - circulante pour colonne de chromatographie liquide à microdiamètre ou économie de solvant (diamètre intérieur 1,0 ou 2,1 mm);

Colonne de chromatographie liquide traditionnelle (diamètre intérieur 3,0 ou 4,6 mm) contre - pression de cellule de circulation standard supérieure à 100 bar, forme de cellule de circulation haute pression; Pour un échantillon MW ≤ 4000, une taille de pore de 80 Å est choisie et pour un échantillon MW > 4000, une taille de pore de 300 Å est choisie;

Couverture carbone – effet sur la séparation chromatographique, quantité de phase de liaison liée à la substance de la matrice.

Couverture de carbone élevée: résolution améliorée, long temps d'analyse; Faible couverture carbone: temps de fonctionnement réduit

Effet sur la séparation chromatographique en utilisant des chaînes alcanes plus courtes pour lier des groupes hydroxy - silicium libres (liaison secondaire)

Fermeture: atténue le phénomène de traînée des pics chromatographiques résultant de la réaction du composant à tester avec les hydroxyles siliciques acides résiduels à la surface du gel de silice

Pour les échantillons polaires, il existe une nette différence de sélectivité entre la colonne non scellée et la colonne chromatographique ayant subi un traitement de fermeture

Taille des particules: 1.8um3.5um → séparation rapide

5um → normes de l'industrie

7um → préparation