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Le système de chromatographie liquide fonctionne généralement avec un échantillonneur automatique
Date :2025-05-27Lire :0
Le système de gestion des solvants d'un système de chromatographie liquide est chargé de fournir une phase mobile appropriée, qui résulte généralement d'un mélange de plusieurs solvants tels que le méthanol, l'acétonitrile, l'eau, etc. Différents échantillons et besoins de séparation nécessitent différentes compositions et phases mobiles. Par exemple, dans la chromatographie liquide en phase inverse, la phase mobile affecte l'ordre d'élution des composants, plus la capacité d'élution des composants est faible. La pompe joue un rôle clé dans le système de gestion des solvants, elle délivre la phase mobile de manière continue et stable, assurant ainsi le bon déroulement du processus de chromatographie. Les pompes courantes sont les pompes binaires et quaternaires, les pompes quaternaires peuvent être mélangées pour transporter quatre solvants, ce qui permet un ajustement plus flexible de la composition de la phase mobile.
Le système d'échantillonnage est responsable de l'introduction de l'échantillon à analyser dans la colonne chromatographique. Il nécessite un contrôle précis de la quantité d'échantillon pour garantir l'exactitude et la répétabilité des résultats d'analyse. Le système moderne de chromatographie liquide utilise généralement un échantillonneur automatique, qui peut être prélevé et injecté avec précision dans l'échantillon selon une procédure prédéfinie, améliorant ainsi l'efficacité de l'analyse.
Au cœur du système de séparation se trouve une colonne chromatographique remplie d'une phase stationnaire spécifique. Les types de phases stationnaires sont variés, tels que le gel de silice, le collage est égal, différents types de phases stationnaires sont adaptés à l'analyse d'échantillons de nature différente. Au cours de la chromatographie, l'échantillon est constamment réparti entre une phase fixe et une phase mobile, les composants étant progressivement séparés par des forces différentes de celles des deux phases.
Les systèmes de détection sont utilisés pour surveiller et déterminer les composants après séparation. Les détecteurs courants sont les détecteurs UV, les détecteurs de fluorescence, etc. Les détecteurs UV analysent quantitativement les composants en mesurant l'absorption d'un échantillon de rayons UV à une longueur d'onde spécifique, avec une large gamme d'applications; Le détecteur de fluorescence détecte en fonction des caractéristiques de fluorescence de l'échantillon et a une sensibilité élevée.
Le système de traitement de données est responsable de l'acquisition, du traitement et de l'analyse des signaux en sortie des détecteurs. Il peut enregistrer le temps de rétention des pics chromatographiques, la hauteur des pics, la zone des pics et d'autres informations, déterminer la teneur et la pureté de chaque composant de l'échantillon par comparaison avec des produits standard ou en utilisant le logiciel approprié.
液相色谱系统
Méthode de détection d'un système de chromatographie liquide:
1. Vérification de l'apparence et de l'intégrité:
- vérifiez que chaque composant est complet, y compris la pompe à perfusion, l'échantillonneur, la colonne de chromatographie, le détecteur, etc., avec l'apparence de dommages, de déformation, de corrosion, etc.
- vérifiez si chaque ligne de connexion est en bon état, aucun problème de casse, de vieillissement, de fuite, etc., assurez - vous que la connexion de la ligne est serrée.
2. Vérification fonctionnelle:
- pompe à perfusion: Allumez la pompe à perfusion et vérifiez qu'elle fonctionne correctement avec un bruit ou des vibrations inhabituels. Vérifiez que l'affichage de la pression de la pompe est normal et fonctionne de manière stable dans la plage de pression définie. Dans le même temps, vérifiez la fonction de régulation du débit de la pompe pour voir si vous pouvez régler et stabiliser avec précision les différents débits de sortie.
- Échantillonneurs: pour les échantillonneurs manuels, vérifiez que leur fonctionnement est fluide, que l'aiguille d'échantillonnage n'est pas bloquée ou endommagée et que la précision de l'échantillonnage répond aux exigences. Pour les échantillonneurs automatiques, en plus de vérifier l'état de l'aiguille d'admission, vérifiez que ses fonctions telles que l'ordre d'admission, la précision et la répétabilité de la quantité d'admission sont normales.
- détecteur: les méthodes de détection des différents types de détecteurs varient. Comme un détecteur UV, vérifiez que sa source lumineuse émet normalement de la lumière et que le réglage de la longueur d'onde est précis; Détecteur de fluorescence pour vérifier si les réglages des longueurs d'onde d'excitation et d'émission sont exacts, si la sensibilité est normale, etc. Dans le même temps, vérifiez que la ligne de base du détecteur est stable, avec ou sans bruit anormal ou dérive.
- colonne chromatographique: voir si l'apparence de la colonne chromatographique est endommagée et si les joints de colonne sont en bon état. Vérifiez que l'identification de la colonne de chromatographie est claire, y compris des informations telles que la longueur de la colonne, le diamètre intérieur, le type de remplissage, etc.
3. Essai d'adaptabilité du système:
- détermination théorique du nombre de plateaux: sélection de substances étalons appropriées, telles que le naphtalène, etc., formulées en solution à une certaine concentration, à analyser dans des conditions chromatographiques spécifiées. Le nombre théorique de plateaux est calculé en fonction du temps de rétention et de la demi - hauteur - largeur des pics chromatographiques pour évaluer l'efficacité de séparation des colonnes chromatographiques.
- détermination du degré de séparation: l'analyse de séparation est effectuée dans les conditions chromatographiques sélectionnées à l'aide d'une solution standard mixte contenant plusieurs composants. Le degré de séparation est calculé en mesurant des paramètres tels que le temps de rétention, la largeur du pic, etc. de deux composants adjacents, en vérifiant si la capacité du système à séparer les différents composants répond aux exigences.
- test de répétabilité: une solution étalon de même concentration est prélevée plusieurs fois de suite, en observant la cohérence des paramètres de temps de rétention, de surface de pic ou de hauteur de pic pour chaque prélèvement afin d'évaluer la répétabilité du système.