Test de prolifération cellulaire et de toxicité du kit solebao CCK - 8

Le SolarbioSolebao CA1210 CCK-8Kits de réactifs(Kit de détection de prolifération cellulaire et de toxicité) et

Test de prolifération cellulaire et de toxicité du kit solebao CCK - 8

Numéro d'expédition du produit:CA1210

Nom du produit:CCK-8Kits de réactifs(Kit de détection de prolifération cellulaire et de toxicité) et

Spécifications du produit:100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T

Introduction au produit:

CCK-8Kits de réactifs(Kit de détection de prolifération cellulaire et de toxicité) et

Les paramètres du produit spécifique sont soumis aux paramètres de la description du produit reçu

Spécifications:10*1000T ; 10*500T ; 1000T ; 100T ; 500T

Conditions de stockage:4℃ scellé contre la lumière

Kit de comptage de cellules-8Court termeCCK-8Kit, pourMTTLa méthode alternative à la loi est basée surWST(sel de tétrazole soluble dans l'eau, nom chimique:2 - (2 -Méthoxy- 4 -Nitrophényle) - 3 - (4 -Nitrophényle) - 5 - (2,4 -Disulfurobenzène)-2H-Sel monosodique de tétrazole) est largement utilisé dans les kits de détection rapide et très sensible de la prolifération cellulaire et de la Cytotoxicité. Il peut être utilisé pour le dépistage de médicaments, la détermination de la prolifération cellulaire, la détermination de la Cytotoxicité, la sensibilité aux médicaments tumoraux et d'autres tests.

Instructions d'utilisation:
I. faire une courbe standard (lors de la détermination du nombre spécifique de cellules (lors de la détermination du nombre spécifique de cellules)
1, le nombre de cellules dans la suspension cellulaire préparée est d'abord compté avec une plaque de comptage cellulaire, puis les cellules sont ensemencées.
2, dilué dans un gradient de concentration cellulaire par rapport au milieu de culture en proportions égales, généralement à faire3 - 5Gradient de concentration cellulaire, par groupe3 - 6Un trou reconstitué.
3, culture après inoculation jusqu'à la paroi cellulaire, puis ajoutCCK-8Dosage des réactifs après un certain temps de cultureODValeur, faire une barre avec le nombre de cellules en abscisse (XAxes),ODLa valeur est l'ordonnée (YLa courbe standard de l'axe). Sur la base de cette courbe standard, le nombre de cellules d'un échantillon inconnu peut être déterminé (l'essai de cette courbe standard suppose que les conditions de l'expérience soient cohérentes, ce qui facilite la détermination du nombre d'inoculations de cellules et l'incorporationCCK-8Temps de culture après. ) et

II. Détection de l'activité cellulaire

1, dans 96 Suspension cellulaire inoculée dans les plaques de puits (100µL/Le trou). Placer la plaque de culture dans un incubateur pour préculture (dans37 ℃, 5 % de CO2Aux conditions).

2Ajouter à chaque trou10µL CCK-8Solutions (attention à ne pas créer de bulles dans les trous, elles peuvent affecterODLecture des valeurs).

3Incuber la plaque de culture dans l'incubateur1 à 4Heures.

4Déterminé à l'aide d'un étalon enzymatique450 nmAbsorbance à l'endroit.

5En cas de non détermination temporaireODLa valeur, à déterminer plus tard, peut être ajoutée à chaque trou10µL 0.1MdeHClou1% SDS (W/V)Solution et couvrir la plaque de culture à l'abri de la lumière à conserver à température ambiante. Dans 24 L'Absorbance ne change pas pendant l'heure.

Iii. Valeur ajoutée cellulaire-Détection de toxicité

1, dans 96 Configuration dans la plaque de trou100 µLLa suspension cellulaire. Préculture de la plaque de culture dans l'incubateur 24 Heures (dans37 ℃,5 % de CO2Aux conditions).

2Ajouter à la plaque de culture10µLDifférentes concentrations de la substance à mesurer. Incuber dans l'incubateur pendant une période appropriée (par exemple:6、12、24 ou 48 Heures).

3Ajouter à chaque trou10 µL de CCK-8Solutions (attention à ne pas créer de bulles dans les trous, elles peuvent affecterODLecture des valeurs). Si la substance à mesurer est oxydante ou réductrice, elle peut être ajoutéeCCK-8Le milieu frais a été préalablement remplacé (le milieu a été éliminé et les cellules ont été lavées deux fois avec le milieu, puis un nouveau milieu a été ajouté) pour éliminer les effets du médicament.

4Incuber la plaque de culture dans l'incubateur1 à 4Heures.

5Déterminé à l'aide d'un étalon enzymatique450 nmAbsorbance à l'endroit.

6En cas de non détermination temporaireODLa valeur, à déterminer plus tard, peut être ajoutée à chaque trou10µL 0.1MdeHClou1% SDS (W/V)Solution et couvrir la plaque de culture à l'abri de la lumière à conserver à température ambiante. Dans 24 L'Absorbance ne change pas pendant l'heure.

Calcul de vitalité:.

Viabilité cellulaire (%)=[A(Médication) et–A(vide)]/[ A(0Médication) et–A(vide)] × 100

A(dosage): avoir des cellules,CCK-8Absorbance des pores de la solution et de la solution pharmaceutique

A(blanc): avec un milieu de culture etCCK-8Absorbance des pores de la solution sans cellules

A（0 Dosage): avec des cellules,CCK-8Absorbance des pores de la solution sans solution pharmaceutique

Viabilité cellulaire: viabilité cellulaire proliférative ou viabilité cytotoxique

Précautions:

①Il est recommandé de faire d'abord plusieurs trous pour tâtonner le nombre de cellules inoculées et ajouterCCK-8Temps de culture après réactifs.

②Les globules blancs peuvent nécessiter une culture plus longue.

③Lorsque les normes sont utilisées 96 Lors de la plaque de puits, la quantité minimale d'inoculation des cellules plaquées est d'au moins1 000un/trou(100 µLMilieu de culture) et. la sensibilité lors de la détection des globules blancs est relativement faible, de sorte que la quantité d'inoculation recommandée n'est pas inférieure à2500un/trou( 100 µLMilieu de culture) et. Si vous souhaitez utiliser 24 Plaque de trou ou 6 Essai de plaque de puits, veuillez d'abord calculer la quantité d'inoculation correspondante par puits et suivre le volume total de milieu de culture par puits10%AdhérerCCK-8La solution.

④Si aucun450 nmLe filtre, qui peut utiliser l'Absorbance dans430-490 nmFiltre entre, mais450 nmLa sensibilité de détection est la plus élevée.

⑤L'Absorbance du rouge de phénol dans le milieu de culture peut, au moment du calcul, être éliminée en déduisant l'Absorbance du fond dans les puits vides et n'a donc pas d'effet sur la détection.

Test de prolifération cellulaire et de toxicité du kit solebao CCK - 8

Informations sur la commande de produits:

CA1210 CCK-8Kits de réactifs(Kit de détection de prolifération cellulaire et de toxicité) et 100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T