(service expérimental) Détermination de la prolifération cellulaire et de la toxicité

(service expérimental) Détermination de la prolifération cellulaire et de la toxicitéLe principe de base est le suivant: le réactif CCK - 8 contient un composé appelé wst - 8 qui, sous l'action de la déshydrogénase intramitochondriale des cellules vivantes, est réduit pour produire un produit soluble dans l'eau, le méthyl - 臜 orange. Plus l'activité cellulaire est élevée, plus l'activité de la déshydrogénase est forte, plus la quantité de méthyl 臜 produite est importante et plus la couleur est foncée. Les étapes opératoires de base sont les suivantes: après ensemencement des cellules dans les plaques de culture et administration des différents traitements, le réactif CCK - 8 est directement ajouté et incubé pendant 1 à 4 heures. Les valeurs d'Absorbance de chaque puits sont ensuite détectées à une longueur d'onde de 450 nm à l'aide d'un étalon enzymatique. Cette valeur de do présente une bonne corrélation linéaire et positive avec le nombre de cellules vivantes, ce qui permet de quantifier avec précision l'activité cellulaire, d'évaluer la toxicité des composés ou de cribler les médicaments pro - prolifératifs. Cette méthode est plus sûre et pratique que la méthode MTT et est largement utilisée dans la recherche biomédicale.