Lyophilisat de cellules CP - 1 (lyophilisat de qualité clinique)
・obtenir la qualification pour les matériaux de produits tels que la Médecine régénérative au Japon
1. Les produits ont commencé à promouvoir l'application à partir de 1992
2. Production et fabrication dans l'équipement GMP au Japon
3. Des expériences non cliniques ont été menées
5. Peut être congelé et conservé dans le réfrigérateur à - 80 ℃
6. Ne contient pas d'ingrédients d'origine animale
7. Composition ouverte et transparente
8. Posséder le certificat d'enregistrement japonais de substance médicamenteuse (MF)

Exemples d'applications
I méthode de congélation des cellules en suspension et des cellules plaquées

II méthode de Cryoconservation / décongélation de cellules souches hématopoïétiques utilisant CP - 1hg

III。 Méthode de Cryoconservation / décongélation utilisant des cellules souches mésenchymateuses CP - 1hg
Préparation du liquide de conservation congelé
·1. CP - 1 haute qualité, 25% HSA, refroidir le milieu à 4 ℃.
·2. Ajouter CP - 1 Advanced 6,8 ML, 25% HSA 3,2 ML et 10,0 ml de milieu dans un tube à centrifuger et mélanger uniformément.
· 3. S'il vous plaît garder à 4 ℃ avant utilisation imminente.
Cryoconservation des cellules
·1. Recueillir les cellules à cryoconserver avec la solution de décapage et compter le nombre de cellules.
· 2. Centrifuger pour éliminer le surnageant.
·3. Ajout préalable de CP - 1 haute teneur / 25% HSA / milieu (préparation du cryoconservateur - 2) refroidi à 4°C, suspension homogène à 1 × 10 6 cellules / ML.
· 4. Placer 1 mL chacun dans un tube congélateur, dans un récipient congélateur et congeler lentement à - 80 ° c.
· 5. Déplacez - vous à l'azote liquide ou dans une armoire froide profonde à - 150 ℃ le lendemain.
Décongeler les cellules
·1. Préparer au préalable 9 ml de milieu dans un tube à centrifuger.
· 2. Retirer le tube congélateur congelé de l'azote liquide et le faire fondre rapidement dans un bain chaud à 37 ° c.
·3. Ajouter toutes les cellules décongelées au milieu de culture et centrifuger.
·4. Enlever le surnageant et ajouter la bonne quantité de milieu.
· 5. Culture dans des conditions optimales pour chaque type de cellule utilisée.
IV Résultats de l'évaluation (cryopréservation des cellules souches mésenchymateuses)
V cryopréservation des cellules IPS / es avec CP - 1hg et évaluation
Ⅰ.Méthode de congélation des cellules en suspension et des cellules plaquées
II. CP-1®Haute qualitéfroidgelersauvegarder/ SolutiongelerHématopoïèse sècheFineLa méthode des cellulesIII. CP-1®Haute qualitéApplication à InterChargementqualitésecFineRefroidissement des cellulesgelersauvegarder/ SolutiongelerLes Parties法语
Préparation du liquide de conservation congelé
·1. CP - 1 haute qualité, 25% HSA, refroidir le milieu à 4 ℃.
·2. Ajouter CP - 1 Advanced 6,8 ML, 25% HSA 3,2 ML et 10,0 ml de milieu dans un tube à centrifuger et mélanger uniformément.
· 3. S'il vous plaît garder à 4 ℃ avant utilisation imminente.
Cryoconservation des cellules
·1. Recueillir les cellules à cryoconserver avec la solution de décapage et compter le nombre de cellules.
· 2. Centrifuger pour éliminer le surnageant.
·3. Ajout préalable de CP - 1 haute teneur / 25% HSA / milieu (préparation du cryoconservateur - 2) refroidi à 4 °C,
Suspension homogène à 1 x 10 6 cellules / ML.
· 4. Placer 1 mL chacun dans un tube congélateur, dans un récipient congélateur et congeler lentement à - 80 ° c.
· 5. Déplacez - vous à l'azote liquide ou dans une armoire froide profonde à - 150 ℃ le lendemain.
Décongeler les cellules
·1. Préparer au préalable 9 ml de milieu dans un tube à centrifuger.
· 2. Retirer le tube congélateur congelé de l'azote liquide et le faire fondre rapidement dans un bain chaud à 37 ° c.
·3. Ajouter toutes les cellules décongelées au milieu de culture et centrifuger.
·4. Enlever le surnageant et ajouter la bonne quantité de milieu.
· 5. Culture dans des conditions optimales pour chaque type de cellule utilisée.
Ⅳ.CommentairesPrixNoeudLes résultats (ChambreChargementqualitésecFineRefroidissement des cellulesgelersauvegarder) et
[objectif] À propos des cellules souches mésenchymateuses humaines (csmh), qui devraient être utilisées dans le futur en Médecine régénérative, peuvent - elles être congelées et conservées dans la classe supérieure CP - 1 et peuvent - elles être transportées de manière stable et à long terme par de la glace carbonique bon marché et pratique?
[méthode] les cellules souches mésenchymateuses dérivées de graisse humaine (MSC - at) ou les cellules souches mésenchymateuses dérivées de moelle osseuse humaine (MSC - BM) sont congelées dans CP - 1high grade ou contrôle (A dans la figure ci - dessous) (1 x 106 cellules) / ML) et stockées dans un réservoir d'azote liquide. Après stockage dans un réservoir d'azote liquide, l'adhérence aux vaisseaux sanguins (adhérence = nombre de cellules vivantes / nombre de cellules vivantes inoculées) doit être confirmée par le stockage dans une hypothèse de transport de glace carbonique (- 80 °C · 7 jours, - 60 °C · 3 jours, 60 °C · 7 jours), de survie immédiate après la fonte et dans chaque condition de culture le lendemain.
[résultats] dans toutes les conditions, le taux de survie après la fonte était supérieur à 90% et aucune différence n'a été observée (figure B ci - dessous). Cependant, dans le hmsc congelé comme témoin, de nombreuses cellules mortes n'ayant pas adhéré à l'incubateur ont été observées le lendemain de la décongélation lorsqu'Elles ont été entreposées à - 60 °C, mais très peu de cellules mortes ont été observées dans le hmsc congelé dans CP - 1 et presque toutes les cellules mortes ont été observées. Connecter les cellules (B et c dans la figure ci - dessous).
[conclusion] Étant donné que la température de la glace carbonique elle - même est d'environ - 80 °C, nous croyons que les hmsc congelés dans le CP - 1high grade peuvent être transportés de façon stable et à long terme à l'aide de glace carbonique.