Kit de ligation rapide ADN T4 et autres

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Vue d'ensemble

Ce kit permet de compléter rapidement la réaction de ligation visqueuse ou plate d'un fragment d'ADN à température ambiante (22 176; c) pendant 10 minutes. Les produits de liaison sont directement transformables. Peut être utilisé pour le clonage de fragments d'ADN, la construction de bibliothèques, le clonage ta, la connexion Linker, etc. $R $ndna kit de ligation rapide T4 et autres

Détails du produit

Kit de ligation rapide ADN

Kit de ligation rapide ADN T4 et autres

Numéro de catalogue:42110

Numéro de catalogue	Unités d'emballage
42110 - 20	20 fois
42110 à 60	60 fois

Composants	42110 - 20	42110 à 60
2 tampon de ligation xQuick	100 ml	300 ml
Q4 ADN ligase, 5 U /ml	100 U	300 U

Stockage des produits:-20°C conserver pour éviter de congeler et de dégeler à plusieurs reprises trop souvent.

Description du produit:Ce kit peut être utilisé à température ambiante (22°C) La réaction de ligation visqueuse ou plate d'un fragment d'ADN est rapidement terminée dans des conditions de 10 minutes. Les produits de liaison sont directement transformables. Peut être utilisé pour le clonage de fragments d'ADN, la construction de bibliothèques, le clonage ta, la connexion Linker, etc.

caractéristiquePour:Les extrémités plates rapides, simples et visqueuses peuvent toutes compléter la réaction de connexion en 10 minutes.

Étapes opérationnelles:

1. La réaction s'effectue selon le système suivant:

5 ml	2 tampon de ligation xQuick
ml	ADN vecteur (30-60ng)
ml	Insert DNA (quantité 3 fois le nombre de moles de vecteur, rapport molaire insertion et vecteur 3: 1)
ml	Eau stérile
1 ml(5 unités Weiss/ml)	Q4 ADN ligase
Volume final	10ml

Généralement ajouter T4 ADN ligase à la fin, bien mélanger, peut être centrifugé instantanément pour recueillir le liquide au fond du tube.

2. 22°C connexion pendant 10 minutes (généralement peut être fait à l'instrument PCR).

Généralement recommandé 22°Connexion C pendant 5 - 10 minutes, la connexion de fragments longs > 3 KB peut être prolongée jusqu'à 30 minutes. Plus de 30 minutes ne sont pas recommandées, au - delà de ce qui peut réduire le nombre de transformants.

3. Refroidissement sur glace, puis transformation directe ou stockage à - 20°CStocké à - 20°C， La conversion doit être redissoute sur la glace avant de bien mélanger pour la conversion.

Explication :

1. Ne pas inactiver thermiquement T4 ADN ligase avant la transformation, sinon l'efficacité de la transformation sera réduite.

2. Volume de fragments d'ADN supérieur à 4mL, peut être augmenté de 2 x Quick ligation Buffer, le volume de réaction total peut être augmenté à 20.ml， Un plus grand volume de fragments d'ADN peut ainsi être incorporé dans le système de ligation.

Kit de ligation rapide ADN T4 et autres

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