L'appareil ELISA à plaques lavées à la main est une technologie d'immunodosage en phase solide hautement sensible largement utilisée dans la recherche biomédicale, le diagnostic clinique et la détection environnementale. Il est principalement utilisé pour détecter des protéines spécifiques (par exemple, des anticorps, des antigènes), des hormones, des médicaments, etc. dans le sang, d'autres fluides corporels ou des surnageants de culture cellulaire.
L'appareil ELISA à plaques lavées à la main est une technologie d'immunodosage en phase solide hautement sensible largement utilisée dans la recherche biomédicale, le diagnostic clinique et la détection environnementale. Il est principalement utilisé pour détecter des protéines spécifiques (par exemple, des anticorps, des antigènes), des hormones, des médicaments, etc. dans le sang, d'autres fluides corporels ou des surnageants de culture cellulaire.
Lors de la réalisation d'expériences ELISA, l'unité de lavage de plaques à la main est un outil important pour éliminer les réactifs non liés afin de réduire le signal de fond et d'améliorer la spécificité et la précision de la détection. Le rôle de l'unité de lavage à la main Elisa et son processus de fonctionnement seront ensuite détaillés:
Rôle de l'appareil de lavage manuel ELISA
Élimination des substances non liées: Au cours du processus ELISA, lorsque l'échantillon est incubé avec des anticorps ou des antigènes encapsulés sur une microplaque, les composants non liés doivent être éliminés. Le dispositif de lavage de plaque à la main répète le processus plusieurs fois en ajoutant une certaine quantité de tampon de lavage dans chaque micropuits, puis en aspirant, en veillant à ce que toutes les molécules non liées soient éliminées.
Réduction de la liaison non spécifique: en plus d'éliminer les réactifs non liés, le lavage à la main des plaques peut aider à réduire la liaison non spécifique possible. Les liaisons non spécifiques sont des événements de liaison qui ne dépendent pas des interactions spécifiques antigène - anticorps et qui augmentent le bruit de fond, ce qui affecte la précision du résultat final.
Maintenir les micropores humides: dans certains cas, un lavage approprié peut également aider à maintenir l'état humide de la surface microporeuse, ce qui est essentiel pour une distribution efficace des réactifs et l'efficacité de la réaction dans les étapes suivantes.
Processus opérationnel pour laver les plaques à la main
Préparation du liquide de lavage: des tampons de lavage appropriés, contenant généralement du tampon phosphate (PBS) ou de la saumure tampon tris (TBS), ainsi qu’une quantité appropriée d’agent détartrant (Tween 20 par exemple), sont formulés pour améliorer l’efficacité du lavage en fonction des besoins spécifiques du laboratoire.
Prélavage: parfois, avant de commencer officiellement le lavage, il peut y avoir une étape de prélavage où les microplaques sont rincées doucement avec une petite quantité de liquide de lavage, ce qui peut aider à nettoyer les impuretés à l’intérieur des trous.
Ajouter le liquide de lavage: utilisez une pipette multicanaux ou un dispositif de lavage manuel spécial de la plaque et ajoutez le tampon de lavage dans chaque micropuits selon le volume. Veillez à ne pas laisser le liquide déborder dans les trous adjacents afin de ne pas causer de contamination croisée.
Laisser reposer: après avoir ajouté le liquide de lavage, laissez - le rester à l'intérieur des micropores pendant un certain temps (généralement de 30 secondes à quelques minutes) afin de bien dissoudre et transporter les molécules non liées.
Séchage par aspiration: utilisez du papier absorbant ou un aspirateur spécial pour sécher le liquide de lavage à l'intérieur des micropores. Ce processus doit être doux et rapide, en évitant l'aspiration excessive conduisant à un séchage microporeux, tout en garantissant qu'aucun liquide résiduel ne reste au fond du trou.
Lavage répété: le processus d'addition et d'aspiration décrit ci - dessus doit généralement être répété 3 à 5 fois, en fonction des exigences du protocole expérimental. Le séchage microporeux doit être assuré entre chaque lavage afin d'éviter que l'effet de dilution n'affecte l'effet du lavage suivant.
Lavage final et séchage: après le dernier lavage, des étapes de séchage supplémentaires peuvent être effectuées, telles que l'inversion de la microplaque et le battement du dos, ou le séchage naturel à l'air sur du papier filtre propre, en veillant à ce qu'il n'y ait pas de liquide résiduel à l'intérieur des microplaques.
Inspection: après avoir terminé toutes les étapes de lavage, les microplaques doivent être soigneusement inspectées pour confirmer qu'il n'y a pas de taches visibles ou de présence de liquide résiduel, prêt pour l'expérience suivante.
conclusion
En conclusion, l'appareil de lavage manuel de plaques ELISA, bien qu'apparemment simple, joue un rôle essentiel pour garantir le succès des expériences ELISA. La bonne exécution des étapes de lavage des plaques peut non seulement améliorer la qualité des données expérimentales, mais aussi économiser du temps et des ressources, de sorte que la maîtrise de cette compétence est importante pour ceux qui travaillent dans des domaines connexes. Au fur et à mesure que la technologie évolue, les instruments automatisés de lavage de plaques deviennent de plus en plus populaires et peuvent effectuer des tâches de lavage plus précises en moins de temps, améliorant encore l'efficacité et la fiabilité des expériences ELISA. Cependant, la connaissance et la maîtrise des méthodes de lavage Manuel des plaques sont encore très nécessaires, en particulier sans équipement automatisé.