Elispot pro: Test humain IFN - γ (ALP) pour interféron humain

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Elispot pro: Human IFN - γ (ALP) Human Interferon Detection mabtech $R $nelispot, dont le nom complet est Enzyme - linked immunospot Detection, combine une technologie de culture cellulaire avec une technologie d'immunoadsorption enzymatique capable de détecter des situations de Cytokines sécrétées par des cellules individuelles. En termes simples, il s'agit de piéger les Cytokines sécrétées par les cellules en culture avec de bons anticorps et de les présenter de manière à ce qu'elles soient colorées par des taches enzymatiques.

Détails du produit

Elispot pro: Test humain IFN - γ (ALP) pour interféron humain

Principe expérimental mabtech elispot

L'expérience elispot utilise une membrane PVDF à base de plaques 96 puits (CAT: msips 4510, Millipore) encapsulées dans des anticorps monoclonaux spécifiques (nécessitant des anticorps non toxiques, sans endotoxines et de haute affinité) pour capturer les Cytokines sécrétées par les cellules.

Les cellules à détecter et les stimulateurs antigéniques sont ensuite ajoutés à la culture à l'intérieur des puits de la plaque de culture. Stimulé par un stimulateur, les cellules T sécrètent la cytokine correspondante pendant la période de temps correspondante. Les Cytokines sont alors capturées par les anticorps encapsulés sur la membrane.

Après lavage des cellules, les Cytokines capturées peuvent être associées à un deuxième anticorps marqué à la biotine, puis à la biotine avec l'enzyme scalavidine pour un rendu chromatique enzymatique chimique, permettant la formation d'une tache circulaire au niveau local de la membrane (bien sûr, un deuxième anticorps marqué à la fluorescéine peut également être utilisé, ce qui élimine les méthodes ultérieures de rendu chromatique chimique et permet de détecter plusieurs Cytokines à la fois), chaque tache correspondent à une cellule sécrétant une cytokine à l'origine.

En comptant le nombre de taches sur la membrane, divisé par le nombre total de cellules ajoutées au puits, on peut calculer le pourcentage de cellules positives.

MABTECHCette technique présente trois avantages majeurs:

I: haute sensibilité. Une seule cellule sur un million sécrète des Cytokines, ce qui représente une augmentation de 2 à 3 ordres de grandeur par rapport aux méthodes ELISA traditionnelles.

II: niveau unicellulaire, détection fonctionnelle des cellules vivantes. Elispot est la stimulation directe des cellules vivantes avec des antigènes, ce qui détecte la fonction des cellules vivantes.

Trois: opération facile et économique, peut effectuer un filtrage à haut débit. Elispot n'a pas de processus d'amplification cellulaire in vitro complexe, n'utilise pas d'isotopes et, selon une procédure expérimentale standardisée, un expérimentateur peut traiter des centaines d'échantillons simultanément avec une efficacité bien supérieure à celle des autres méthodes de détection.

Elispot pro: Test humain IFN - γ (ALP) pour interféron humain

Mabtech: 3420 - 2apt - 2 comprend:

Plaques pré-revêtues, mAb 1-D1K(2 plaques transparentes) Détection mAb: 7-B6-1, ALP (150 μl)

Substrat BCIP/NBT-plus (25 ml)

Contrôle positif: Anti-CD3 mAb (CD3-2) (100 μl)

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Le kit est destiné à l'énumération des cellules sécrétant l'IFN-y humain en utilisant l'essai ELISpot.

ComposantsConcentrationMontant

Capture du mAb 1-D1K1 mg/ml600 mètres

Détection de mAb 7-B6-1, biotine1 mg/ml50 μl

Streptavidine-ALP50 μl

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