Analyseur DSF haut débit

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Vue d'ensemble

Analyseur DSF à haut débit, l'analyseur DSF à haut débit (fluorescence différentielle à balayage) est un instrument avancé largement utilisé dans la recherche biopharmaceutique, l'analyse de la stabilité des protéines et d'autres domaines. Il permet de suivre les changements de conformation de la protéine au cours de la montée en température à l'aide d'un colorant Fluorescent ou d'un signal de fluorescence intraprotéique, en calculant sa température de fusion TM (température à laquelle la protéine pliée est égale à la protéine dépliée).

Détails du produit

I. principes fondamentaux

DSF (Differential Scanning Fluorometry) est une méthode d'évaluation de la stabilité thermique des protéines en chauffant lentement un échantillon sur un PCR quantitatif Fluorescent pour détecter la quantité de colorant Fluorescent lié à une protéine dont la structure a été modifiée pendant le chauffage. Il permet de suivre les changements de conformation de la protéine au cours de la montée en température à l'aide d'un colorant Fluorescent ou d'un signal de fluorescence intraprotéique, en calculant sa température de fusion TM (température à laquelle la protéine pliée est égale à la protéine dépliée).

II. Caractéristiques principales

Haut débit: les Analyseurs DSF à haut débit sont capables d'obtenir le plus d'informations possible en un temps extrêmement court. Par exemple, un analyseur du modèle supr - DSF peut effectuer une analyse de stabilité et un criblage de 384 échantillons en 60 à 80 minutes.

Faible coût: avec une plaque standard de 384 puits, aucun consommable spécial n'est nécessaire, ainsi que des capillaires, qui ne coûtent qu'environ 100 yuans à la fois.

Large plage de balayage de température: avec une large plage de balayage de température de 10 ℃ ~ 105 ℃, capable de couvrir les domaines de plusieurs protéines.

Haute sensibilité: avec un détecteur CMOS haute sensibilité, il est capable de détecter avec précision les changements de fluorescence.

Utilisation réduite de l'échantillon: l'utilisation de l'échantillon ne nécessite que 1020 μl, avec une plage de concentration de 0,05 mg / ML 250 mg / ML, adaptée à l'analyse de stabilité en plusieurs étapes.

Iii. Composition des instruments

Un analyseur DSF à haut débit se compose principalement des éléments suivants:

Lecteur de plaques: pour charger des plaques 384 puits, lire les informations de l'échantillon.

Source de lumière d'excitation: la longueur d'onde d'excitation LED est généralement adoptée, telle que 280nm, avec une puissance de sortie de 10mW.

Système de détection: comprend un spectromètre et un système de détection pour détecter les signaux de fluorescence. La gamme de longueur d'onde du spectromètre est généralement 310nm ~ 420nm.

Logiciel de traitement de données: utilisé pour tracer les courbes de variation de l'intensité de fluorescence en fonction de la température, calculer les valeurs de TM et les paramètres associés pour les échantillons de protéines en ajustant l'équation de Boltzmann.

Iv. Processus opérationnel

Le flux de fonctionnement d'un analyseur DSF à haut débit comprend généralement les étapes suivantes:

Préparation de l'échantillon: après mélange de l'échantillon de protéine et du colorant fluorescent, ajouter à la plaque 384 puits.

Paramètres de réglage: réglage des paramètres tels que le taux de réchauffement de l'instrument, la plage de température, etc.

Début de la détection: Placez la plaque 384 puits dans l'instrument et commencez à détecter le signal Fluorescent.

Analyse des données: les données de test sont traitées et analysées à l'aide d'un logiciel de traitement des données pour obtenir la valeur TM de l'échantillon de protéines et les paramètres associés.

V. Domaines d'application

Les Analyseurs DSF à haut débit ont un large éventail d'applications dans de nombreux domaines, y compris, mais sans s'y limiter:

Analyse de la stabilité des protéines: Évaluer la stabilité des protéines dans différentes conditions telles que la température, le pH, la Force ionique, etc.

Dépistage des médicaments: dépistage rapide des médicaments candidats liés à une protéine cible par des techniques de dépistage à haut débit.

Étude de la structure des protéines: l'étude des changements structurels et conformationnels des protéines fournit un soutien solide à des études telles que la cristallisation des protéines.

Étude des mécanismes d'inhibition des composés à petites molécules: pour le criblage des inhibiteurs de composés à petites molécules et l'étude de leurs mécanismes pharmacologiques.

Vi. Entretien et maintenance des instruments

Pour assurer le bon fonctionnement et prolonger la durée de vie des analyseurs DSF à haut débit, un entretien et une maintenance réguliers sont nécessaires. Cela comprend le nettoyage des surfaces des instruments, la vérification de l'état de fonctionnement des sources lumineuses et des systèmes de détection, l'étalonnage des instruments, etc. En outre, il est nécessaire de prêter attention aux conditions de manipulation et de stockage de l'échantillon et d'éviter les effets de la contamination et de la détérioration de l'échantillon sur les résultats expérimentaux.

Dans l'ensemble, l'analyseur DSF à haut débit est un instrument puissant et facile à utiliser avec de larges perspectives d'application dans des domaines tels que la recherche biopharmaceutique et l'analyse de la stabilité des protéines.

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