Kit de détection des acides nucléiques pour le virus de l'herpès équin de type 1 (EHV - 1)

[nom du produit]Virus de l'herpès équin1Type (EHV-1) kits de détection d'acides nucléiques

[spécifications d'emballage]50T / boîte

[méthode de produit]Fluorescence en temps réelMéthode PCR

Virus de l'herpès équin1Type (EHV-1) kits de détection d'acides nucléiques

Réactif RT - PCR, mélange de fluides enzymatiques, contrôle positif, contrôle négatif.

[conditions de stockage et date d'expiration]

Éviter la lumière- Conserver au - dessous de 20 ° C, éviter le gel et la dégel répétés, valable pendant 12 mois.

Instruments PCR quantitatifs à fluorescence en temps réel multicanaux tels que la série ABI, la série bio - rad, la série Agilent Stratagene MX, roche lightcycler r480, cepheid smartcycler, la série Rotor gene, la série Hangzhou Bozhou, etc.

[méthode d'inspection]

Préparation des réactifs (zone de préparation des réactifs)

（1) Retirer le kit du réfrigérateur, retirer le réactif nécessaire à l'expérience du kit, bien fondre le mélange et centrifuger instantanément pour éliminer le liquide de fixation de la paroi du tube.

（2) Comptabiliser le nombre de réactions (n) nécessaires lors de l'expérience et calculer les quantités des différents réactifs nécessaires lors de l'expérience selon le système réactionnel présenté dans le tableau ci - dessous.

N = nombre de contrôles négatifs (1t) + nombre de contrôles positifs (1t) + réserve d'erreur (1t) + nombre d'échantillons

（3) Ajouter les réactifs ci - dessus dans le tube de centrifugation stérile, centrifuger instantanément après un mélange complet. Les réactifs sont fractionnés dans le tube de réaction PCR selon une quantité de 20 µl / tube.

（4) transférer le tube de réaction PCR dans la zone de traitement des échantillons après avoir fermé le couvercle du tube de réaction PCR. Remettre les réactifs restants au réfrigérateur à une température inférieure à - 20 ° C pour les conserver congelés.

2. Préparation des échantillons (zone de traitement des échantillons)

UtiliserQiagen, roche Company DNA tiqudna Kit tiqudna, les opérations spécifiques fonctionnent selon leurs instructions de kit.

3. Échantillonnage

Préparé ci - dessusLes tubes d'échantillon de réaction de PCR ont été ajoutés séparément à l'ADN traité du spécimen à tester de 5 μl chacun, le volume final de 25 μl / tube, le couvercle de la réaction de PCR a été mélangé après centrifugation instantanée à faible vitesse, transféré sur l'instrument de PCR. Contrôle négatif et positif aux soins puis chacun plus 5 μl de kit pour apporter son propre contrôle négatif ou contrôle positif, le volume final est de 25 μl / tube, couvercle de la réaction PCR couvercle malaxé après centrifugation instantanée à faible vitesse, transféré à l'instrument PCR.

PCR (région amplifiée par PCR)

（1) prenez le tube de réaction PCR préparé pour la zone de traitement de l'échantillon, placez - le à l'emplacement approprié de la fente d'échantillon du PCR quantitatif à fluorescence en temps réel et Notez l'ordre de placement.

（2) appuyez sur le tableau pour définir les paramètres relatifs à l'amplification des acides nucléiques de l'instrument pour l'amplification PCR.

Note:Le PCR Fluorescent de la série ABI ne sélectionne pas la correction Rox lors du réglage, le Groupe de trempe de réglage sélectionne none.

[valeur de référence (plage de référence)]

1. Détermination de l'efficacité du kit:

（1) contrôle positif: il existe une courbe d'amplification type s typique ou une valeur CT ≤ 35.

（2) contrôle négatif: valeur CT > 38 ou pas de valeur CT, ligne droite ou légèrement oblique, pas de période de croissance exponentielle.

2. Détermination des résultats des spécimens:

（1) positif: spécimen testé avec une valeur CT ≤ 35 ou avec une période de croissance exponentielle significative.

（2) suspect: la valeur ct des échantillons testés est comprise entre 35 et 38. À ce stade, les échantillons doivent être testés à plusieurs reprises, si les résultats des expériences répétées CT valeurs sont encore dans la gamme 35 - 38, il y a une période de croissance exponentielle évidente, alors il est jugé positif, sinon négatif.

（3) négatif: les échantillons ont été testés avec une valeur CT > 38 ou sans valeur Ct.

[Limites de la méthode d'inspection]

Lorsque la concentration d'acide nucléique examinée dans l'échantillon de test est inférieure à la plus élevée de ce kitDi limite de détection Dhi un résultat faux négatif peut se produire.

Ce kit est destiné uniquement au dépistage initial des spécimens, pour ce kit, les résultats positifs doivent être confirmés par la méthode de culture.

[précautions]

Les laboratoires qui utilisent ce kit doivent être gérés en stricte conformité avec les spécifications de gestion des laboratoires de test d'amplification génétique publiées par les parties concernées du pays;

Pour éviterDégradation de l'ARN, le processus de traitement de l'échantillon doit fonctionner à 0 - 4 ℃, et immédiatement après l'achèvement de l'expérience pour la détection; Les consommables de l'appareil utilisés lors du traitement des échantillons doivent être traités sans ribozyme;

Les articles de chaque zone sont à usage exclusif et ne doivent pas être croisés pour éviter toute contamination; La table de travail doit être nettoyée immédiatement après la fin de la détection;

Lors de l'aspiration du liquide réactionnel, il convient d'éviter autant que possible la formation de bulles d'air; hautAvant l'appareil PCR, il faut prendre soin de vérifier que chaque tube de réaction est bien fermé, de sorte que l'évaporation du liquide ne provoque pas des résultats inexacts;

Kit tous les réactifs doivent être bien fondus et mélangés à la température normale avant utilisation et doivent être centrifugés instantanément;

Les témoins négatifs et positifs contenus dans le kit doivent tous être transférés dans la zone de préparation des spécimens et entreposés séparément avant la première utilisation;

Pour éviter les interférences fluorescentes, le contact direct avec les mains nues doit être évitéTubes de réaction PCR et éviter tout Marquage sur les tubes de réaction PCR;

Tête d'aspiration utilisée dans le processus de détection, doit être frappé directement à ShengL'acide hypochloreux à 10% dans le cylindre de déchets, le tube de réaction PCR à la fin de la détection, le couvercle ouvert et jeté après stérilisation avec d'autres articles abandonnés; Les bancs de travail et les diverses fournitures expérimentales doivent être régulièrement désinfectés avec de l'acide hypochloreux à 10%, de l'alcool à 75% ou des lampes UV;

9. Les paramètres relatifs à l'amplification de l'instrument doivent être réglés conformément aux exigences pertinentes de la présente description; Les réactifs de numéros de lot différents ne peuvent pas être mélangés; Et utiliser pendant la période de validité.