Gel de bromure d'hydrogénure d'agarose

Pour assurer la performance du produit et un fonctionnement sans tracas, veuillez lire attentivement ce manuel avant utilisation et consulter le support technique après - vente de notre société ou le personnel de vente local pour toute question (voir annexe).

1. Présentation du produit

Cnbr focurose 4ff est un milieu de purification à débit rapide contenant des groupes cyanates Après activation par le bromure de cyanogène, adapté au couplage de protéines, de Polypeptides, d'acides nucléiques et autres biomolécules contenant des groupes aminés. Vérifié à plusieurs reprises dans le processus de purification biomédicale, il a été largement utilisé.

Les caractéristiques sont les suivantes:

A. large application,Gel de bromure d'hydrogénure d'agarosePeut convenir pour le couplage de macromolécules biologiques contenant des groupes aminés.

B. couplage multipoint, simple, flexible, rapide, efficace et efficace pour maintenir l'activité biologique et la stabilité des biomolécules.

C. débit rapide, rendement élevé, facile à amplifier.

Tableau 1: paramètres de performance des médias

2. Conditions de couplage

A. nettoyage (liquide a)

Prendre la bonne quantité de colle décantée (environ 1,0 ml après 0,83 g de lavage terminé), remettre le milieu en suspension avec 5 fois le volume de liquide a et essorer la solution après 5 min. Répétez cette étape 5 fois.

Remarque: Cette étape est utilisée pour activer le milieu, afin de garantir que le volume de nettoyage du liquide a doit être suffisant, le temps de nettoyage est fixé à environ 0,5 H (le temps est trop long pour que le Groupe sur le milieu hydrolyse).

B. préparation des solutions de Ligands

Les biomolécules à coupler sont dissoutes avec du liquide B ou les biomolécules sont déplacées dans du liquide B (concentration de biomolécules de 1 à 10 mg / ML, recommandée à 5 mg / ML).

Remarque: Assurez - vous que le pH et la concentration en sel au moment du couplage sont conformes au liquide B.

C. couplage

Le milieu lavé et l'échantillon préparé sont mélangés en proportions égales (rapport volumique) et mélangés doucement à température ambiante pendant 3 à 4 h. après avoir déterminé le succès du couplage (l'efficacité du couplage est déterminée par la détermination de la teneur en biomolécules avant et après le couplage), la solution est essorée.

Remarque: le couplage est recommandé pour le couplage 3 - 4h à température ambiante. Pour les Ligands instables, il est recommandé de coupler 4 - 8 ℃ pendant une nuit.

D. (c liquide) Nettoyage

Le milieu couplé est remis en suspension avec 5 fois le volume de liquide C et la solution est à nouveau essorée. Répétez cette étape 3 fois de plus.

Remarque: Cette étape est utilisée pour nettoyer les biomolécules restantes dans le milieu, à laver *.

E. fermeture

La resuspendation est effectuée avec 5 fois le volume de liquide C et, après 3 - 4 heures d'agitation douce à température ambiante, la solution est essorée.

Remarque: Cette étape est utilisée pour fermer le Groupe au - dessus du milieu, un mélange doux à température ambiante pendant 3 à 4 heures est correct.

F. (liquide D et liquide e) Nettoyage

Le milieu fermé est remis en suspension avec 5 fois le volume de liquide D et la solution est essorée après 5 min; Le milieu est remis en suspension avec 5 fois le volume de e liquide et la solution est essorée après 5 min. Répétez cette étape 3 fois.

Remarque: Cette étape est utilisée pour nettoyer les biomolécules qui ne sont pas couplées assez étroitement.

G. préservation

Le milieu est essoré après resuspendation avec 5 fois le volume d'eau purifiée, essoré après resuspendation avec 5 fois le volume d'éthanol à 20% et enfin conservé par trempage dans de l'éthanol à 20%.

Remarque: Cette étape est utilisée pour conserver le support et éviter la croissance microbienne.

H. formulation de la solution

Liquide a: 0.001mhcl, 0.5M NaCl, pH ajusté 3.0, 4 - 8 ℃ conservation (le liquide a doit être pré - refroidi avant utilisation).

Liquide B: NaHCO 3 0,2 m, NaCl 0,5 m, pH ajusté 8,3 (si la molécule biologique à coupler est une IgG, pH=8.5-9.0）， Conservation à température ambiante.

C liquide: tris - HCl 0,1 m, pH ajusté 8,3, conservation à température ambiante.

D liquide: tris - HCl 0,05 M, NaCl 0,5 m, pH ajusté 8,5, conservation à température ambiante.

E liquide: ammoniaque Gan 0,05 M, 0,5 mnacl, pH ajusté 3,5, conservation à température ambiante.

F liquide: NaCl 1,0 m, conservé à température ambiante.

3. Nettoyage

Certaines substances fortement liantes (par exemple, certaines protéines fortement liées, protéines dénaturées, lipides, etc.) peuvent être éliminées après le lavage, ce qui permet d'obtenir d'excellentes propriétés du milieu de récupération (par exemple, charge, fluidité, effet de colonne, etc.).

Il est recommandé d'effectuer un nettoyage après chaque 5 Utilisations, la fréquence de nettoyage spécifique doit être ajustée en fonction de la propreté de l'échantillon initial purifié.

1) Nettoyage conventionnel

A. rincer avec 5 - 10 fois le volume de la colonne d'eau purifiée.

B. rincer avec 5 à 10 fois le volume de la colonne de liquide D.

C. rincer avec 5 - 10 fois le volume de la colonne E liquide.

D. rincer avec 5 à 10 fois le volume de la colonne de liquide f.

E. rincer avec 5 - 10 fois le volume de la colonne d'eau purifiée.

F. conserver après rinçage avec 5 à 10 fois le volume de la colonne à 20% d'éthanol.

2) Nettoyage Intense

A. immédiatement après le rinçage avec 2 - 5 fois le volume de la colonne 0,2% de détergent non ionique, rincer avec 5 - 10 fois le volume de la colonne d'eau purifiée.

B. après rinçage avec 2 à 5 fois le volume de la colonne de chlorhydrate de Guanidine 6m, rincer immédiatement avec 5 à 10 fois le volume de la colonne d'eau purifiée.

C. conserver après rinçage avec 5 à 10 fois le volume de la colonne à 20% d'éthanol.

Remarque: l'application de conditions de nettoyage intenses dépend principalement de la stabilité de la biomolécule couplée, avant d'utiliser cette condition de nettoyage, il est recommandé de faire une petite pré - expérience pour vérifier la stabilité de la biomolécule.

4. Cas d'application

Cas 1

Cas II

5. Questions fréquemment posées

Tableau 2: problèmes courants et solutions

6. Informations de commande

Tableau 3: formulaire d'information de commande

Remarque: les produits d'emballage de grande spécification ou d'autres achats de produits, veuillez consulter les ventes locales ou le support technique avant - vente de cette société.