Kits de détection ELISA pour protéine kinase activée par mitogène humain (MAPK) sujets spécifiques

I. kit de détection ELISA de protéine kinase activée par mitogène humain (MAPK) Spécifications paramètres

Nom chinois:Kit de détection ELISA pour protéine kinase activée par mitogène humain (MAPK)

Spécifications: 48T 96T

Genre: humain

Marque:Biologie de la famille

Longueur d'onde de détection: 450nm

Volume d'échantillon requis: assurance 50ul

Champ d'application: uniquement pour la recherche scientifique, ne doit pas être utilisé pour le diagnostic clinique, les échantillons cliniques pour le sujet sont acceptables.

Objectif du test: pour déterminer la teneur en protéine kinase activée par le mitogène (MAPK) dans des échantillons de sérum humain, de plasma et de liquides associés.

Types d'échantillons testés: sérum, plasma, urine, homogénat de tissu, surnageant cellulaire, liquide céphalo - rachidien, lavage, selles, etc.

Les espèces de la famille des fournisseurs sont: humain, rat, souris, cobaye, fils de l'homme, chien de cochon, vache et mouton, poulet et canard, plante, poisson, kit ELISA insecte, etc.

II. Composition du kit ELISA

Iii. Traitement des échantillons et exigences:

1. sérum: coagulation naturelle du sang à température ambiante pendant 10 - 20 minutes, centrifugation pendant environ 20 minutes (2000 - 3000 tr / min). Recueillir soigneusement sur

Nettoyage, si un précipité se produit pendant la conservation, il doit être centrifugé à nouveau.

2. Plasma sanguin: EDTA ou citrate de sodium doit être choisi comme anticoagulant selon les exigences du spécimen, après 10 - 20 minutes de mélange, centrifugation

20 Minutes environ (2000 - 3000 tr / min). Recueillir soigneusement le surnageant, s'il y a formation de précipitation pendant la conservation, devrait être à nouveau

Centrifugation.

3. Urine: recueillir avec un tube stérile et centrifuger pendant environ 20 minutes (2000 - 3000 tr / min). Recueillir soigneusement le processus de nettoyage, de conservation

Si un précipité se forme, il doit être centrifugé à nouveau. Ascite thoracique, liquide céphalo - rachidien pratique de référence.

4. Culture cellulaire supérieure: lors de la détection des composants sécrétoires, recueillir avec un tube stérile. Centrifuger pendant environ 20 minutes (2000 - 3000 Tours /

Points). Recueillir soigneusement. Lors de la détection des composants intracellulaires, diluer la suspension cellulaire avec du PBS (pH7.2 - 7.4), cellules

La concentration atteint environ 1 million / ML. Par congélation et dégel répétés pour permettre aux cellules de détruire et de libérer les composants intracellulaires. Centrifugation 20 points

Autour de la cloche (2000 - 3000 tr / min). Recueillir soigneusement. S'il y a formation de précipité pendant la conservation, il faut centrifuger à nouveau.

5. Spécimens d'organisation: après avoir coupé le spécimen, peser. Ajouter une certaine quantité de PBS, ph7.4. Préparation par congélation rapide à l'azote liquide

Avec. Les spécimens restent à une température de 2 à 8 °C après la fonte. Ajouter une certaine quantité de PBS (ph7.4) à la main ou avec un homogénateur

Bien homogénéiser le spécimen. Centrifuger pendant environ 20 minutes (2000 - 3000 tr / min). Recueillir soigneusement. Une portion à rester après le fractionnement

Détection, le reste congelé en réserve.

6. L'extraction est effectuée le plus tôt possible après la collecte des spécimens, l'extraction est effectuée conformément à la littérature pertinente et l'expérience doit être effectuée le plus tôt possible après l'extraction. Si pas immédiatement

Pour effectuer des essais, les spécimens peuvent être conservés à - 20 ° C, mais il faut éviter la congélation et la dégel répétées.

7. Les échantillons contenant nan3 ne peuvent pas être détectés car nan3 inhibe l'activité (HRP) de la peroxydase de raifort.

Iv. Précautions:

1. Le kit doit être retiré de l'environnement réfrigéré et peut être utilisé après 15 - 30 minutes d'équilibre de la température ambiante, le paquet d'étiquette d'enzyme est ouvert par la plaque si elle n'est pas

Utilisé, les lattes doivent être emballées dans un sac scellé pour la conservation.

2Le liquide de lavage concentré peut avoir un dégagement cristallin, dilué peut être chauffé dans un bain - Marie pour aider à la dissolution, le lavage n'affecte pas le résultat.

3. l'éprouvette doit être utilisée à chaque étape et sa précision doit être fréquemment corrigée pour éviter les erreurs d'essai. Un temps supplémentaire zui bien

Contrôle dans les 5 minutes, si le nombre de spécimens est élevé, il est recommandé d'utiliser un pistolet d'exhaustion.

4.s'il vous plaît faire la courbe standard en même temps que chaque détermination, zui bon pour faire des pores. Si la teneur en substance à mesurer est trop élevée dans l'échantillon (valeur od de l'échantillon)

Plus grande que la valeur od du premier trou du trou standard), veuillez d'abord diluer un certain multiple (n fois) avec la dilution de l'échantillon avant de déterminer, compteur

Multipliez zui par le multiple de dilution total (× n × 5).

5. Le film de scellement est limité à un usage unique pour éviter la contamination croisée.

6. substrat Veuillez conserver à l'abri de la lumière.

7Strictement selon les instructions, la décision de résultat d'essai doit être la lecture de l'étalon enzymatique.

8Tous les échantillons, les liquides de lavage et les déchets de toutes sortes doivent être éliminés en tant que matières infectieuses.

9. Les composants des différents numéros de lot de ce réactif ne doivent pas être mélangés.

10. En cas de différence avec les instructions en anglais, les instructions en anglais prévaudront.

Cinq,ELISAKit de calcul

En abscisse pour la concentration en étalon et en ordonnée pour la valeur OD,

Dessiner la courbe standard sur le papier de coordonnées, selon od de l'échantillon

La valeur est déterminée par la courbe standard pour la concentration correspondante; Multiplier par la dilution

Multiples; Ou calculer l'étalon avec la concentration de l'étalon et la valeur OD

équation de régression linéaire de la quasi - courbe qui place la valeur od de l'échantillon

équation de substitution, calcule la concentration de l'échantillon, multiplie par la dilution

Multiple, c'est - à - dire la concentration réelle de l'échantillon.

Performance du kit ELISA

1.Les valeurs du coefficient de corrélation de régression linéaire de l'échantillon avec la concentration attendue, R, sont supérieures à 0990.

2.Les lots et les lots doivent être inférieurs à 9% et 11%, respectivement

3.Conditions de conservation et date d'expiration: 2 - 8 ℃ réfrigéré, durée de conservation du kit 6 mois.

Vii. Rappels spéciaux

Étant donné que les conditions actuelles et le niveau scientifique et technique ne permettent pas de procéder à une identification et à une analyse complètes de toutes les matières premières fournies par tous les fournisseurs, ce produit peut présenter certains risques techniques liés à la qualité.

1. Les résultats expérimentaux de zui - end sont étroitement liés à l'efficacité du réactif, aux opérations pertinentes de l'expérimentateur et à l'environnement expérimental de l'époque, assurez - vous de préparer une sauvegarde adéquate des spécimens.
2. Différents lots du même produit peuvent varier légèrement, tels que: la limite de détection, la sensibilité et le temps de rendu des couleurs, etc., s'il vous plaît suivez les instructions dans le kit pour l'opération expérimentale, les instructions électroniques ne sont utilisées que comme référence.
3. Seule l'utilisation de tous les kits de kit compagnon garantit l'effet de détection et ne peut pas être mélangé avec des produits d'autres fabricants. Seul le strict respect des instructions expérimentales de ce kit donnera un résultat de détection de *.
4. La société n'est responsable que du kit lui - même et n'est pas responsable de la consommation d'échantillons résultant de l'utilisation de ce kit, l'utilisateur est invité à réserver des échantillons suffisants avant utilisation, en tenant pleinement compte de la quantité d'utilisation possible de l'échantillon.
5. Les homogénats de tissus ou les extraits cellulaires préparés à l'aide de lysats chimiques peuvent fausser les résultats des expériences ELISA en raison de l'introduction de certaines substances chimiques.
6. Si l'échantillon est clair pour la culture cellulaire, il peut y avoir des situations indétectables en raison de plus de facteurs perturbateurs tels que: l'état des cellules, le nombre de cellules, le temps d'échantillonnage, etc.
7. Certaines protéines naturelles ou recombinantes, y compris les protéines recombinantes procaryotes et eucaryotes, peuvent ne pas être détectées car elles ne correspondent pas aux anticorps de détection et de capture utilisés pour ce produit.