Tdccs - 3D microgravité 3D système de culture cellulaire rotatif

Pékin kotcheng XingTdccs - 3D microgravité 3D système de culture cellulaire rotatifLe noyau est à travers le récipient rotatif à faible vitesse, permettant aux cellules d'être en chute libre continue, faible force de cisaillement en suspension, simulant la microgravité spatiale (10⁻³ ~ 10⁻³g), permettant ainsi une haute Simulation 3D (3d) Cellules / organoïdes culture. C'est actuellement la réduction du microenvironnement in vivoapprocherUne des techniques in vitro.

Principes fondamentaux (NASA rwv / rccs Classic Mechanism)) et

Rempli de liquide, sans bulles: le récipient de culture (cylindre / disque) est rempli à 100% de milieu de culture, excluant toutes les bulles et évitant les interfaces gaz - liquide et les turbulences.

Rotation synchrone de l'axe horizontal: le récipient tourne lentement autour de l'axe horizontal (5 ~ 20 tr / min), le liquide est en mouvement synchrone avec le récipient.

Le vecteur gravitationnel est en moyenne nul: la rotation change constamment de direction gravitationnelle, la gravité moyenne en temps cellulaire ≈ 0 est en chute libre constante.

Suspension à faible force de cisaillement: le fluide est laminaire, la force de cisaillement est extrêmement faible (≈ 0,01 Pa), les cellules ne collent pas, ne se heurtent pas à la surface de la paroi et s’agrègent naturellement pour former des sphères / organoïdes 3D.

Avantage technologique de base (contraste 2D vs statique 3D)

Structure 3D

Formation de globules / organoïdes tumoraux homogènes, apportant leur propre prolifération externe, repos intermédiaire, stratification nécrotique hypoxique centrale, hautement réducteur de l'architecture tumorale / tissulaire in vivo.

Rétention de la sécheresse et de l'hétérogénéité

Entretien * * Cellules souches tumorales (GSC / cancer stem cell) * * phénotypes (cd133⁺, nestin⁺)

Préserver l'hétérogénéité des gènes / sous - populations cellulaires de la tumeur du patient et éviter le dépistage Clonal 2D

Protection à faible force de cisaillement

Protection des connexions cellulaires, ECM de la matrice externe, Cytosquelette

Réduction des dommages mécaniques, culture stable à long terme (plusieurs semaines)

Haute simulation du micro - environnement

Gradient naturel d'hypoxie (activation HIF - 1α)Soutenir les cellules immunitaires, co - culture de fibroblastes, reconstruire le microenvironnement immunosuppresseur tumoralDépistage des médicaments plus approprié

Résistance au témozolomide, Cisplatine, etc. hautement compatible in vivo

Les faux positifs sont beaucoup plus bas que la 2D, mieux adaptés à la médecine de précision individualisée

Paramètres de culture clés (glioblastome GBM couramment utilisé)

Vitesse de rotation: 10 ~ 15 rpm (la suspension cellulaire n'est pas collée)

Densité d'inoculation: 1 × 10⁵ ~ 5 × 10⁵ cellules / ml

Milieu: dmem / F12 + b27 + EGF + bFGF (cellules souches) ou 10% FBS conventionnel

Matrice: peut ajouter une faible concentration de matrigel (2 ~ 5%) pour promouvoir la stabilité de la sphère

Changement de liquide: changement de liquide tous les 2 ~ 3 jours en demi - quantité pour éviter de perturber la sphère

Cycle: 7 ~ 14 jours pour former des globules tumoraux GBM matures

Tdccs - 3D microgravité 3D système de culture cellulaire rotatifC'est l'étalon - or de la microgravité spatiale simulée au sol, de la construction de tumeurs / organoïdes 3D hautement simulés, en particulier irremplaçables dans le maintien des cellules souches du glioblastome, les mécanismes de résistance et le dépistage de précision des médicaments.