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323, route de Rongcheng est, district de Fengxian, Shanghai
Shanghai pure biotechnologie Co., Ltd
323, route de Rongcheng est, district de Fengxian, Shanghai
Kit de détection du contenu en cholestérol total (TC)
Introduction au produit:
Cholestérol total (Cholestérol total,TC), la somme du cholestérol contenu dans toutes les lipoprotéines, y compris le cholestérol libre et les esters de cholestérol.
Utilisation d'estérases pour catalyser l'hydrolyse des esters de cholestérol pour produire du cholestérol libre(FC), et les acides gras libres (FFA) etTransformant ainsi les esters de cholestérolpour FC; utilisation ultérieure de la catalyse par la cholestérol oxydase FCOxydation, génération△4 -Cholestérone et H2O2; enfin catalysée par peroxydaseH2O2 Oxydation 4 -Aminoantipyrine et Phénols, produisant des composés quinoniques rouges qui sont 500 nmPics d'absorption caractéristiques, dont la couleur est profonde avecTCLe contenu est proportionnel.
Spectrophotomètre visible/étalonneur enzymatique, balance, centrifugeuse de table à basse température, microverre/ 96Plaque de perçage, pistolet à pipette réglable,
EPTubes, eau distillée, alcool isopropylique.
Extrait: alcool isopropylique 100mL × 1Bouteille, Self - made,4℃保存;Liquide de travail: liquide 30mL × 1Les bouteilles,4℃保存;
Standard: poudre×1Branches,10 mg Le cholestérol,4℃ conservation. Adhérer avant utilisation517μLLe liquide d'extraction, dissous par oscillation, c'est - à - dire50μmol/mLLa solution standard de cholestérol.
I. traitement des échantillons:
1. Organisation: selon la qualité de l'Organisation(g) et: volume de liquide extrait(mL)pour 1Pour:5 à 10 La proportion de(Recommander de prendre rendez - vous 0.1 gramme Organisation, adhérer 1 ml
Extrait liquide) pour réaliser un homogénat de bain de glace.10000g,4℃ centrifugation10 minutesPrendre la glace de dégagement à mesurer.
2. Bactéries, champignons: par nombre de cellules(104 un) et: volume de liquide extrait(mL) etpour 500~1000Pour:1 Proportion (conseil 500 dix milleAjout de cellules 1 ml Liquide d'extraction) et, bain de glace ultrasons briser les cellules (puissance 300w, ultrasons 2 Secondes, intervalles 3 Secondes, temps total 3min) et;Puis 10000g,4℃ centrifugation10 minutesPrendre sur la glace à mesurer.
3. Sérum (plasma)Échantillon: détermination directe.II. Étapes de détermination:
1、 Spectrophotomètre/Préchauffage de l'étalon enzymatique 30 minutesCi - dessus, réglez la longueur d'onde à 500 nmL'eau distillée est mise à zéro.
2、 Sera 50 μmol/mLLe liquide standard est dilué avec un extrait 2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625Et,0,078μmol/mLSolution standard de rechange.
3、 Tableau des opérations:(Dans le tube de centrifugation ou 96 Dans la plaque de puits sont ajoutés successivement les réactifs suivants:) et
Tube de détermination |
Tubes Standard |
Tube vide |
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échantillons (µL) et |
20 |
- |
- |
Solution standard (μL) et |
- |
20 |
- |
Liquide d'extraction (μL) et |
- |
- |
20 |
Fluide de travail (µL) et |
180 |
180 |
180 |
Bien mélangé,37℃ laisser reposer15 minutes, déterminé après la fin de la réaction 500 nm Valeur d'absorption de lumière en place A, notés respectivement comme ADétermination du tube,A Tubes Standard et A Tube vide,△A = A Tube de détermination- A Tube vide,△A norme= un Tubes Standard- A Tube vide, Le tube vide ne doit être testé qu'une seule fois. | |||
Calcul de la teneur totale en cholestérol
I. dessin de la courbe Standard:
La concentration de chaque solution standard est xL'axe, qui correspond à△ALe standard est yAxe, dessine la courbe standard, obtient l'équation standard et = kx + b, Sera△AEntrer dans l'équation obtient x(μmol/mL) et
II. Calcul de la teneur totale en cholestérol:
1. Sérum (plasma)centre FC Calcul du contenu: TC Contenu (μmol/dL) et= x × 100- Oui.
2. Dans l'Organisation FC Calcul du contenu:
1. Calculé par concentration protéique de l'échantillon
TCContenu (μmol/mg prot) et= x × VExtraction÷(Cpr × VExtrait)= x ÷ Cpr- Oui.
2. Calculé par poids frais de l'échantillon
TCContenu (μmol/gPoids frais)= x × VExtraction÷W = x÷W
3. Dans les cellules, les bactéries TC Calcul du contenu:
TCContenu(μmol/10)4 cellule) = x × VExtraction÷500=0,002x- Oui.
100Pour:1dL = 100mL;VExtraction: volume de liquide d'extraction ajouté à l'échantillon,1 ml;W: qualité de l'échantillon,g;500: 500Nombre de dix mille cellules.
quand△ASupérieure à 1.5 Lorsqu'il est recommandé de diluer l'échantillon avec le liquide d'extraction avant de procéder au dosage.
Shanghai Language pure Biotechnology Co., Ltd., est une entreprise technologique co - fondée par des personnes ayant * une formation en sciences de la vie et en biotechnologie. La société se concentre sur les cellules primaires, les cellules tumorales et les produits réactifs liés à la culture cellulaire, fournissant un soutien technique et des services connexes aux universités, aux aliments, aux médicaments et à la recherche biologique.
Depuis sa création, grâce à une innovation scientifique et technologique continue, à la recherche et au développement de produits, la société a fourni aux clients des produits cellulaires personnalisés ainsi que des solutions complètes de culture cellulaire, en explorant activement, en développant, en approfondissant et en enrichissant les produits, actuellement plus de 200 types de produits de milieu de culture de base, plus de 300 types de lignées cellulaires et près de 600 types de cellules primaires. Nous avons toujours été motivés par « le développement de la science et de la technologie, le soin de la vie et de la santé du public», par l'innovation technologique, l'absorption généralisée des talents de haute technologie, le système de produits continu *, l'enrichissement de la chaîne de produits, l'expansion active du marché, L'expansion des domaines d'application, et la création d'une marque concurrentielle sur le marché.
Précautions
1, pour votre sécurité et votre santé, Veuillez porter des vêtements de laboratoire et porter des gants jetables et des masques;
2, pour maintenir l'excellent effet d'utilisation de ce produit, assurez - vous de le conserver conformément aux conditions de stockage recommandées;
3, ce produit est destiné à la recherche scientifique ou à une utilisation ultérieure de la production et ne peut pas être utilisé pour le diagnostic clinique ou le traitement.
Kit de détection du contenu en cholestérol total (TC)
