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Ruixin Intelligent Manufacturing (Shenzhen) Technology Co., Ltd
Nanocoulter évalue cinq méthodes de séparation des vésicules extracellulaires: un grand rapport efficacité / pureté
Date :2024-10-21Lire :0
Qu'est - ce qu'une vésicule extracellulaire
Ev se réfère à des vésicules nanométriques libérées des cellules et largement présentes dans les fluides corporels tels que le sang, l'urine, la salive, etc. Ces vésicules sont riches en protéines fonctionnelles, petites molécules, acides nucléiques et autres métabolites. Les ve sont présents dans presque tous les types de cellules et de fluides corporels, y compris le plasma, l'urine, la salive et le lait maternel. Le type et la quantité de protéines, de lipides et de miarn portés par les EV peuvent refléter directement le type d'origine. La recherche sur les ve contribue à une meilleure compréhension de la physiologie et de la pathologie cellulaires, et cliniquement, les ve présentent non seulement un potentiel énorme pour le diagnostic des maladies, mais peuvent également devenir de nouveaux outils pour la délivrance de médicaments. Par conséquent, les méthodes de séparation et de caractérisation des ve de haute pureté qui répondent à des besoins expérimentaux spécifiques deviennent particulièrement importantes.
Comparaison complète des cinq méthodes de séparation
Dans cette étude, les chercheurs ont évalué en détail cinq techniques de séparation EV communes, notamment:
1.Méthode traditionnelle d'ultracentrifugation différentielle (UC): les vitesses de rotation supérieures à 30 000 tr / min sont appelées ultracentrifugation. L'utilisation de méthodes pour augmenter progressivement la vitesse de centrifugation sur la base de l'ultracentrifugation pour séparer des échantillons de différentes tailles peut efficacement isoler EV de haute pureté, souvent considéré comme « l'étalon - or» pour l'extraction de nanoparticules.
Résultats TEM pour cinq méthodes de séparation
Technologie RPS
La technologie d'induction d'impulsion résistive (RPS) est une technologie émergente de caractérisation de nanoparticules et est actuellement basée sur l'électricitéCaractérisation des particulesLa méthode. La taille et la concentration des vésicules extracellulaires et le potentiel Zêta ont été évalués en mesurant les variations de courant à travers de minuscules nanopores. Cette méthode présente l'avantage d'être précise, rapide, facile et très sensible, ce qui en fait un outil idéal pour évaluer la qualité des méthodes de séparation des vésicules.
Comparaison des données granulométriques pour cinq méthodes de séparation
Comparaison des données de concentration pour cinq méthodes de séparation
Comparaison des données potentiométriques Zêta pour cinq méthodes de séparation
SéparationLe secret derrière: la bataille entre l'efficacité et la pureté
Grâce à la technologie RPS, les chercheurs ont analysé en détail la distribution granulométrique, la concentration et la pureté des particules de chaque méthode de séparation. Les résultats montrent que, bien que des concentrations plus élevées de particules puissent être obtenues en utilisant l'Ultrafiltration, la chromatographie sur colonne qev et la méthode exoquick, les méthodes conventionnelles d'ultracentrifugation différentielle donnent les meilleurs résultats en termes de pureté.
Distribution de la taille des particules: UC, uf, exoeasy, qev la taille des particules EV isolées était plus cohérente, environ 71 nm, tandis qu'exoquick a isolé des particules EV légèrement plus grandes, en moyenne 77 nm.
Concentration de particules: la méthode d'ultrafiltration (UC) montre la concentration de particules la plus élevée, atteignant 2,10 × 1012/mL， Alors que la concentration en particules de la méthode UC est relativement faible, 7,33 × 1010par ml.
Pureté: la méthode UC a la pureté EV la plus élevée, avec un nombre de particules contenues par milligramme de protéine atteignant 7,88 × 1011- Oui.
Comparaison des données de pureté EV pour cinq méthodes de séparation
Comment choisir la bonne méthode de séparation?
Chaque méthode de séparation a saAvantages. Selon les résultats de l'étude, la méthode d'ultracentrifugation, bien que complexe et longue, reste la première option lorsque l'expérience nécessite des EV plus purs; Cependant, pour les scénarios d'application qui recherchent un rendement élevé et une production de masse, l'ultrafiltration et la chromatographie sur colonne qev offrent des vitesses de séparation plus rapides et des concentrations de particules plus élevées.
Schéma du principe de fonctionnement de la plateforme d'analyse de particules nanocoulter
Comprendre les avantages et les inconvénients des différentes méthodes d'isolement aidera les chercheurs à mieux mener des recherches expérimentales et à développer des applications liées aux vésicules extracellulaires. Cet article fournit une évaluation complète de cinq méthodes d'isolement de vésicules extracellulaires par la technologie RPS, basée sur les propriétés de précision de nanocoulter, fournissant aux chercheurs une base scientifique pour choisir la technique d'isolement appropriée.
Le choix d'une méthode de séparation appropriée doit tenir compte des exigences spécifiques des besoins expérimentaux, y compris l'efficacité, la pureté de la séparation et la commodité de l'opération. Choisir une méthode appropriée de caractérisation des particules et vice versa,La caractérisation de nanocoulter pour EV dans l'étude ci - dessus a démontré les avantages suivants:
Avantage 1: détection de particules uniques, précision sans interférence
Nanocoulter permet une capture et une analyse précises de chaque Nanoparticule grâce à sa technologie avancée de RPS à l'échelle nanométrique.Imaginez que dans un fluide biologique complexe, chaque minuscule EV qui passe par un nanopore ne puisse échapper à son « Examen physique complet».Rompt avec le phénomène de grandes particules dans les méthodes optiques traditionnelles qui masquent les petites particules, ce qui entraîne une distorsion des résultats.Surtout pour ce type de polydispersité EVLes échantillons de fluide biologique, qu'il s'agisse de la taille, de la concentration ou du potentiel Zêta, chaque donnée est dérivée d'une mesure directe d'une particule individuelle, garantissant des résultats réels et fiables.Cette précision pourrait faire passer la recherche sur les vésicules cellulaires à un niveau supérieur!
Avantage 2: haute précision, analyse multiparamétrique
Nanocoulter permet une analyse complète de la taille des particules, de la distribution de la taille des particules, de la concentration des particules et du potentiel Zêta des EV.L'analyse précise de la distribution granulométrique nous aide à comprendre la distribution de taille réelle d'un échantillon d'ev, la concentration de particules reflétant l'abondance et la qualité de séparation des ev, tandis que le potentiel Zêta est étroitement lié à la stabilité des ev et au ciblage de la livraison des EV conçus.Ces données nous fournissent des informations complètes sur les ve, fournissant un support de données solide pour la recherche en sciences nanopharmaceutiques et les applications cliniques.
Avantage 3: adaptation aux échantillons complexes
Contrairement à la méthode optique traditionnelle qui consiste à effectuer une analyse globale des particules dans un échantillon, nanocoulter excelle dans les échantillons complexes polydispersés.Il est capable de caractériser avec précision les nanoparticules dans des liquides à faible indice de réfraction, à forte concentration ionique ou à faible fluidité, garantissant des résultats fiables même dans des fluides biologiques complexes, spécialisés dans la recherche dans le domaine biomédical.
Avantage 4: processus d'exploitation rapide et facile
Le processus d'exploitation de nanocoulter est simple et rapide, éliminant le besoin de pré - traitement complexe d'échantillon, ainsi que les étapes de moteur thermique et d'étalonnage de l'équipement.Chaque puce nanoporeuse est strictement étiquetée et validée au moment de la production, ce qui élimine la nécessité de consommer des produits standard du côté de l'utilisateur.Cela permet aux chercheurs d'obtenir des résultats plus rapidement et d'accélérer le rythme des découvertes scientifiques.
Avantage 5: large application
Le domaine d'application de nanocoulter va bien au - delà de la recherche sur les ve.Il a montré un potentiel et une valeur énormes dans de nombreux domaines tels que la biomédecine, la science des matériaux, la surveillance de l'environnement, etc.Avec sa haute précision, sa grande stabilité et son large éventail d'applications, nanocoulter devient progressivement le bras droit dont les chercheurs scientifiques ont besoin.