Le Spectrophotomètre UV - visible permet une analyse quantitative et qualitative en mesurant les propriétés d'absorption d'une substance dans la bande UV - visible (190 - 900 nm). Son mode de mesure principal et le scénario correspondant sont les suivants:
Mode de rapport de transmission (transmittance, t%)
Principe: mesure de la proportion de transmission de l'échantillon à la lumière incidente, la formule est
T% = i0i x 100%, où I est l'intensité lumineuse transmise et I0 l'intensité lumineuse incidente.
Scénarios applicables:
Détermination de la concentration en solution: Calculez rapidement la concentration en soluté dans une solution, par exemple pour la détection d'ions de métaux lourds (par exemple, plomb, Cadmium) dans la surveillance de l'environnement, en traçant des courbes standard (par exemple, la loi de Bill - Lambert).
Analyse de l'épaisseur et de l'uniformité des films minces: mesure de la transmittance des films optiques (filtres, revêtements, etc.) et évalue leur épaisseur et leur uniformité de surface.
Étude de la transmission de la lumière des matériaux: analyse des propriétés de transmission de la lumière des matériaux tels que le verre, le plastique et autres, optimisation de la conception des dispositifs optiques.
Mode Absorbance (Absorbance, a)
Principe: l'Absorbance est en relation logarithmique négative avec le rapport de transmission (A = - log10t), reflétant directement la capacité d'absorption de la lumière de l'échantillon.
Scénarios applicables:
Analyse quantitative: sur la base de la loi de Bill - Lamber (A = εbc), détermination quantitative de la concentration d'acides nucléiques, de protéines, d'ingrédients médicinaux, etc. dans une solution, telle que la détection de la pureté de l'ADN (rapport a260 / A280).
Étude de la cinétique des réactions chimiques: analyse des paramètres cinétiques tels que la constante de vitesse de réaction, la constante d'équilibre, etc., en surveillant les variations d'Absorbance en temps réel.
Détection de la qualité de l'eau: détermination de la concentration de nitrates, nitrites et autres contaminants dans l'eau, conformément aux normes environnementales (par exemple gb5749 - 2022).
Mode de balayage spectral (spectralscan)
Principe: balayage continu du spectre d'absorption de l'échantillon dans la bande UV - visible pour obtenir la position et l'intensité du pic d'absorption caractéristique.
Scénarios applicables:
Identification qualitative de la substance: identification de structures de composés inconnues, p. ex. intermédiaires pharmaceutiques, analyse de colorants organiques, en alignant les banques spectrales standard (p. ex. base de données NIST).
Évaluation de la pureté: détecter les pics d'absorption d'impuretés dans un échantillon et évaluer le degré de pureté d'un agent chimique ou d'un produit pharmaceutique.
Étude de la composition des complexes: analyse de la structure des complexes formés par les ions métalliques avec des Ligands, tels que les pics d'absorption caractéristiques (510 nm) des complexes fer - O - diazophène.
Mode dynamique (kineticmode)
Principe: surveillance continue de l'Absorbance à longueur d'onde fixe au fil du temps, calcul de la vitesse de réaction.
Scénarios applicables:
Détermination de l'activité enzymatique: les unités d'activité enzymatique (p. ex., U / ML) sont calculées en surveillant les variations d'Absorbance du produit ou du substrat dans une réaction catalysée par une enzyme.
Étude des réactions photocatalytiques: analyse de l'efficacité des photocatalyseurs dans la dégradation des polluants organiques sous la lumière et optimisation des conditions de réaction.
Études de libération de médicaments: simule l'environnement in vivo et surveille le taux de libération de médicaments à partir de vecteurs (p. ex., nanoparticules, Hydrogels).
Mode Multi - longueur d'onde (Multi - wavelength)
Principe: mesure simultanée de l'Absorbance à plusieurs longueurs d'onde spécifiques pour améliorer l'efficacité de l'analyse.
Scénarios applicables:
Analyse de mélanges multicomposants: la quantification simultanée est réalisée en sélectionnant les longueurs d'onde d'absorption caractéristiques des composants (par exemple, détermination de la concentration en hémoglobine par la méthode à deux longueurs d'onde).
Études de systèmes complexes: analyse de la synergie de plusieurs composants dans des échantillons biologiques tels que le sang, l'urine, etc., par exemple, la détection combinée d'indicateurs de la fonction hépatique (bilirubine totale, bilirubine directe).
résumé
Les modes de mesure du Spectrophotomètre UV - visible couvrent un large éventail de besoins allant de la simple détermination de la concentration à des études cinétiques complexes. Le rapport de transmission au mode d'Absorbance est adapté à l'analyse quantitative conventionnelle; Mode de balayage Spectral pour identification qualitative; Le mode cinétique focalise le processus réactionnel; Le mode multi - longueur d'onde améliore l'efficacité de l'analyse Multi - composants. Le choix du mode approprié en fonction des objectifs de l'expérience améliore considérablement la précision analytique et la fiabilité des données.