Cassette d'essai hydroxylamine réductase du sol (HR)

Détails des marchandises:
Hydroxylamine réductase du sol(HR) boîte d'essaiDétermination de la signification

L'hydroxylamine réductase du sol peut réduire l'hydroxylamine, un produit intermédiaire formé au cours du métabolisme de l'azote dans le sol, en ammoniac, le composé à l'état réduit dans le sol peut servir de donneur d'hydrogène, sa force et sa faiblesse affectent la perte d'azote par volatilisation de l'ammoniac au cours du métabolisme de l'azote du sol, affectant indirectement l'efficacité de l'utilisation des engrais azotés.

Principe de détermination

Du sulfate de fer et d'ammoniumFe3 + peut oxyder l'hydroxylamine en azote, elle - même réduite en Fe2 +, Fe2 + forme un complexe rouge orangé avec O - féroline dans des conditions faiblement acides, avec un pic d'absorption à 510 nm, l'hydroxylamine réductase agit sur l'hydroxylamine, ce qui réduit la quantité de complexe formé, et la diminution de L'absorption lumineuse à 510 nm peut refléter l'activité de l'hydroxylamine réductase.

Fournitures et instruments expérimentaux personnels

Balance, centrifugeuse à température normale, spectrophotomètre visible/ étalon enzymatique, microcuvette de quartz / plaque de 96 puits, oscillomètre, souffleur d'azote.
Composition et formulation des réactifs:

Réactif 1: liquide× 1 bouteille, conservée à 4°C.

Réactif II: liquide× 1 bouteille, conservée à 4°C.

Réactif III: poudre× 1 flacon (Brun) conservé à 4°C à l'abri de la lumière. Ajouter 667 μl d'éthanol anhydre avant utilisation, bien mélanger après le couvercle serré, puis ajouter 9333 ml d'eau distillée pour mélanger et conserver à l'abri de la lumière.

Réactif IV: poudre× 1 tube, 4 ℃ protégé de la lumière. Ajouter 1 mL d'eau distillée avant utilisation et bien dissoudre.

Standard: poudre× 1 bouteille, ajouter 10 ml d’eau distillée avant utilisation, bien dissoudre. 1 μmol / ml de solution standard, conservée à 4 ° C à l'abri de la lumière.
Propriétés de la marchandise:

Opération de détermination:

1. Le spectrophotomètre / étalon enzymatique est préchauffé pendant 30 minutes, ajuste la longueur d'onde à 570 nm, l'eau distillée est mise à zéro.

2. Tube vide: Prenez le tube EP, ajoutez 10 μl d'eau distillée, 100 μl de réactif deux, 100 μl de réactif trois et 10 μl de réactif quatre, mélangez le bouchon arrière pour fermer le bouchon de la bouteille (pour éviter la dispersion de l'eau), placez - le dans un bain d'eau bouillante pour garder au chaud pendant 15 minutes, après refroidissement, inversez à plusieurs reprises le tube EP plusieurs fois, la valeur d'absorption de la lumière est déterminée à 570 nm, Notez comme un tube blanc vide. Toujours mesurer dans les 30 minutes après le rendu des couleurs.

3. Tube Standard: Prenez le tube EP, ajoutez 10 μl de standard, 100 μl de réactif deux, 100 μl de réactif trois et 10 μl de réactif quatre, mélangez le bouchon arrière pour fermer le bouchon du flacon (pour éviter la dispersion de l'eau), placez - le dans un bain d'eau bouillante pour maintenir la chaleur pendant 15 minutes, après refroidissement, inversez à plusieurs reprises le tube EP plusieurs fois, la valeur d'absorption de la lumière est déterminée à 570 nm, Notez que le tube standard a. Toujours mesurer dans les 30 minutes après le rendu des couleurs.

4. Tube de dosage: Prenez le tube EP, ajoutez 10 μl de surnageant, 100 μl de réactif deux, 100 μl de réactif trois et 10 μl de réactif quatre, mélangez le bouchon arrière pour fermer le bouchon du flacon (pour éviter la dispersion de l'eau), placez - le dans un bain d'eau bouillante Pour garder au chaud pendant 15 minutes, après refroidissement, inversez le tube EP plusieurs fois, la valeur d'absorption de la lumière est déterminée à 570 nm, Notez comme un tube de dosage a. Toujours mesurer dans les 30 minutes après le rendu des couleurs.

Remarque: les tubes vierges et les tubes standard ne doivent être déterminés qu'une seule fois.

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