Milieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateuses(HuMSC sans sérum moyen) et

Description du produit

Milieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateusesEst un produit de culture de cellules souches mésenchymateuses de cordon ombilical humain sans sérum, sans ingrédients d'origine animale, les principaux ingrédients sont: acides aminés, vitamines, sels inorganiques, albumine, transferrine, insuline, oligo - éléments, Cytokines, etc.

Ce produit peut être utilisé pour la culture primaire et les passages multiples de cellules souches mésenchymateuses, tout en conservant leur potentiel de différenciation multidirectionnelle, comme leur capacité à se différencier en ostéocytes, Chondrocytes et Adipocytes, sans ajout de sérum ou de substituts de sérum.

Informations de commande

Composants du produit

Transport et conservation

ComposantsATransport de glace bleue,4℃ conservation; ComposantsBTransport de glace sèche,-20℃ ci - dessous pour la conservation. Période de validité12 Mois.

Méthode d'utilisation

1.Formulation du milieu de culture

取500 mlComposantsA, adhérer25 mètresL ComposantsBLe mélange homogène estMilieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateuses- Oui.Note:Si nécessaire, l'utilisateur peut formuler la quantité désirée proportionnellement.

2. Isolement et culture de cellules souches mésenchymateuses primaires (pourT75Bouteille de culture par exemple)

(1) Retirer le cordon ombilical, stériliser la surface extérieure du cordon ombilical et laver pour enlever les taches de sang, couper à environ2 cm à 4 cmLe petitBloc, enlever les veines artérielles, faire une longueur de côté5 mm~ 10 mmPetits morceaux, placésT75Bien disposé dans la bouteille de milieu de culture,Chaque bouteille est étalée15~20Le bloc.Note:Besoin de distinguer le côté peau externe du cordon ombilical et le côté gomme Huatong, garantieLe côté de la colle Huatong est appliqué au fond du flacon de culture.

(2) Retourner le flacon de culture, placerCO2Dans l'incubateur,37℃Laisser reposer60 minutes- Oui.

(3) Retirer le flacon de culture, ajouter lentement au flacon de culture15 mlMilieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateuses, mettre en 37℃ Et,5 % de CO2 Cultiver en incubateur.

(4) 第 7Jours, chaqueT75Bouteille de culture plus fraisMilieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateuses5 ml- Oui.

(5) Après la réhydratation, chaque3Demi - échange quotidien, aspiration10 mètresL Laisser tomber le milieu, ajouter10 mètresLFraîchedeMilieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateuses- Oui.

(6) 第13Le jour commence, observez les blocs d'organisation tels que les blocs d'organisationFusion cellulaire environnante atteint90%, disponibleObtenir des cellules, sinon continuer chaque3Jours pour effectuer un demi - échange de liquide à la fusion cellulaire autour du bloc de tissu atteint90%- Oui.

3. Culture par génération de cellules souches mésenchymateuses et lyophilisation (pourT75PeiBouteille par exemple)

(1) mettreMilieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateusesÉquilibrer à température ambiante.

(2) Lavage: retirer les cellules, aspirer le milieu de culture dans le flacon de culture pour jeter, chaqueT75Bouteille de cultureUtiliser10mL~15mLPBSRincer les cellules une fois.

(3) Digestion: ajouter 3 mlDigestif, permettant au digestif d'infiltrer toute la surface de croissance cellulaire, après avoir placé CO2 Dans l'incubateur,37℃Digestion 2 minutes~6 minutesObservation par miroir, environ 80%Lorsque les cellules ci - dessus se rétractent et deviennent rondes et tombent,Ajouter deux fois le volumeMilieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateusesTerminer la digestion, souffler pour disperser les cellules enUnicellulaire, effectuer un comptage cellulaire.

Note:Si la plupart des cellules se rétractent pour arrondir mais ne tombent pas, vous pouvez doucement battre la paroi de la bouteille pourSa chute. Si les cellules ne tombent pas, la digestion peut être prolongée.

(4) Collecte:300g,5 minutesCentrifuger pour recueillir les précipités cellulaires et jeter le limpide.

(5) Génération/Stockage congelé: Si vous effectuez des opérations de passage, utilisezMilieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateusesRemettre les cellules en suspension, selon la densité d'inoculation appropriée (recommandé8000Une cellule/en cm₂), ensemencer les cellules à celles qui ont été ajoutées à l'équilibre à température ambiante20 mlMilieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateusesde T75Dans une bouteille de culture, mettre 37℃Et,5 % de CO2 La culture se poursuit dans l'incubateur.

Si les cellules sont congelées, l'étape (4), les cellules recueillies précipitent, ajouter la bonne quantité de cellules à la densité de stockage de gelLyophilisat souffler doucement pour remettre en suspension les cellules et bien mélanger, transférer dans le lyophilisateur cellulaire, le lyophilisateur est placé dans la descente du programmeBoîte de températureDans,-80℃Passer la nuit,24 heuresAprès transfert dans l'azote liquide pour une conservation à long terme.

4. Réanimation des cellules souches mésenchymateuses (pour T75Bouteille de culture par exemple)

(1) mettreMilieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateusesÉquilibrer à température ambiante, chaque bouteille de culture est ajoutée15 ml deMilieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateuses- Oui.

(2) Retirer les cellules congelées, les placer 37℃Décongeler rapidement dans un bain - Marie.

(3) Transfert de la suspension cellulaire immédiatement après décongélation 1 mlà 15 ml Tubes centrifugesDans, ajouter goutte à goutte 4 mètresL Milieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateusesCompter après mélange.

(4) Selon les résultats du comptage, selon la densité d'inoculation appropriée (recommandé 8000 Une cellulepar cm₂) Mettre les cellulesInoculé à rejoint 15 mètresL Milieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateusesDans un récipient de culture cellulaire.

Note:Si le lyophilisat cellulaire ne contient pas DMSO, peut ajouter des cellules directement 20 mètresL Milieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateusesSans changement le lendemainLiquide.

(5) Placer les cellules dans 37℃ ,5 % de CO2 Cultiver en incubateur.

(6) 12h~24 heuresAprès cela, les cellules à appliquer normalement sur le mur, abandonner la culture, ajouterFrais, équilibré à température ambiante 20 mlMilieu de culture sans sérum de cellules souches mésenchymateuses. Selon la croissance cellulaireSituation, chaque 3Changement de jour au degré de fusion cellulaire atteint 80%~90%- Oui.

Précautions

1. Ce produit est limité à l'utilisation de la recherche scientifique expérimentale et ne doit pas être utilisé dans des domaines tels que le diagnostic clinique, le traitement, etc.

2. Ce produit ne contient pas d'antibiotiques et l'ajout d'antibiotiques n'est pas recommandé. Si des antibiotiques doivent être ajoutés, alorsLes conditions de culture doivent être optimisées.

3. Ce produit ne contient pas de rouge de phénol, ne contient pas de sérum et d'ingrédients d'origine animale, si nécessairePeut être ajouté en plus.

4. Pour un effet idéal de culture cellulaire, ce produit peut être utilisé directementIl est également possible d'ajouter des facteurs de croissance cellulaire ou des hormones nécessaires, etc., en fonction du type de cellule ou des besoins de recherche.

5. livreproduitLes effets de la culture des cellules peuvent être dus à l'origine cellulaire, aux conditions de stockage, aux échantillonsQualité, opérateurA l'expérience, il y a une différence.

6. Les produits doivent être stockés dans les conditions de stockage spécifiées et utilisés pendant la période de validité.

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