Vols ez - ECLLiquide chimiluminescent (classe flyker)

Description du produit

Ez ECL FlygChimioluminescent est un chimioluminescent amélioré de haute sensibilité * actuel(ECL) HRPSubstrat qui peut aider l'utilisateur à atteindre la détection de protéines à faible niveau de flyker lors de l'analyse par immunoblot(<1×10^-13Et,-14g)Extrêmement économe en anticorps.Ouest FemoLe substrat peut être utilisé pour la peroxydase de raifort(HRP)L'expérience d'immunoblot du coupleur fournit un signal lumineux et une sensibilité de détection de niveau Flick. CetteECLLes substrats sont compatibles avec une large gamme de membranes, de liquides de fermeture et de dilutions d'anticorps pour des performances exceptionnelles, une polyvalence et un rapport qualité / prix élevé, répondant aux besoins des utilisateurs en matière d'applications d'immunoblot.

Ouest FemoCaractéristiques du substratPour:

•Haute sensibilité: détection des membranes de nitrocellulose ouPVDFBandes protéiques de niveau Flick sur la membrane.

•Longue durée du signal: la bande de Blot incubée par le substrat peut produire en continu dans des conditions optimisées6~8 hSignaux lumineux détectables.

Concentration de dilution recommandéePour:

•Une résistance à la concentration: recommandé pour1 µg/mLDilution du liquide de stockage1: 5 000à1: 100 000Le multiple

•Concentration de II - résistance: recommandé pour1 µg/mLDilution du liquide de stockage1: 100 000à1: 500 000Le multiple

Informations de commande

Composants du produit

Transport et conservation

Transport de glace bleue.4℃ Conservation sèche à l'abri de la lumière, date d'expiration12Mois.

mode d'emploi

1. Retirer le film d'impression, ajouter un liquide de fermeture approprié pour incuber sous serre20 à 60 minutes, en oscillant simultanément pour fermer les sites de liaison aux protéines non spécifiques sur la membrane.

2. Retirer la membrane du liquide de fermeture incuber dans une serre avec un anti - liquide de travail1 heure, oscillant simultanément; Ou dans28℃ incuber pendant la nuit sans Oscillation.

3. Une quantité suffisante de tampon de lavage est ajoutée à la membrane, ce qui garantit une couverture complète de la membrane * par le tampon. Incubation oscillatoire ≥5 minutes, remplacer le tampon de lavage et répéter la procédure4 ~ 6Une fois. Augmenter le volume de tampon de lavage, le nombre de lavages et le temps de lavage aident à réduire le signal de fond.[Note]:① un bref lavage de la membrane dans le tampon de lavage avant l'incubation améliore l'efficacité du lavage. ② recommandé ci - dessusHRPIl est très important de marquer la dilution anti - deux.

4. SeraHRPLe liquide de travail marqué diarmique incubé avec membrane en serre1 heureOsciller en même temps.

5. Répétez les étapes3Pour éliminer les non liésHRPMarquer deux anti.[Note]:Membrane etHRPUn lavage cher * doit être effectué après l'incubation du diacide marqué.

6. SeraALa solution etBLe liquide est mélangé en proportions égales, préparé en liquide de travail. Chaqueen cm²Utilisation de membranes0.01~0.1 mLLiquide de travail, le liquide de travail peut être stable sous la serre8 heures- Oui.[Note]:L'exposition à la lumière du jour ou à d'autres lumières fortes peut endommager le liquide de travail, pour obtenir * de bons résultats, veuillez conserver ce liquide de travail dans la lumière de la bouteille ambrée; L'éclairage commun du laboratoire n'endommage pas le liquide de travail.

7. Incubation du film d'empreinte dans le liquide de travail5 minutes.retirez le film d'empreinte du liquide de travail et placez - le dans une feuille de plastique ou un papier plastique propre (film), aspirez l'excès de liquide avec une feuille de papier absorbant et pressez soigneusement les bulles d'air entre l'empreinte et le papier plastique.

8. Placez le film d'impression enveloppé dans du papier plastique (film) dans une cassette de film avec la protéine tournée vers le haut et éteignez toutes les lumières à l'exception des lumières appropriées pour l'exposition du film, telles que les lumières de sécurité rouges.[Note]:① Le film doit rester sec pendant l'exposition; ② assurez - vous d'enlever complètement l'excès de substrat * du film et du papier plastique; ③ pendant toute la période de traitement du film, utilisez des gants.

9. SeraXLe film lumineux est placé au - dessus du film. Recommandé * Une exposition60 s. Le temps d'exposition peut ensuite être ajusté pour obtenir * de bons résultats. Réaction de chimiluminescence avant l'incubation du substrat5 à 30 minutesLa période est * intense. Cette réaction peut durer plusieurs heures, mais l'intensité diminue avec le temps, et comme il y a une exposition plus longue après l'incubation du substrat, le temps d'exposition peut avoir besoin d'être prolongé pour obtenir un signal plus fort. Si vous utilisez un dispositif d'imagerie de stockage phosphorescent (tel queBio-RadSystèmes d'imagerie moléculaire) ouCCDLa caméra peut nécessiter un temps d'exposition plus long.[Note]:Tout mouvement entre le film et le film peut créer un signal non spécifique sur le film.

10. Le film est développé à l'aide de révélateurs et fixateurs appropriés. Si le signal est trop fort, le temps d'exposition est réduit ou la membrane d'empreinte est décapée et la concentration d'anticorps réduite est redétectée.

Précautions

1. Ce produit est utilisé dans des études expérimentales scientifiques et ne doit pas être utilisé dans des domaines tels que le diagnostic clinique, le traitement, etc.

2. Pour obtenir * de bons résultats, tous les composants du système doivent être optimisés, y compris le volume de l'échantillon, les concentrations en anti - un et anti - deux et le type de membrane et de réactif de fermeture.

3. Utilisez ce produit que précipité colorimétriqueHRPLa concentration d'anticorps requise pour la détection du substrat est faible. Pour optimiser la concentration en anticorps, effectuez une analyse de point - blot systématique.

4. Aucun agent de blocage n'est bon * pour tous les systèmes, il est donc essentiel de trouver le tampon de blocage le plus approprié pour chaque système de test d'immunoblot. Le réactif de blocage a le potentiel de produire une réaction croisée avec l'anticorps, conduisant à l'apparition d'un signal non spécifique. Le tampon de fermeture peut également affecter la sensibilité du système. Lors de la conversion d'un substrat à un autre, il y a parfois un phénomène d'atténuation du signal ou d'augmentation du fond, peut - être parce que le tampon de fermeture n'est pas adapté au nouveau système de détection.

5. Utilisation des affinines/Évitez d'utiliser le lait comme réactif de confinement lorsque vous testez un système de biotine, car le lait contient de la biotine endogène non quantifiée, ce qui entraîne un signal de fond élevé.

6. Les volumes d'utilisation du tampon de lavage, du tampon de blocage, de la solution d'anticorps et du fluide de travail du substrat sont garantis pour garantir que la membrane d'empreinte est complètement * recouverte d'un liquide tout au long de l'expérience, évitant ainsi le dessèchement de la membrane. L'utilisation accrue de tampons de fermeture et de lavage peut réduire les signaux non spécifiques.

7. Pour * de bons résultats, utilisez un shaker pendant l'étape d'incubation.

8. SeraTween20(Concentration finale0,05 ~ 0,1%)Le tampon de blocage et la solution diluée d'anticorps sont ajoutés pour réduire le signal non spécifique. Utilisez des produits de haute qualité tels que des détergents. Il est conservé dans des ampoules à faible teneur en peroxyde et autres impuretés.

9. N'utilisez pas l'azide de sodium comme conservateur du tampon. L'azide de sodium estHRPL'inhibition.

10. Évitez le contact direct des mains avec la membrane et le processus expérimental doit porter des gants ou utiliser des pinces à épiler propres.

11. Tout le matériel doit être propre et exempt de substances étrangères. Les instruments métalliques tels que les ciseaux ne doivent pas présenter de rouille visible. La rouille peut entraîner la formation de taches et un fond élevé.

12. Substrat liquide de travail stable à température ambiante8 heures.La lumière du jour ou toute autre lumière intense peut endommager le substrat, pour obtenir * de bons résultats, conservez le fluide de travail du substrat dans une bouteille ambrée et évitez les fuites violentes à long terme sous toute lumière intense, et de courtes fuites violentes dans l'éclairage conventionnel du laboratoire n'endommageront pas ce fluide de travail.

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