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908 qiping Road, nouveau quartier de Pudong, Shanghai
Et Yuan Li - thing (Shanghai) biotechnologie Co., Ltd
908 qiping Road, nouveau quartier de Pudong, Shanghai
Description du produit
2 x Taq PCR Plus Mix Ouila PCRPrémélange réactionnel contenantTaq ADN PolyméraseEt,dNTPLe tampon de réaction,chargement colorantEtc ingrédients, il suffit de prendre la bonne quantité de ce produit lors de l'utilisation, ajouter des modèles et des amorces, et ajouterddH2OCompléter le volume de sorte que la concentration du système réactionnel soit 1× peut être faitla PCRLa réaction.la PCRProduits3 'Bande d'extrémité saillanteABase, après purification peut être utilisé directement pourT/ALe Clone.
Ce produit utilise un système enzymatique complexe qui estADN de TaqPolymérase et3 '5 'Synergie de protéine active d'Exonucléase, peut réaliser l'amplification de rendement élevé sous le système de tampon de réaction optimisé, peut amplifier ≤7 kodeADNFragment, et compatible30%-70% GCModèle de contenu. Par rapport à la traditionTaqEnzymes (WT-Taq), dont le taux d'extension augmente2 - 4Double, raccourcit considérablement la période de réaction.
Deux colorants sont inclus dans ce produit,la PCRAucun ajout supplémentaire n'est nécessaire une fois la réaction terminéetampon de chargementL'électrophorèse peut être effectuée directement et deux bandes d'indication bleues et rouges apparaîtront lors de l'électrophorèse. Ce colorant n'affecte pasla PCREfficacité d'amplification, mais pour la nécessité dela PCRExpériences sur les produits pour l'analyse optique de l'Absorbance, de la fluorescence, etc., il est recommandé de procéder à l'analyse avantla PCRLe produit est purifié ou on utilise un produit sans colorantla PCRPrémélange.
Informations de commande
Nom du produit |
Référence |
spécification |
2 x Taq PCR Plus Mix |
AN11L828 |
2 * 1 ml |
2 x Taq PCR Plus Mix |
AN11L829 |
5 * 1mL |
Transport et conservation
Transport de glace bleue.-20℃ conservation, date d'expiration24Mois.
mode d'emploi
1. Conventionnella PCRSystème de réaction (opération sur glace)
Composants |
20 μLLe système |
50 μLLe système |
Concentration finale |
2 x Taq PCR Plus Mix |
10 μL |
25 μL |
1 x |
正向引物(10 μM) et(1) et |
0,4 - 0,8μL |
1 - 2μL |
0,2 - 0,4μM |
Amorces inversées (10 μM) et(1) et |
0,4 - 0,8μL |
1 - 2μL |
0,2 - 0,4μM |
ADNModèle(2) et |
XμL |
XμL |
- |
ddH2O |
À 20μL |
À 50μL |
- |
(1) La concentration finale recommandée pour les amorces est0,2 ~ 0,4μMEn cas de mauvais effet, on peut0,1 ~ 1μMAjustement dans la plage de concentration;
(2) Différents modèles * La concentration de la bonne réaction varie pour 50 μLExemple de système: le modèle est le génomeADNLorsque l'utilisation généralement recommandée est10~200 ng; lorsque le modèle est un plasmide ou un virusADNLorsque l'utilisation généralement recommandée est10 pg à 5 ng.template est susceptible de provoquer une amplification non spécifique lorsqu'il y a trop de volume.
2. Méthode en trois étapesla PCRProcédure de réaction
étape |
température |
Temps |
Pré - dénaturation(3) et |
95℃ |
3 à 5 minutes |
transgenre |
95℃ |
30 secondes |
Recuit(4) et |
55 à 65℃ |
30 secondes |
Extensions(5) et |
72℃ |
15 à 30 sec/kb |
30~35 cycles |
||
Extension finale |
72℃ |
5 minutes |
3. Méthode en deux étapesla PCRProcédure de réaction
étape |
température |
Temps |
Pré - dénaturation(3) et |
95℃ |
3 à 5 minutes |
transgenre |
95℃ |
30 secondes |
Recuit et extension(4) et |
60 à 65℃ |
30 sec/ko |
30~35 cycles |
||
Extension finale |
72℃ |
5 minutes |
(3) Cette condition de pré - dénaturation est adaptée à la grande majorité des réactions d'amplification, pour certains gabarits complexes tels que: liquide bactérien, colonies (levures notamment)la PCRAmplification, le temps de pré - dénaturation peut être prolongé de manière appropriée à10 minutesPour améliorer l'effet de pré - dénaturation;
(4) Température de recuit s'il vous plaît selon les amorcesTmParamètres de valeur. Si nécessaire, il est recommandé de rechercher * La température appropriée pour la combinaison des amorces avec le gabarit en établissant un gradient de température. De plus, la température de recuit détermine directement la spécificité d'amplification et, si l'on constate que la spécificité d'amplification est faible, la température de recuit peut être augmentée de manière appropriée.
(5) En ce qui concerne le taux d'élongation, lorsque la longueur du fragment de destination ne dépasse pas3 koLorsqu'il est recommandé d'utiliser15 sec/ ko; lorsque la longueur du fragment de destination est supérieure à3 koLorsqu'il est recommandé d'utiliser30 sec/ko.Le taux d'élongation est lié à la complexité du gabarit, si un faible rendement peut améliorer le temps d'élongation de manière appropriée.
Précautions
1. Ce produit est utilisé dans des études expérimentales scientifiques et ne doit pas être utilisé dans des domaines tels que le diagnostic clinique, le traitement, etc.
2. Dans ce produit2 x Taq PCR Plus MixBesoin de fondre * utiliser après tout pour éviter une concentration d'ions inégale.
3. Il est recommandé de formuler tous les composants réactifs sur de la glace et d'ajouter à la fin2 x Taq PCR Plus Mix- Oui.
4. L'utilisation de modèles génomiques pour l'amplification de fragments plus longs nécessite l'utilisation de purifications de haute qualitéADNModèle, peut être amélioréla PCRTaux de réussite.
5. Ce produit amplification produit peut être utilisé pourT/ALe Clone. Parce que ce produit contientChargement de colorant,la PCRLe produit ne peut être suffisamment éliminé qu'après récupération de la colleChargement de colorant- Oui.
6. Il est recommandé d'utiliser la méthode de coloration vésiculaire pour la coloration post - électrophorétique, la méthode de coloration par collage entraînera une dispersion de la bande indicatrice rouge, ce qui ne favorise pas l'indication de la bande, aucun effet sur la bande indicatrice bleue. Bande bleue dans1 % de TAELa vitesse de migration dans le tampon est approximativement égale à1500 bpBande rouge dans1 % de TAELa vitesse de migration dans le tampon est approximativement égale à100 pb- Oui.
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