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IMR - 90 fibroblastes pulmonaires embryonnaires humains

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Fibroblastes pulmonaires embryonnaires humains IMR - 90 cellules, cellules primaires de fibroblastes pulmonaires embryonnaires humains | lignées cellulaires | souches cellulaires | souches, spécifications de gestion des banques cellulaires, souches cellulaires fournies avec un contexte clair, fournir des références et * conditions de culture!

Détails du produit

Cellules IMR - 90 (fibroblastes embryopulmonaires humains IMR - 90) ATCC ® CCL-186 ™ Informations détaillées

Informations de base

  • Numéro ATCCLe CCL-186™
  • ​ désignationL'IMR-90
  • ​ déposantsAuteur: ww Nichols (W. W. Nichols)
  • Niveau de biosécurité: niveau 1 (BSL - 1)
  • Mode de transport: congelé (glace sèche)
  • Caractéristiques de croissance: croissance murale (adherent)
  • Genre espèce: personnes (Homo sapiens) et
  • Morphologie: fibroblaste (fibroblast)
  • Sources organisationnelles: poumon (Lung)
  • État de la maladieNormal (normal)
  • Types de cellules: fibroblastes (fibroblast)

Permis et règlements

En plus de l'Accord de transfert de matériel (MTA) mentionné ci - dessus, d'autres licences ATCC et / ou réglementaires peuvent être nécessaires pour transférer ce matériel ATCC. Les utilisateurs qui achètent du matériel ATCC sont ultimement responsables de l'obtention de telles licences. Pour connaître les exigences spécifiques d'expédition dans votre région, veuillez vous renseigner ici.

Application

  • Transfection de l'hôte (pour la technologie nucleofection de la société Lonza).

Susceptibilité aux virus

Cette cellule est sensible aux virus suivants:
  • Poliovirus humain de type 1
  • Poliovirus humain de type 2
  • Varicelle - virus du zona (varicella - Zoster)
  • Virus de l'herpès simplex de type 1 (Herpes simplex virus 1)
  • Virus de l'herpès simplex de type 2 (Herpes simplex virus 2)
  • Poliovirus humain de type 3
  • Virus de la Vaccine (vaccinia virus)
  • Cytomégalovirus humain 5 (CMV)
  • Virus de la stomatite vésiculaire (vesicular stomatitis virus)

Caractéristiques moléculaires

  • Inverser l'activité de la transcriptaseNégatif (Reverse Transcript: Negative)
  • Profil ADN Str(courtes séquences répétées en tandem):
    • Amelogenin (locus sexuel): X
    • CSF1PO : 11,13
    • D13S317:11,13
    • D16S539:10,13
    • D5S818:12,13
    • D7S820:9,12
    • THO1 : 8,9,3
    • Tpox: 8,9
    • vWA : 16,19
  • Analyse cytogénétiqueDiploïdie féminine normale (46, XX), Chromosome stable
  • IsoenzymesGlucose - 6 - phosphate déshydrogénase (g6pd) de type B (Isoenzymes: g6pd, b)

Source et contexte

La lignée cellulaire IMR - 90 a été créée par W. W. Nichols et ses collègues à partir deFoetus chez les femmes âgées de 16 semainesIsolé dans le tissu pulmonaire normal, est un fibroblaste diploïde humain.
Le potentiel de division, la susceptibilité virale et d'autres propriétés de la Cellule ont été étudiés en profondeur et peuvent être utilisés comme alternative au wi - 38 (une autre souche de fibroblastes pulmonaires humains couramment utilisés) et à d'autres souches standard de cellules pulmonaires humaines.
Les cellules IMR - 90 ont été rapportées avant l'apparition du vieillissementLe nombre de multiplications de population (PDL) est d'environ 58- Oui.

Conditions de culture

1. Milieu de croissance complet
Le milieu de base est le milieu essentiel Eagle (eagle's Minimum Essential Medium), produit 30 - 2003, formulé par ATCC.
Lors de la formulation du milieu complet, ajouter au milieu de base10% de sérum de veau foetal (FBS)- Oui.
2. Environnement de culture
  • Atmosphère de gaz: air (95%) + dioxyde de carbone (co₂, 5%)
  • température:37.0°C
La génération (subculture)
étapes de fonctionnementPour:
  1. Retirer et jeter l'ancienne solution de culture.
  2. Les couches cellulaires sont brièvement rincées avec une solution de trypsine - 0,53 mm EDTA à 0,25% (P / v) pour éliminer les résidus sériques contenant l'inhibiteur de la trypsine.
  3. Ajouter 2,0 - 3,0 ml d'une solution de trypsine - EDTA dans le flacon de culture et observer au microscope inversé jusqu'à dispersion de la couche cellulaire (généralement 5 - 15 minutes).
    Remarque: Évitez de secouer ou de frapper le flacon de culture et évitez les amas de nœuds cellulaires. Les cellules difficiles à disperser peuvent être placées dans un incubateur à 37°c pour une dissociation accélérée.
  4. Ajouter 6,0 - 8,0 ml de milieu de croissance complet et souffler doucement les cellules pour mettre fin à la digestion par les enzymes pancréatiques.
  5. Fractionnez la suspension cellulaire dans un nouveau récipient de culture (p. ex., un flacon ou une boîte de pétri).
  6. Incuber à 37°c dans un incubateur à 5% de co₂.
Proportion de générations: recommandé de 1: 2 à 1: 8 (soit 1 portion de suspension cellulaire à 2 - 8 nouveaux récipients).
Fréquence de changement de milieu de culture: changer le milieu complet frais tous les 3 - 4 jours.
La conservation (Preservation)
  • Liquide de stockage congelé: milieu de croissance complet (95%) + diméthylsulfoxyde (DMSO, 5%).
  • température de stockagePhase vapeur d'azote liquide (Liquid Nitrogen Vapor Phase).

Produits connexes

  • Milieu de base recommandé(sans suppléments supplémentaires ni sérum): ATCC 30 - 2003 (eagle's Minimum Essential Medium).
  • Sérum recommandé: ATCC 30 - 2020 (sérum de veau foetal).

Références

  1. Nichols WW, et al. Caractérisation d'une nouvelle souche cellulaire diploïde humaine, IMR-90.La science196: 60-63, 1977.(PubMed: 841339)
  2. Rad50 humain est physiquement associé à Mre11 humain: identification d'un complexe multiprotéique conservé impliqué dans la réparation de l'ADN recombinant.Mol Cellule Biol16: 4832-4841, 1996.(PubMed: 8756642)
  3. Ostlund RE Jr., et al. Un transporteur stéréospécifique de myo-inositol/D-chiro-inositol dans les cellules hépatiques HepG2.J Biol Chem271: 10073-10078, 1996.(PubMed: 8626564)

Autres informations

  • Informations sur la Banque de cellules: la Banque de cellules de la Commission des collections de cultures typiques de l'Académie chinoise des sciences (gnhu32) fournit cette cellule, qui a été testée négative pour Mycoplasma, bactéries et champignons et a été identifiée sans erreur par Str.
  • Restrictions d'approvisionnementPour la recherche uniquement.

Cellules IMR - 90, fibroblastes pulmonaires embryonnaires humains

Numéro ATCC® : CCL-186™

Dénominations : IMR-90

Dépôtants : WW Nichols

Niveau de biosécurité: 1

Expédié: congelé

Moyen & Sérum: Voir Propagation

Propriétés de croissance: adhérent

Organisme : Homo sapiens (humain)

Morphologie : fibroblaste

Source: Organe: poumon

Maladie: normale

Type de cellule: fibroblaste

Permis/formulaires : En plus de l'ATM mentionné ci-dessus, d'autres permis ATCC et/ou réglementaires peuvent être nécessaires pour le transfert de ce matériel ATCC. Toute personne qui achète du matériel ATCC est en dernier ressort responsable de l'obtention des permis. Veuillez cliquer ici pour obtenir des informations sur les exigences spécifiques pour l'expédition à votre emplacement.

Applications: hôte de transfection (technologie Nucleofection de Lonza)

Susceptibilité virale : poliovirus humain 1

Poliovirus humain 2

Varicelle-Zoster

Virus de l'herpès simplex 1

Virus de l'herpès simplex 2

Poliovirus humain 3

Virus de la vaccination

Herpèsvirus humain 5

Virus de la stomatite vésiculaire

Transcription inverse : négative

Profil ADN (STR): Amélogénine: X

CSF1PO : 11,13

D13S317: 11,13

D16S539: 10,13

D5S818: 12,13

D7S820: 9,12

THO1: 8,9.3

Tpox: 8,9

vWA : 16,19

Analyse cytogénétique: femelle humaine normale; diploïde; stable

Isoenzymes: G6PD, B

Âge: 16 semaines de gestation

Sexe: Femme

Ethnie: Caucasien

Commentaires: La souche de fibroblaste diploïde humain IMR-90 a été dérivée par W.W. Nichols et ses associés à partir des poumons d'un fœtus féminin de 16 semaines. [22381]

Le potentiel de division, la sensibilité virale et d'autres propriétés ont été soigneusement étudiées de sorte que la lignée peut être considérée comme une alternative au WI-38 et à d'autres souches de cellules pulmonaires humaines standard.

On a rapporté que les cellules étaient capables d'atteindre 58 doubles de population avant le début de la sénescence. [22381]

Propagation: milieu de croissance complet ATCC: Le milieu de base pour cette lignée cellulaire est le milieu essentiel minimum de l'aigle formulé ATCC, catalogue no 30-2003. Pour obtenir le milieu de croissance complet, ajouter les composants suivants au milieu de base: sérum bovin fœtal à une concentration finale de 10%.

Atmosphère: air, 95%; dioxyde de carbone (CO2), 5%

Température: 37.0°C

Sous-culture : Protocole :

Retirer et jeter le milieu de culture.

Rincer brièvement la couche cellulaire avec une solution EDTA 0,53 mM de trypsine à 0,25% (p/v) pour éliminer toutes les traces de sérum contenant un inhibiteur de trypsine.

Ajouter 2,0 à 3,0 ml de solution de trypsine-EDTA au ballon et observer les cellules sous un microscope inversé jusqu'à ce que la couche cellulaire soit dispersée (habituellement en 5 à 15 minutes).

Remarque : Pour éviter le regroupement, ne pas agiter les cellules en frappant ou en secouant le flacon en attendant que les cellules se détachent. Les cellules difficiles à détacher peuvent être placées à 37°C pour faciliter la dispersion.

Ajouter 6,0 à 8,0 ml de milieu de croissance complet et aspirer les cellules en pipettant doucement.

Ajouter des aliquotes appropriés de la suspension cellulaire dans de nouveaux récipients de culture.

Incuber les cultures à 37°C.

Ratio de sous-section: Un rapport de sous-section de 1:2 à 1:8 est recommandé

Renouvellement moyen : tous les 3 à 4 jours

Conservation: milieu de congélation: milieu de croissance complet 95%; DMSO, 5 %

Température de stockage: phase de vapeur d'azote liquide

Produits connexes: Médium recommandé (sans les suppléments supplémentaires ou le sérum décrit dans ATCC Medium):ATCC 30-2003

sérum recommandé:ATCC 30-2020

Nichols WW, et al. Caractérisation d'une nouvelle souche cellulaire diploïde humaine, IMR-90. Science 196: 60-63, 1977. PubMed : 841339

32932: Dolganov GM, et al. Rad50 humain est physiquement associé à Mre11 humain: identification d'un complexe multiprotéique conservé impliqué dans la réparation de l'ADN recombinant. Mol. Cellule. Biol. 16: 4832-4841, 1996. PubMed : 8756642

33041: Ostlund RE Jr., et al. Un transporteur stérospécifique de myo-inositol/D-chiro-inositol dans les cellules hépatiques HepG2. J. Biol. La chimie. 271: 10073-10078, 1996. PubMed : 8626564

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