Récepteur olfactif ai1 anticorps

Processus de préparation des anticorps:

1. Matériaux et réactifs

A. IG animales extraites

B. adjuvant de Freund et adjuvant de Freund

D. lapins animaux de laboratoire

E. autres matériaux et réactifs

2, sélectionnez le corps vivant expérimental.

3, effectuer des expériences immunologiques sur les animaux.

4, essayez de prendre un échantillon de sang pour le test, voir l'effet immunitaire.

5, si l'immunité réussit, tuer le corps vivant expérimental, recueillir tout le sérum.

6, purifier les anticorps.

7 - identification des anticorps. Sérum de veau foetal (stérile)
Présentation détaillée:

Nom anglais:Orai1

Alias anglais:protéine de canal de calcium1 réactivée par relâchement de calcium1; un modulateur de calcium réactivé par relâchement de calcium1; protéine de canal de calcium activée par libération de calcium1; CRACM1; CRACM1; CRCM1; CRCM1_HUMAN ; FLJ14466; Orai1; modulateur de calcium activé de libération de calcium ORAI1; orai1; ORAT1; protéinora1; protéinorai-1; TMEM142A; TMEM142A; Protéine transmembrana142A.

Réactions croisées: Homme, souris, rat, chien, cochon, vache, cheval, lapin, mouton

Marquage: non conjugué

Sources d'anticorps: Lapin

Types d'anticorps: polyclonal

Immunogènes: KLH conjugué peptide synthétique dérivé de Orai1 humain

Localisation des cellules protéiques: membrane cellulaire

Méthode de purification:affinitypurifiedbyProteinA

Sous - type: IgG

Caractéristiques: Liquide

Concentration: 1mg/ml

Liquide de stockage0,01 MTBS(pH7,4) avec 1 % BSA, 0,03 % Proclin300 et 50 % Glycerol.

Conditions de conservation: Expédié à 4 ℃. Stoquer à -20°C par an. Évitez les cycles de congélation/dégel.
Produits de la société pour la recherche scientifique uniquement
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Désacétylation des histonesNom anglais de l'anticorps: hdac8 immunogène: klh Conjugated syhetic Peptide derived from Human hdac8

Étapes opérationnellesPour:

1. Déparaffinage hydratation. Les tranches de paraffine sont mises à tremper pendant 15 minutes dans le xylène frais et répétées trois fois. Après élimination de l'excès de liquide, on place successivement de l'éthanol anhydre, de l'éthanol à 95%, de l'éthanol à 90%, de l'éthanol à 80%, de l'éthanol à 70%, on laisse tremper chacun pendant 5 minutes et on rince à l'eau distillée (ou à l'eau du robinet) pendant 5 minutes. Rincer les tranches avec du tampon PBS (réactif 1, dissoudre la poudre sèche dans 1 L d'eau désionisée) pendant 5 minutes et répéter trois fois.

2. Réparation antigénique. Placer la coupe de tissu après l'hydratation de déparaffinage sur le support de coupe en plastique résistant à haute température dans un bécher (ou une cassette de réparation), ajouter la quantité appropriée de solution de réparation 1 x solution de réparation d'antigène citrate de sodium (réactif 2, diluer 100 x solution de réparation d'antigène citrate de Sodium plus eau désionisée dans 1 x solution de réparation d'antigène citrate de sodium), le niveau du liquide à tremper dans le tissu tranché à une certaine hauteur, mettre la cassette de réparation dans l'eau bouillante pour faire bouillir la réparation pendant 15 minutes, retirer la lame de verre, naturellement refroidi à la température ambiante. Rincer les tranches avec du tampon PBS pendant 5 minutes et répéter trois fois.

Attention: lors de la réparation de l'antigène, la solution de réparation doit toujours garantir que la tranche est toujours immergée dans le liquide, situation générale: la quantité de solution de réparation est d'environ 800 ml / 1 rack.
3. Bloquer la peroxydase endogène. Les lames sont séchées avec du papier absorbant, un stylo immunohistochimique fait des cercles autour des tissus, 50 µl d'agent bloquant la peroxydase endogène (réactif 3) sont ajoutés goutte à goutte sur les tissus tranchés pour bloquer la peroxydase endogène, incubés à température ambiante pendant 30 minutes, les tranches sont rincées avec du tampon PBS pendant 5 minutes et répétées trois fois.

4. Fermeture de sérum. Sécher les lames avec du papier absorbant, ajouter goutte à goutte 50 µl de sérum normal de chèvre (réactif 5), fermer à 37 ° C pendant 20 minutes pour réduire

Coloration spécifique.

5. Un anti - incubation. Diluer un antigène dans un liquide de travail avec une dilution d'anticorps (réactif 4), sécher le liquide autour du tissu de la lame avec du papier absorbant, ajouter goutte à goutte la quantité appropriée de liquide de travail d'anticorps, placer dans une boîte humide 4 ° C pour incuber pendant une nuit ou 37 ° C pour incuber pendant 1H - 2H.

6. Réchauffer. Après une nuit à 4 ℃ sortir l'échantillon du réfrigérateur et incuber à la température ambiante pendant 15 min remuer (incubation d'anticorps à 4 ℃ pendant la nuit Sélectionnez cette étape, comme l'incubation à température ambiante directement à l'étape suivante de nettoyage). Rincer les tranches avec du tampon PBS pendant 5 minutes et répéter trois fois.

7. Double incubation. 50 µl d'IgG Anti - lapin de mouton marqué (réactif 6) sont ajoutés goutte à goutte après séchage des tranches sur papier absorbant, incubés à 37°c pendant 20 minutes avec du PBS

Tampon pour rincer les tranches5 minutes, répétez trois fois.

8. Triple anti - incubation. Après séchage des tranches sur papier absorbant, 50 µl d'ovoprotéine en chaîne marquée à la raifort sont incubés goutte à goutte (réactif 7), à 37°c pendant 20 minutes et les tranches sont rincées avec du tampon PBS pendant 5 minutes, en répétant trois fois.

9. Rendu des couleurs. Jeter le tampon PBS et le papier absorbant essuyer les tranches; Chaque tranche est ajoutée goutte à goutte avec 50 µl de solution de travail DAB fraîchement formulée (réactif 8: réactif 9: réactif 1 = Configuration proportionnelle 1: 1: 18), incubée pendant 3 à 5 min, les résultats de la coloration sont observés au microscope optique, jamais trop foncé; Terminer le rendu des couleurs en rinçant les tranches à l'eau du robinet après le rendu des couleurs.

10. Repeint. Repentir goutte à goutte avec une quantité appropriée de teinture à la thréonine (réactif 10), incuber 1 - 5 minutes, rincer à l'eau du robinet pendant 5 minutes, ajouter goutte à goutte chlorhydrate d'alcool différenciation

Différenciation liquide30 secondes, rincer à l'eau courante.

11. Scellement de déshydratation. Les lames sont placées successivement dans de l'éthanol à 70%, de l'éthanol à 80%, de l'éthanol à 90%, de l'éthanol à 95%, de l'éthanol anhydre, chacune est immergée pendant 5 minutes et les lames sont placées dans du xylène pendant 15 minutes supplémentaires, en répétant trois fois. Les lames sont retirées pour sécher légèrement et scellées avec de la gomme neutre.

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