Vérification de l'effet de stérilisation des autoclaves

Vérification de l'effet de stérilisation des autoclaves

L'un des instruments expérimentaux les moins fiables du laboratoire de microbiologie est le stérilisateur, généralement utilisé dans les laboratoires est le stérilisateur à vapeur haute pression. La pratique exige que l'équipement expérimental soit régulièrement inspecté et / ou vérifié (marqué), entretenu et entretenu afin d'assurer la performance au travail et la sécurité opérationnelle. Votre stérilisateur a - t - il été calibré ou vérifié de la même manière? Quelle est la méthode spécifique? Jetez un coup d'œil ci - dessous à ce qui concerne la vérification de l'effet de stérilisation des stérilisateurs à vapeur haute pression.

Vérification de l'effet de stérilisation des autoclavesIl existe généralement une méthode d'indicateur chimique, une méthode de thermomètre à point de rétention, une méthode de tube thermométrique maison et une méthode d'indicateur biologique, le principe de chaque méthode est similaire, principalement en vérifiant si la température dans le stérilisateur peut atteindre les exigences lors de la stérilisation. Nous pouvons choisir une ou plusieurs de ces méthodes à valider en fonction des spécificités de notre propre laboratoire.

I. principe de la méthode des indicateurs chimiques:

L'indicateur chimique à une certaine température et le temps d'action, sera soumis à la décoloration thermique ou la déformation, en fonction de cette caractéristique pour déterminer si les paramètres de stérilisation nécessaires sont atteints. Le laboratoire général est couramment utilisé pour le ruban indicateur de stérilisation sous pression 3M, ce ruban indicateur est utilisé pour juger de l'effet de stérilisation en utilisant le changement de couleur du ruban avant et après la stérilisation. Il est fait d'encre à partir de produits chimiques sensibles à la chaleur avec des agents de rendu des couleurs et des accessoires de peinture, et l'encre est imprimée en bandes sur un ruban adhésif spécialement conçu. Indique que le ruban adhésif peut être collé directement à l'extérieur de l'emballage, pas moins de 5 cm de longueur et légèrement pressé pour augmenter l'effet adhésif et d'encapsulation; Après une durée de 20 min à 121°c ou de 4 min à 130°c, les lignes d'indication blanches des lignes obliques imprimées sur le ruban deviennent noires et deviennent noires; Si la décoloration n'est pas uniforme, le colis peut être considéré comme ne répondant pas aux conditions de stérilisation.

II. Principe de la méthode du thermomètre à point de rétention:

La méthode du thermomètre à point de rétention est l'utilisation de la caractéristique du thermomètre à mercure sans reflux, dont le principe est similaire à celui d'un thermomètre traditionnel, qui peut indiquer la température maximale atteinte par le stérilisateur pendant le processus de stérilisation. Placez le thermomètre à mercure dans un grand triangle contenant de l'eau lors de la vérification, placez le triangle dans la partie supérieure et inférieure du stérilisateur lors de la stérilisation, regardez si la température du thermomètre à mercure et la température requise sont cohérentes après la stérilisation. Cette méthode ne peut que vérifier la température et ne peut pas indiquer si le temps de stérilisation a atteint les exigences, c'est donc un critère relativement faible pour la vérification du stérilisateur.

Iii. Principe de la méthode du tube thermométrique maison:

En utilisant certains produits chimiques fondus par la chaleur après refroidissement, la forme extérieure des cristaux est différente des caractéristiques, sceller les produits chimiques dans un petit tube de verre, lors de la stérilisation dans le stérilisateur, après la stérilisation pour observer la forme des cristaux, vous pouvez dire si la température est conforme à la norme. Le réactif couramment utilisé est l'acide benzoïque, le point de fusion de l'acide benzoïque est 121 - 123 ℃, avec la température de stérilisation du stérilisateur que nous exigeons est fondamentalement compatible, de sorte que la stérilisation scelle l'acide benzoïque solide dans un petit tube de verre dans le stérilisateur, à la fin de la stérilisation peut observer l'état de l'acide benzoïque pour vérifier si le stérilisateur a atteint la température requise. Les limites de cette méthode sont les mêmes que celles de la méthode du thermomètre à point de rétention et ne peuvent indiquer que la température au moment de la stérilisation, ce qui ne peut pas être jugé si le temps de stérilisation a atteint les exigences.

Principe de la méthode des indicateurs biologiques:

L'effet de la stérilisation thermodynamique a été déterminé en utilisant des bacilles de lipobacter thermophile non pathogènes comme germes indicateurs. Les bacilles de lipobacter thermophilus ont une forte résistance à la chaleur et leur capacité de résistance à la chaleur est similaire à celle du microorganisme pathogène Clostridium botulinum, qui sert d'indication de la bactérie pour vérifier que le stérilisateur peut répondre aux exigences de stérilisation. Les indicateurs biologiques sont divisés en trois types: suspension de Bacillus, comprimés de bacilles, comprimés de bacilles et tube indicateur mixte de milieu de culture. Généralement placé en 5 points du récipient stérilisé: avant, moyen, arrière et supérieur de la couche inférieure, point central de la couche intermédiaire. Après stérilisation, prenez l'indicateur pour ensemencer dans l'eau de bromocrésol - Glucose - peptone, 55 - 60 ℃ incuber pendant 2 - 7 jours, si le milieu de culture est clair, la couleur ne change pas, c'est - à - dire que les bacilles sont tués, le stérilisateur a un bon effet de stérilisation; Si le milieu est jaune et trouble, il est indiqué que les Bacillus n'ont pas été tués et que l'effet de stérilisation du stérilisateur n'est pas satisfaisant. C'est le cas des méthodes de validation de la suspension de Bacillus et des comprimés de Bacillus.

Actuellement, les laboratoires utilisent également couramment des tubes indicateurs biologiques commercialisés, dont le principe est le même que la suspension de Bacillus et les comprimés de bacilles, les tubes indicateurs ont des bacilles de Bacillus lipophiles thermophiles et des tubes en verre de liquide de culture, placez les tubes indicateurs en divers points à l'intérieur du récipient de stérilisation, après l'autoclave, les tubes en verre contenant le liquide de culture dans les tubes sont écrasés, le liquide de culture est libéré des tubes à l'intérieur, mis en culture dans un incubateur à 56 ° C, tout en faisant un contrôle positif. Si l'effet de stérilisation du stérilisateur n'est pas satisfaisant, indique que la croissance des germes dans le tube après la résurrection changera la couleur du bouillon est le bouillon devient jaune; Si la stérilisation du stérilisateur fonctionne bien, les bactéries intratubulaires sont inactivées et ne poussent plus, le bouillon est toujours de couleur violette originale. Pour la vérification des effets des stérilisateurs, il n'existe actuellement aucune fréquence de vérification des exigences strictes des normes pertinentes, mais les laboratoires devraient établir leurs propres règles de fréquence de vérification et les respecter strictement. Partant des deux aspects de l'opérabilité et de la conclusion de la vérification, le ruban indicateur et le tube indicateur biologique sont recommandés pour les petites séries, car les deux méthodes sont simples à utiliser et permettent une vérification complète de l'effet de stérilisation.

Accessoire: précautions lors de la stérilisation (certaines casseroles de stérilisation entièrement automatiques importées peuvent ne pas tenir compte de l'échappement)

Lors de l'utilisation d'un autoclave à vapeur, vous devez d'abord prendre soin d'exclure l'air froid à l'intérieur du stérilisateur tout en ouvrant la vapeur. L'orifice d'échappement peut être fermé après que tout l'air froid à l'intérieur du récipient ait été exclu. S'il reste encore une partie de l'air à l'intérieur du stérilisateur, une certaine valeur de pression a été atteinte sur le manomètre, mais la température à l'intérieur du stérilisateur n'a pas encore atteint le degré correspondant. Plus il reste d'air, plus la différence entre les deux est grande, la température interne est insuffisante, l'effet de stérilisation sera affecté.