Services techniques de pêche

Les services techniques de pêche sont généralement utilisés à un stade précoce pour comprendre l'amplification, la délétion, la fusion ou la rupture d'un gène ou d'un chromosome, pour le diagnostic prénatal, le dépistage postnatal des maladies génétiques, le diagnostic oncologique et l'évaluation pronostique. Les échantillons proviennent d'un large éventail de sources: tissus, cellules excrétées, liquide amniotique, sang, moelle osseuse peuvent tous être détectés et ne sont pas limités aux échantillons frais, les échantillons de paraffine de 2 à 3 ans peuvent tous être détectés.

Fish peut également détecter les acides nucléiques dans les puces tissulaires (actuellement couramment utilisés pour détecter les ncrna: microRNA, lncrna, circrna), peut connaître la localisation de l'expression des acides nucléiques dans des dizaines ou des centaines de spécimens, peut être utilisé pour analyser les différences d'expression des acides nucléiques dans le cancer et à côté du cancer, la corrélation entre l'expression des acides nucléiques et la survie, la relation entre l'expression des acides nucléiques et le développement tumoral, etc.

Processus expérimental du Service technique du poisson:

Services techniques de pêche(florescence in - site hybridation ou FISH) est une technique qui utilise un signal Fluorescent non radioactif pour détecter des échantillons hybrides in situ. Il combine la haute sensibilité, la sécurité du signal de fluorescence, l'intuitivité du signal de fluorescence et la haute précision de l'hybridation in situ avec l'ADN de l'échantillon à mesurer par des sondes d'ADN marquées par fluorescence, la discrimination et le comptage du signal de fluorescence sous Microscopie à fluorescence, permettant la détection et le diagnostic de cellules, d'échantillons de tissus présentant des anomalies chromosomiques ou génétiques, fournissant une base précise pour le typage, le pronostic et le pronostic de diverses maladies génétiques. Depuis que pinkel et heiles ont introduit la technologie Fish dans le domaine des tests chromosomiques à la fin des années 1980, la technologie Fish a été largement utilisée dans le diagnostic clinique et la recherche scientifique, montrant des avantages évidents par rapport à certaines technologies traditionnelles.

Technique d'hybridation in situ fluorescenteServices techniques de pêcheFish a une bonne stabilité et reproductibilité par rapport aux méthodes immunohistochimiques traditionnelles (IHC). Actuellement, l'Immunohistochimie est largement utilisée dans le diagnostic clinique dans de nombreux domaines tels que l'oncologie. L'objet de la détection de l'Immunohistochimie est la protéine associée à la maladie. Étant donné que l'expression de la protéine et sa conformation sont fortement influencées par divers facteurs (acides, bases et dénaturants, par exemple), la stabilité des conditions de détection est essentielle au résultat de la détection. En outre, le jugement des résultats des tests immunohistochimiques repose sur le jugement subjectif du testeur sur les résultats de rendu des couleurs, et pour certains résultats faiblement positifs, les différents testeurs sont susceptibles de diverger. Les facteurs ci - dessus peuvent tous influencer le diagnostic final de la condition par votre médecin.

Technique d'hybridation in situ fluorescenteServices techniques de pêcheL'objet est l'ADN dans les cellules, la structure dense en double hélice permet à l'ADN de survivre à des millions d'années tout en restant bon, sa structure est stable, pas facilement affectée par les conditions environnementales, fournissant une bonne base pour la stabilisation de la technologie d'hybridation in situ fluorescente. De plus, la décision des résultats d'hybridation in situ en fluorescence quantifie objectivement les résultats au sol de détection à l'aide d'un jugement de couleur et d'un comptage de signaux de fluorescence. L'automatisation de l'ensemble des opérations Fish peut être réalisée à l'aide des systèmes d'exploitation Fish correspondants, tels que l'hybrideur hybrit et le système de prétraitement des échantillons vp2000 d'Abbott - vysis, et des systèmes d'imagerie chromosomique, réduisant ainsi les facteurs subjectifs pour l'opérateur et le testeur et garantissant la précision des résultats.

PCR en raison de la sensibilité élevée, l'opération facile et rapide est l'application d'un plus grand nombre de techniques de diagnostic génétique au cours des dernières années, mais la proportion de faux négatifs et de faux positifs de la technique de diagnostic PCR est plus élevée, le même échantillon ne peut également être analysé qu'une seule fois et ne peut pas répéter les résultats de l'expérience. Avec l'évolution continue de la technologie de la sonde, la sensibilité actuelle de Fish s'est rapprochée ou a atteint le niveau de PCR et peut très bien compenser les limitations de la technologie PCR. La technique d'hybridation in situ par fluorescence permet non seulement d'obtenir un pourcentage extrêmement faible de faux positifs et de faux négatifs (29 000 cas d'utilisation de la sonde de diagnostic prénatal d'Abbott - vysis confirment un taux d'exactitude allant jusqu'à 99,9%), mais aussi de réaliser plusieurs manipulations Fish sur le même échantillon et de détecter des anomalies sur plusieurs Chromosomes ou gènes à la fois avec des sondes fluorescentes de différentes couleurs, ce qui permet de gagner beaucoup de temps. En outre, parServices techniques de pêcheDes études diagnostiques peuvent être réalisées sur des anomalies du nombre de chromosomes ou de gènes spécifiques, sur des délétions, des translocations et des réarrangements de fragments spécifiques.

La technique d'hybridation in situ par fluorescence (FISH) est une méthode qui applique le principe de l'hybridation par sonde d'acide nucléique à des substances fluorescentes non radioactives pour afficher la position de la séquence d'ADN dans le noyau ou sur le chromosome. Avec des caractéristiques telles que la rapidité, la sécurité, la sensibilité élevée et la conservation à long terme de la sonde, cette technologie a été largement utilisée dans des domaines tels que la cytogénétique, la biologie tumorale, la localisation génétique, la cartographie génétique, l'amplification génétique, le diagnostic prénatal et la recherche sur l'évolution des Chromosomes chez les mammifères.

Le point simple est le principe d'appariement complémentaire de base, c'est - à - dire que nous apparions un acide nucléique exogène (c'est - à - dire une sonde moléculaire) avec l'ADN ou l'ARN à détecter sur les tissus, les cellules, pour former une molécule d'hybridation d'acide nucléique, puis par certains moyens pour montrer la position de cette molécule d'hybridation.

ARN > ADN > ADN

　　Services techniques de pêcheIl a été largement utilisé dans les domaines de la cytogénétique, de la biologie tumorale, de la localisation génétique, de la cartographie génétique, de l'amplification génétique, du diagnostic prénatal et de la recherche sur l'évolution des Chromosomes chez les mammifères.

L'hybridation in situ par fluorescence simplifie la détection des variations structurelles chromosomiques. Par exemple, l'aneuploïdie des chromosomes des plantes est due à un comportement chromosomique anormal, c'est - à - dire qu'elle peut être causée par des différences dans le nombre et la structure des Chromosomes gamètes des deux parents ou par des affinités chromosomiques plus éloignées. Les chromosomes manquants, ajoutés ou substitués peuvent être détectés relativement facilement par Hybridation in situ.

La résolution spatiale et la sensibilité Fish permettent de localiser les gènes parents et amplifiés dans des cellules résistantes aux maladies et aux ravageurs. Le gène amplifié est principalement sur le même bras chromosomique, mais à une certaine distance du gène parent initial et souvent situé indépendamment sur le site des télomères chromosomiques; L'analyse Fish suggère que la rupture cellulaire peut être due à un réarrangement structurel des Chromosomes contenant des régions amplifiées. L'utilisation de Fish permet également de localiser la position et le nombre de copies de gènes exogènes dans les plantes génétiquement modifiées, ce qui a été un succès dans les cultures de tomates, de tabac, d'orge, de blé et de seigle. L'utilisation de la technologie Fish permet également de détecter certaines délétions génétiques associées à des maladies héréditaires, telles que la détection réussie de gènes manquants chez des patients atteints de la maladie d'aniridia.

Les techniques de localisation génétique pour l'hybridation in situ par fluorescence ont de nombreuses applications. Localisation des gènes associés au cancer du poumon muté pp2ac dans les régions chromosomiques, observation en microscopie à fluorescence pour enregistrer et analyser les caractéristiques des signaux d'hybridation. Les résultats ont montré un signal d'hybridation clair sur le Chromosome 5q23 - 31 des lymphocytes humains normaux et un signal plus fort sur les chromosomes 5 et 7 des cellules glc - 82. Description les mutations ponctuelles entraînent une altération de l'activité de pp2ac, ce qui entraîne une translocation génétique conduisant à la production de tumeurs pulmonaires. La technique Fish, combinée à des techniques biochimiques, informatiques et d'ADN Recombinant pour détecter le site alu, suggère que la séquence d'ADN est liée au type de bande. L'étude de la distribution des gènes codant dans le génome humain avec la technologie Fish a révélé que les gènes sont principalement concentrés dans les segments d'ADN de G + C (35% du génome entier) sur les chromosomes. La Technique FISH fournit des moyens importants pour l'étude de la structure centromérique. L'application de la technique Fish permet d'observer directement les télomères chromosomiques, ce qui simplifie l'étude de la structure et de la fonction des chromosomes dans le noyau.