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52, route de Chengwei, district de Jiading, Shanghai
Shanghai Graduate Industrial Co., Ltd
52, route de Chengwei, district de Jiading, Shanghai
Cellules musculaires lisses de l'artère pulmonaire de poulet

Propriétés de la marchandise:
Sources organisationnelles |
Spécifications du produit |
Forme cellulaire |
Référence |
Tissu de l'artère pulmonaire |
5×105 cellules/T25Flacon de culture cellulaire |
Comme les fibroblastes |
YS-01X7010 |
Introduction aux cellules:
Les fibroblastes de l'artère pulmonaire de poulet sont séparés du tissu de l'artère pulmonaire; L'artère pulmonaire est également appelée artère pulmonaire sèche. Chez les vertébrés respirant de l'air, le sang veineux est dirigé par le cœur vers les artères des poumons. L'artère pulmonaire principale commence dans le ventricule droit et se déplace obliquement vers le haut et vers l'arrière à gauche avant l'aorte, se divisant en artères pulmonaires gauche et droite sous l'arc aortique et pénétrant dans le poumon par la porte pulmonaire. Le tronc pulmonaire est situé à l'intérieur du péricarde et est un tronc d'artère grossier et court. À partir du ventricule droit, en diagonale au - dessus de la gauche dans la direction antérieure de l'aorte ascendante, jusqu'à l'arc aortique inférieur divisé en artères pulmonaires gauche et droite. L'artère pulmonaire gauche est plus courte et traverse devant la bronche principale gauche en deux branches dans le lobe supérieur et inférieur du poumon gauche. L'artère pulmonaire droite est longue et épaisse, l'aorte ascensionnelle et la veine cave supérieure sont transversales vers la droite et la porte pulmonaire droite est divisée en trois lobes supérieurs, moyens et inférieurs du poumon droit. Fibroblastes (Fibroblaste), est le principal composant cellulaire du tissu conjonctif lâche, différencié par les cellules mésenchymateuses de la période embryonnaire; Les fibroblastes sont plus grands, bien profilés, avec une structure aplatie en forme de fuseau ou d'étoile, dont le noyau est régulièrement ovale et le nucléole est grand et prononcé. L'activité fonctionnelle des fibroblastes est vigoureuse, le cytoplasme est faiblement alcalin, a une activité marquée de synthèse et de sécrétion de protéines, dans certaines conditions, il peut réaliser une interconversion avec les fibroblastes; Les fibroblastes jouent un rôle important dans la réparation de différents degrés de dégénérescence cellulaire, de nécrose et de défauts tissulaires. Les fibroblastes de l'artère pulmonaire qui viennent d'être isolés sont ronds, bien réfractifs et en suspension dans le milieu de culture.30 minutesLes parois cellulaires, dont les parties commencent à dépasser le pseudopied, se manifestant par de petites protubérances;6 heuresLes cellules postérieures sont essentiellement tapissées, étirées en forme de fuseau, le noyau est clair, plus uniformément distribué, dispersé en croissance et ne s'accumule pas en amas; Croissance cellulaire rapide,5 - 7Les jours sont dans un état de fusion, les cellules sont alignées étroitement, certains se chevauchent, plat, cytoplasme plus grand, cytoplasme transparent, noyau plus grand, de forme ovale et de couleur pâle. Les cellules sont fusionnées et reliées les unes aux autres en mailles; Les cellules sont distribuées à plat en forme de fuseau ou d'étoile de protubérance. Les principales fonctions des fibroblastes de l'artère pulmonaire dans des conditions physiologiques comprennent: la construction et le maintien de la morphologie normale de l'artère pulmonaire; Synthèse et libération de la matrice extracellulaire; Agrégation massive en temps opportun après une lésion tissulaire pour réparer les tissus endommagés.
Introduction à la méthode:
Le muscle lisse de l'artère pulmonaire de poulet isolé dans le laboratoire de la société a été préparé en utilisant la digestion de collagénase combinée à la méthode d'application différentielle, la quantité totale de cellules est d'environ5×10?cellules/La bouteille.
Détection de qualité:
Entreprise laboratoire muscle lisse de l'artère pulmonaire de poulet isolé trans - alphaSMAIdentification par immunofluorescence, pureté possible90%Ci - dessus et ne contient pasVIH-1Et,HBVEt,VHC, mycoplasmes, bactéries, levures et champignons, etc.
Information sur la culture:
Le milieu de culture contientFBSAdditifs de croissance,pénicillineEt,Streptomycineattendre
Fréquence de changement de liquide par2 - 3Changement de liquide une fois par jour
Caractéristiques de croissance Wall
Morphologie cellulaire fibroblastes like
Caractéristiques de passage transmissible5Génération ou génération;3Excellent état dans la génération
Liquide digestif0,25%
Conditions de culture phase gazeuse: air,95%;CO2,5%

Transfert cellulaire et congélation:
| Étapes de passage cellulaire | Étapes de lyophilisation cellulaire |
| Si la densité cellulaire atteint 80% - 90%, la culture de passage peut être effectuée. 1. Jeter le surnageant de culture et laver les cellules 1 - 2 fois avec du PBS sans ions calcium et magnésium. Ajouter 2 ml de digestat (0,25% Trypsin - 0,53 mm EDTA) dans un flacon de culture, placer dans un incubateur à 37 ° C pour la digestion pendant 1 - 2 minutes, puis observer la digestion des cellules sous un microscope, si la plupart des cellules deviennent rondes et tombent, rapidement revenir à la table d'opération, tapoter quelques flacons de culture après avoir ajouté une petite quantité de milieu pour terminer la digestion. 3. Appuyez sur 6 - 8 ml / flacon pour compléter le milieu de culture, bien agiter et bien aspirer, centrifuger à 1000 RPM pendant 4 minutes, retirer le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de milieu de culture et bien souffler. 4. Distribuer la suspension cellulaire dans de nouvelles boîtes contenant 8 ml de milieu ou dans des flacons dans un rapport de 1: 2 à 1: 5. | La lyophilisation cellulaire peut être effectuée lorsque la croissance cellulaire est en bon état. La bouteille t25 ci - dessous à titre d'exemple; 1. Lorsque les cellules sont congelées, après avoir abandonné le milieu de culture, le PBS lave le fond du flacon après 1 - 2 fois Ajouter 1 ml, après que les cellules deviennent rondes et tombent, ajouter 2 ml de milieu de culture pour terminer la digestion, peut être compté à l'aide d'une plaque de comptage de globules. 2.1000rpm centrifuger pendant 5 minutes pour enlever le surnageant. Resuspendre avec du sérum et ajouter du DMSO jusqu'à une concentration finale de 10%. Mélanger rapidement après l'ajout de DMSO, distribuer dans le lyophilisateur par quantité de 1 ml, en notant que le lyophilisateur est bien identifié. La société a gelé plus de 1x106 cellules par nombre de cellules de lyophilisateur. 3. Placez le réservoir de congélation dans la boîte de refroidissement du programme, mettez - le dans le réfrigérateur à - 80 degrés, au moins 2 heures plus tard, passez au stockage par irrigation à l'azote liquide. Enregistrez la position de la lyophilisation pour la récupérer la prochaine fois. |
Les méthodes de culture des cellules primaires sont généralement les 4 suivantes:
① méthode de culture de blocs de tissus
La culture de bloc de tissu est une méthode de culture primaire couramment utilisée, facile à utiliser et avec un taux de réussite élevé. Son approche de base consiste à ensemencer de petits amas de tissus cisaillés dans des flacons (ou boîtes) dont les parois peuvent être préalablement recouvertes d'une fine couche de collagène afin de favoriser l'adhésion des blocs de tissus aux parois du flacon, permettant aux cellules périphériques de croître vers l'extérieur le long des parois du flacon.
② méthode de culture digestive
③ méthode de culture de cellules en suspension
Pour les cellules cultivées en suspension, telles que les cellules leucémiques, les lymphocytes, les cellules de la moelle osseuse, les cellules cancéreuses et les cellules immunitaires dans l'eau thoracique et ascite sans digestion, une séparation par centrifugation à faible vitesse, une culture directe, ou une culture inoculée après séparation par un liquide stratifié de lymphocytes peuvent être utilisées.
④ culture d'organes
La culture d'organes se réfère à la culture dans des conditions environnementales spécifiques directement in vitro sans séparation tissulaire après l'obtention d'un organe ou d'un bloc de tissu d'un donneur, la culture d'organes peut maintenir l'intégrité relative des tissus d'organes et peut être utilisée pour se concentrer sur l'observation des connexions, des alignements et des interactions entre les cellules, ainsi que des effets de régulation biologique de l'environnement local.

Produits vendus par la société:
Protéine de moulage osseux de souris7 Nom anglais: Protéine morphogénétique osseuse de souris 7 Spécifications: Abréviations en anglais: BMP7
SourisBFacteurs de stimulation des lymphocytes Nom anglais: Stimulateur de lymphocytes B Spécifications: Abréviations en anglais: BAFF
Facteur d'apoptose chez la sourisBAX Nom anglais: apoptogène BAX Spécifications: Abréviations en anglais: BAX
Gènes liés à l'apoptose chez la sourisBCL-2 Nom anglais: BCL-2 inhibiteur de l'appoptose cellulaire Spécifications: Abréviations en anglais: BCL-2
Anticorps anti Ⅲ de souris(AT-ⅢELISAKits de réactifs96T/48T
Kit ELISA protéine 40 de choc thermique humain (HSP-40)Protéine de choc thermique humain40 (HSP-40)Kits de réactifs
EuglobulinLyse humaine, ELELISAKitL'euglobuline humaine(EL)Kits de réactifs96T/48TSous - assemblage importé
Angiogenèse humaine 1, rage 1Kit angiogenèse humaine1(ANG-1)Spécifications du kit:96T/48T
Plantes en proline(proline)Kit de quantification colorimétrique du contenu20Une fois
Le SeigneurHormone lutéinisante du poisson(LH)Spécifications du kit:96T/48T
PEMarquage des sourisCD5Anticorps monoclonaux
Anticorps tyrokinase récepteur musculo - squelettique
Le THOP1Souris recombinantesLe THOP1Les protéinesprotéines
S100Protéines liant le calcium(S100)Protéines recombinantesProtéine de liaison au calcium recombinante S100 (S100)
KLRK1Personnes reconstituéesNKG2D / CD314Les protéines(aa 78-216, SonÉtiquettes) Protéines
DSC2 protéine humainePersonnes reconstituéesDSC2 / Desmocolline-2Les protéines
EPCAM protéine CynomolgusSinge Cynomolgus reconstituéEpCAM / TROP-1 / TACSTD1Les protéines
Défensine bêta103B(DEF)bêta103B)Protéines recombinantesDéfensine recombinante bêta 103B (DEFB103B)
DSC2 protéine humainePersonnes reconstituéesDSC2 / Desmocolline-2Les protéines
FIGFSouris recombinantesVEGF-D / VEGFD / FIGFLes protéinesprotéines
IGFBP1 protéine CynomolgusSinge Cynomolgus reconstituéIGFBP1Les protéines
BIRC5Personnes reconstituéesSurvivin / BIRC5 / API4Les protéinesprotéines
Cellules musculaires lisses de l'artère pulmonaire de pouletLaminine de rat/Platine laminaire(LN)Kit, nom anglais:Kit ELISA LN
N-acétyl-séryl-aspayl -- lysyl-proline de souris (AcSDKSourisN-Acétyle-Silanoyl-Aspartyle-Lisinoyle-Prol(AcSDK)
ELISADouble chaîne de sourisADN (dsDNA de souris) Sous - assemblage importé
CLIAKitforLC1(Humanai-heparcytosolaibodytype1)ELISAKitCytoplasme anti - hépatocytaire humain1Type d'anticorps
Type universelvraiToxines E. coli Shigella toxine-1(VTEC-Shigatoxine1)Kits de réactifs20Une fois
ELISAKitBVLe singeBLe virus
Conditions de culture des cellules primaires:
I. culture de cellules plaquées au repos (y compris la culture de cellules semi - plaquées)
1, les cellules doivent être rincées suffisamment pour éliminer la toxicité des sucs digestifs autant que possible;
2, les cellules sont ensemencées à une concentration légèrement supérieure, au moins 5 × 108 cellules / l;
Le milieu peut être cultivé par Eagle (MEM Corning 10 - 010 - CVR) ou dmem (Corning 10 - 013 - CVR);
4, concentration de sérum de veau foetal de 10% - 80%
5, doit être cultivé dans un incubateur à 37 ℃ 5% de CO2;
6, minimiser les oscillations dans les 2 premiers jours pour empêcher les cellules fraîchement collées de tomber, flotter;
7, à l'extension de la paroi de base des cellules et la formation progressive d'un réticule, les cellules primaires doivent être changées en liquide;
8, lorsque les cellules en suspension dans la moelle osseuse ou le sang périphérique sont cultivées au repos pendant 1 semaine, la suspension cellulaire doit être changée après centrifugation à faible vitesse.
II. Culture de cellules en suspension
1. Essayez d'éliminer les globules rouges lors de la culture primaire;
2, culture à court terme, qui peut être effectuée dans du milieu rpmi1640 contenant 10% de sérum de veau;
3, la concentration cellulaire peut être dans la gamme 5 - 8 × 109 / L, pour le test de flacon divisé;
4, lors de la culture à long terme, les lymphocytes doivent ajouter des facteurs de croissance, les cellules leucémiques doivent ajouter une petite quantité de sérum du patient original pour favoriser la croissance cellulaire;
5, l'échange de cellules nécessite généralement un changement de moitié tous les 3 jours;
6, le passage des cellules est généralement effectué lorsque la prolifération cellulaire est accélérée et la densité cellulaire élevée