Cellules endothéliales aortiques porcines

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Nom du produit:Cellules endothéliales aortiques porcines

Sources organisationnelles:Tissu aortique

Spécifications du produit:5×105 cellules/T25Flacon de culture cellulaire

Information sur la culture:

Le paquet est conditionnéPLL(0,1 mg/ml), gélatine (0,1%) et

Le milieu de culture contientFBSAdditifs de croissance,pénicillineEt,Streptomycineattendre

Fréquence de changement de liquide par2 - 3Changement de liquide une fois par jour

Caractéristiques de croissance Wall

Morphologie cellulaire endothélial cellulaire like

Caractéristiques de passage transmissible2 - 3Génération

Liquide digestif0,25%

Conditions de culture phase gazeuse: air,95%;CO2，5%

Introduction aux cellules:

Séparation endothéliale aortique porcine du tissu artériel autonome; L'aorte est l'épine dorsale artérielle de la circulation corporelle. Son chemin de fonctionnement est: l'aorte ascendante commence dans le ventricule gauche, à droite2Le déplacement en hauteur de l'articulation thoraco - costale se comporte comme un arc aortique, la rangée de l'arc vers la gauche vers l'arrière4Le déplacement du bord inférieur du corps vertébral thoracique abaisse l'aorte; Dans la12Le diaphragme aortique percé en hauteur du corps vertébral thoracique se déplace vers l'aorte abdominale, au - dessus de l'aorte thoracique, à la4Hypostome lombaire divisé en artères iliaques totales gauche et droite; L'artère iliaque totale est divisée en artères iliaques internes et externes au niveau de l'articulation sacro - iliaque. Les cellules endothéliales aortiques sont des cellules monocouches qui recouvrent la face interne de l'aorte et peuvent sécréter une série de substances vasoactives tout en maintenant l'homéostasie vasculaire lorsqu'elles sont stimulées par une inflammation ou d'autres facteurs après la destruction de l'homéostasie, ce qui entraîne l'apparition de certaines maladies cardiovasculaires. Ainsi, les cellules endothéliales aortiques sont devenues un outil pour étudier la pathogenèse des maladies cardiovasculaires et les médicaments thérapeutiques. Les cellules endothéliales, ou endothélium vasculaire, sont une couche mince de cellules épithéliales spécialisées constituées d'une couche de cellules plates. Il forme la paroi interne des vaisseaux sanguins et sert d'interface entre le sang et d'autres parois vasculaires (épithélium squameux monocouche) dans la cavité vasculaire. Les cellules endothéliales sont microvasculaires le long de tout le système circulatoire, du cœur au plus petit.

Introduction à la méthode:

Entreprise laboratoire isolé aortique porcine endothélium adoption-La méthode de digestion combinée de collagénase combine la méthode d'application différentielle et est préparée par criblage de culture de milieu spécifique pour les cellules endothéliales, la quantité totale de cellules est d'environ5×10?cellules/La bouteille.

Détection de qualité:

Entreprise laboratoire endothélium aortique porcin isoléCD31Identification par immunofluorescence, pureté possible90%Ci - dessus et ne contient pasVIH-1Et,HBVEt,VHC, mycoplasmes, bactéries, levures et champignons, etc.

Étapes de culture:

I. cellules réanimées: décongeler le lyseur contenant 1 ml de suspension cellulaire en agitant rapidement dans un bain - Marie à 37 ° C, ajouter 5 ml de milieu de culture et bien mélanger. Centrifuger 5 min à 1000 RPM, éliminer le surnageant et bien souffler après addition de 4 - 6 ml de milieu. Toutes les suspensions cellulaires sont ensuite ajoutées au flacon de culture pour une nuit de culture (ou la suspension cellulaire est ajoutée à une boîte de 6 cm) et incubées pendant la nuit. Changez de liquide le lendemain et vérifiez la densité cellulaire.

II. Passage cellulaire: si la densité cellulaire atteint 80% - 90%, la culture de passage peut être effectuée.

a）、 Pour les cellules adhérentes, le passage peut se référer aux méthodes suivantes:

1. Jeter le surnageant de culture et laver les cellules 1 - 2 fois avec du PBS sans ions calcium et magnésium.

Ajouter 1 - 2 ml de digestat (0,25% Trypsin - 0,53 mm EDTA) dans un flacon de culture, placer dans un incubateur à 37 ° C pour digérer pendant 1 - 2 min, puis observer la digestion des cellules sous un microscope, si la plupart des cellules deviennent rondes et tombent, rapidement revenir à la table d'Opération, après quelques clics sur le flacon de culture ajouter 5 ml de milieu de culture contenant 10% de sérum pour terminer la digestion.

3. Soufflez doucement les cellules, aspirez après la chute, centrifugez à 1000 RPM pendant 8 - 10 minutes, jetez le surnageant, ajoutez 1 - 2 ml de solution de culture et soufflez bien.

4. Compléter la solution de culture par 5 - 6 ml / flacon et distribuer la suspension cellulaire dans un rapport de 1: 2 dans de nouvelles boîtes ou des flacons contenant 5 - 6 ml de solution de culture.

b）、 Pour les cellules en suspension, le passage peut se référer aux méthodes suivantes:

Méthode 1: les cellules sont collectées, centrifugées pendant 8 - 10 minutes à 1000 RPM, le surnageant est jeté, soufflé après l'addition supplémentaire de 1 - 2 ml de la solution de culture, la suspension cellulaire est divisée dans de nouvelles boîtes ou des bouteilles neuves contenant 8 ml de milieu dans un rapport de 1: 2 à 1: 5.

Méthode 2: la moitié de la solution peut être choisie, après avoir abandonné la moitié du milieu, les cellules restantes sont suspendues et la suspension cellulaire est divisée dans une nouvelle boîte de 8 ml de milieu ou dans un flacon dans un rapport de 1: 2 à 1: 3.

Comment sont traitées les cellules reçues?

1, tout d'abord, observez si le flacon de culture cellulaire est en bon état, si le liquide de culture a des fuites, des troubles et d'autres phénomènes. Si vous en avez, prenez des photos et contactez rapidement le support technique (les photos prises serviront de base au service de suivi).

2, essuyez la surface du flacon de culture cellulaire avec de l'alcool à 75%, observez l'état des cellules au microscope. En raison de problèmes de transport, une partie des cellules plaquées aura une petite quantité de tomber de la paroi de la bouteille; Ne pas ouvrir le bouchon du flacon de culture d'abord, placez les cellules dans un incubateur cellulaire et laissez - les incuber pendant 2 - 4 heures afin de stabiliser l'état cellulaire.

3, lisez attentivement les instructions cellulaires pour comprendre les informations relatives aux cellules, telles que les caractéristiques de l'application (application / suspension), la morphologie cellulaire, le milieu de base utilisé, la proportion de sérum, les Cytokines requises, la proportion de passage, la fréquence de changement de liquide, etc.

4, après l'achèvement du repos, retirer le flacon de culture cellulaire, la microscopie, prendre des photos, enregistrer l'état des cellules (les photos prises serviront de base pour le service ultérieur); Il est recommandé de prendre régulièrement des photos et d'enregistrer l'état de croissance cellulaire après la culture de passage cellulaire.

5, cellules plaquées: si la densité de croissance cellulaire est supérieure à 80%, elle peut être transmise normalement; Si ce n'est pas plus de 80%, retirez le milieu de culture cellulaire dans le flacon, Réservez environ 5 ML pour poursuivre la culture jusqu'à ce que la densité cellulaire soit d'environ 80%, puis effectuez le passage, le bouchon peut être légèrement dévissé.

6, cellules en suspension: Transférez tout le liquide dans le flacon de culture cellulaire dans un tube de centrifugation stérile de 50 ml, centrifugez à 1200 RPM pendant 5 min, après centrifugation, le milieu de culture peut être collecté en réserve, la précipitation des cellules à la base du tube est ajoutée à 5 ml de milieu de Culture soufflé, remis en suspension. Lors de la microscopie, si la densité cellulaire est supérieure à 80%, la suspension cellulaire peut être cultivée dans 2 flacons de culture cellulaire, en ajoutant du milieu de culture à 5 ml; si la densité cellulaire n'est pas supérieure à 80%, la suspension cellulaire peut être déplacée dans le flacon d'origine pour continuer la Culture jusqu'à ce que la densité cellulaire soit d'environ 80%, puis la manipulation de passage.

Produits vendus par la société:

Souris(CH)Kits de réactifs 96T/48T

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Activation des molécules inductricesCD69Anticorps

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érythrine du cerveau(NGB)Protéines recombinantesNeuroglobine recombinante (NGB)

ADPRHPersonnes reconstituéesADPRH / ARH1Les protéinesprotéines

protéine EGF humainPersonnes reconstituéesEGF / Facteur de croissance épidermiqueLes protéines

protéine HA H7N9Grippe A recombinanteH7N9 (A/Anhui/1/2013)Hémagglutinine(hémagglutinine / HA)Les protéines

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