Cellules graisseuses porcines

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Nom du produit:Cellules graisseuses porcines

Sources organisationnelles:Le tissu adipeux

Spécifications du produit:5×105 cellules/T25Flacon de culture cellulaire

Information sur la culture:

Le milieu de culture contientFBSAdditifs de croissance,pénicillineEt,Streptomycineattendre

Fréquence de changement de liquide par2 - 3Changement de liquide une fois par jour

Caractéristiques de croissance Wall

Forme cellulaire fusiforme, polygonale

Les propriétés de passage appartiennent aux cellules différenciées terminales; Appartient à une population de cellules non prolifératives

Liquide digestif0,25%

Conditions de culture phase gazeuse: air,95%;CO2，5%

Introduction aux cellules:

La graisse de porc est isolée du tissu adipeux; Le tissu adipeux est principalement constitué d'un grand nombre d'amas de cellules adipeuses, les cellules adipeuses regroupées en amas étant séparées en folioles par une fine couche de tissu conjonctif lâche; La graisse stockée, qui se décompose rapidement en glycérine et en acides gras au besoin, est transportée dans le sang vers les tissus pour être utilisée. Ils affectent la sensibilité à l'insuline, les niveaux de pression artérielle, la fonction endothéliale, l'activité fibrinolytique et la réponse inflammatoire et sont impliqués dans de nombreux processus physiopathologiques importants; Le tissu adipeux est devenu un système endocrinien extrêmement important simplement en tant qu'organe de stockage d'énergie. Les Adipocytes sont divisés en Adipocytes blancs et en Adipocytes bruns (Brun), souvent blancs, qui prolifèrent abondamment dans la petite enfance et atteignent leur nombre à la puberté, après quoi leur nombre n'augmente généralement plus. À l'intérieur des cellules se trouvent de nombreuses vésicules riches en graisses, appelées vésicules lipidiques, riches en Réticulum endoplasmique photonique. En outre, il existe un type de cellule adipeuse brune dans le corps animal, principalement entre les omoplates, le cou et le dos, les aisselles, le médiastin et autour des reins, qui contient une graisse brune fortement rétractée, qui agit de décomposer les lipides en thermogenèse et de réguler la proportion de lipides dans le corps.

Introduction à la méthode:

La graisse de porc isolée dans le laboratoire de la société est préparée par la méthode digestive, la quantité totale de cellules est d'environ5×10?cellules/La bouteille.

Détection de qualité:

Entreprise laboratoire graisse porcine isolée rouge huiléODétection de teinture, la pureté peut atteindre90%Ci - dessus et ne contient pasVIH-1Et,HBVEt,VHC, mycoplasmes, bactéries, levures et champignons, etc.

Étapes de culture:

I. cellules réanimées: décongeler le lyseur contenant 1 ml de suspension cellulaire en agitant rapidement dans un bain - Marie à 37 ° C, ajouter 5 ml de milieu de culture et bien mélanger. Centrifuger 5 min à 1000 RPM, éliminer le surnageant et bien souffler après addition de 4 - 6 ml de milieu. Toutes les suspensions cellulaires sont ensuite ajoutées au flacon de culture pour une nuit de culture (ou la suspension cellulaire est ajoutée à une boîte de 6 cm) et incubées pendant la nuit. Changez de liquide le lendemain et vérifiez la densité cellulaire.

II. Passage cellulaire: si la densité cellulaire atteint 80% - 90%, la culture de passage peut être effectuée.

a）、 Pour les cellules adhérentes, le passage peut se référer aux méthodes suivantes:

1. Jeter le surnageant de culture et laver les cellules 1 - 2 fois avec du PBS sans ions calcium et magnésium.

Ajouter 1 - 2 ml de digestat (0,25% Trypsin - 0,53 mm EDTA) dans un flacon de culture, placer dans un incubateur à 37 ° C pour digérer pendant 1 - 2 min, puis observer la digestion des cellules sous un microscope, si la plupart des cellules deviennent rondes et tombent, rapidement revenir à la table d'Opération, après quelques clics sur le flacon de culture ajouter 5 ml de milieu de culture contenant 10% de sérum pour terminer la digestion.

3. Soufflez doucement les cellules, aspirez après la chute, centrifugez à 1000 RPM pendant 8 - 10 minutes, jetez le surnageant, ajoutez 1 - 2 ml de solution de culture et soufflez bien.

4. Compléter la solution de culture par 5 - 6 ml / flacon et distribuer la suspension cellulaire dans un rapport de 1: 2 dans de nouvelles boîtes ou des flacons contenant 5 - 6 ml de solution de culture.

b）、 Pour les cellules en suspension, le passage peut se référer aux méthodes suivantes:

Méthode 1: les cellules sont collectées, centrifugées pendant 8 - 10 minutes à 1000 RPM, le surnageant est jeté, soufflé après l'addition supplémentaire de 1 - 2 ml de la solution de culture, la suspension cellulaire est divisée dans de nouvelles boîtes ou des bouteilles neuves contenant 8 ml de milieu dans un rapport de 1: 2 à 1: 5.

Méthode 2: la moitié de la solution peut être choisie, après avoir abandonné la moitié du milieu, les cellules restantes sont suspendues et la suspension cellulaire est divisée dans une nouvelle boîte de 8 ml de milieu ou dans un flacon dans un rapport de 1: 2 à 1: 3.
Produits vendus par la société:

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CD38Lapin reconstituéSCARB3Les protéinesprotéines

NTN (neurodendrine 0,5 mgntn)Facteurs de croissance nerveuse(Antigènes) et

Le MEP1APersonnes reconstituéesMEP1A / PPHALes protéinesprotéines

DPYS protéine humainePersonnes reconstituéesDPYS / DihydropyrimidinaseLes protéines(Sa & GSTÉtiquettes) et

Souris protéine KLK1Souris recombinantesKLK1 / Kallikrein 1Les protéines

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Cellules graisseuses porcinesSous - unité gamma de la laminine de rat-2(LAMC2)Kit, nom anglais:Kit ELISA LAMC2

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Type universelRFLPKits d'analyse génétique20Une fois

Elisakiven -Alpha interféron alpha singe

Comment sont traitées les cellules reçues?

1, tout d'abord, observez si le flacon de culture cellulaire est en bon état, si le liquide de culture a des fuites, des troubles et d'autres phénomènes. Si vous en avez, prenez des photos et contactez rapidement le support technique (les photos prises serviront de base au service de suivi).

2, essuyez la surface du flacon de culture cellulaire avec de l'alcool à 75%, observez l'état des cellules au microscope. En raison de problèmes de transport, une partie des cellules plaquées aura une petite quantité de tomber de la paroi de la bouteille; Ne pas ouvrir le bouchon du flacon de culture d'abord, placez les cellules dans un incubateur cellulaire et laissez - les incuber pendant 2 - 4 heures afin de stabiliser l'état cellulaire.

3, lisez attentivement les instructions cellulaires pour comprendre les informations relatives aux cellules, telles que les caractéristiques de l'application (application / suspension), la morphologie cellulaire, le milieu de base utilisé, la proportion de sérum, les Cytokines requises, la proportion de passage, la fréquence de changement de liquide, etc.

4, après l'achèvement du repos, retirer le flacon de culture cellulaire, la microscopie, prendre des photos, enregistrer l'état des cellules (les photos prises serviront de base pour le service ultérieur); Il est recommandé de prendre régulièrement des photos et d'enregistrer l'état de croissance cellulaire après la culture de passage cellulaire.

5, cellules plaquées: si la densité de croissance cellulaire est supérieure à 80%, elle peut être transmise normalement; Si ce n'est pas plus de 80%, retirez le milieu de culture cellulaire dans le flacon, Réservez environ 5 ML pour poursuivre la culture jusqu'à ce que la densité cellulaire soit d'environ 80%, puis effectuez le passage, le bouchon peut être légèrement dévissé.

6, cellules en suspension: Transférez tout le liquide dans le flacon de culture cellulaire dans un tube de centrifugation stérile de 50 ml, centrifugez à 1200 RPM pendant 5 min, après centrifugation, le milieu de culture peut être collecté en réserve, la précipitation des cellules à la base du tube est ajoutée à 5 ml de milieu de Culture soufflé, remis en suspension. Lors de la microscopie, si la densité cellulaire est supérieure à 80%, la suspension cellulaire peut être cultivée dans 2 flacons de culture cellulaire, en ajoutant du milieu de culture à 5 ml; si la densité cellulaire n'est pas supérieure à 80%, la suspension cellulaire peut être déplacée dans le flacon d'origine pour continuer la Culture jusqu'à ce que la densité cellulaire soit d'environ 80%, puis la manipulation de passage.