Cellules souches mésenchymateuses de moelle osseuse porcine

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Nom du produit:Cellules souches mésenchymateuses de moelle osseuse porcine

Sources organisationnelles:moelle osseuse

Spécifications du produit:5×105 cellules/T25Flacon de culture cellulaire

Information sur la culture:

Le milieu de culture contientFBSAdditifs de croissance,pénicillineEt,Streptomycineattendre

Fréquence de changement de liquide par2 - 3Changement de liquide une fois par jour

Caractéristiques de croissance Wall

Morphologie cellulaire fibroblastes like

Caractéristiques de passage transmissible5Génération ou génération;3Excellent état dans la génération

Liquide digestif0,25%

Conditions de culture phase gazeuse: air,95%;CO2，5%

Introduction aux cellules:

Moelle osseuse porcine sèche mésenchymateuse(BMSC), séparés de la moelle osseuse; La moelle osseuse est le tissu hématopoïétique de l'organisme, situé à l'intérieur de nombreux os du corps. La moelle osseuse des animaux adultes est divisée en deux types: Rouge et jaune. La moelle osseuse rouge produit des globules rouges, des plaquettes et divers globules blancs. Les plaquettes ont un effet hémostatique, les globules blancs peuvent tuer et inhiber divers agents pathogènes, y compris les bactéries, les virus, etc.; Certains lymphocytes sont capables de fabriquer des anticorps. Ainsi, la moelle osseuse n'est pas seulement un organe hématopoïétique, c'est aussi un organe immunitaire important. La moelle osseuse, l'œil réticulaire qui existe entre la cavité médullaire des os longs (par exemple, l'humérus, le fémur) et le squelette pincé des os plats (par exemple, l'iliaque), est un tissu spongieux qui produit la moelle osseuse légèrement rougeâtre des cellules sanguines, appelée moelle rouge. À la naissance, la moelle rouge remplit les cavités de la moelle osseuse dans tout le corps, avec l'âge, il y a une augmentation des cellules graisseuses, une partie importante de la moelle rouge est remplacée par la moelle jaune et enfin, presque seulement la moelle osseuse plate a de la moelle rouge dans les cavités de la moelle osseuse. Les cellules souches mésenchymateuses de la moelle osseuse présentes dans le système stromal de la moelle osseuse sont des cellules souches autres que les cellules souches hématopoïétiques, qui ont une capacité élevée d'auto - renouvellement et un potentiel de différenciation multidirectionnelle, qui peuvent se différencier dans une variété de tissus tels que l'os, le cartilage, le tissu musculaire, la peau, la graisse, les nerfs, etc., et peuvent donc servir de cellules semences en génie tissulaire. Dans la moelle osseuse,BMSCReprésentant le nombre total de cellules nucléées de la moelle osseuse0001% - 0,1%Le contenu est extrêmement faible. Les conditions de culture in vitro des cellules souches mésenchymateuses de la moelle osseuse sont plus exigeantes, au cours de la culture, le temps d'application, la densité de plantation, la teneur en sérum, la température de culture et le milieu de cultureLe pHEffet de conditions telles que la valeur.

Introduction à la méthode:

Les souches mésenchymateuses de moelle osseuse porcine isolées dans le laboratoire de la société ont été préparées en utilisant la moelle osseuse rincée, la centrifugation à gradient de densité, la méthode d'application différentielle combinée au criblage du milieu de culture, la quantité totale de cellules est d'environ5×10?cellules/La bouteille.

Détection de qualité:

Entreprise laboratoire myélome mésenchymateuse de porc isoléeCD90Identification par immunofluorescence, pureté possible90%Ci - dessus et ne contient pasVIH-1Et,HBVEt,VHC, mycoplasmes, bactéries, levures et champignons, etc.

Étapes de culture:

I. cellules réanimées: décongeler le lyseur contenant 1 ml de suspension cellulaire en agitant rapidement dans un bain - Marie à 37 ° C, ajouter 5 ml de milieu de culture et bien mélanger. Centrifuger 5 min à 1000 RPM, éliminer le surnageant et bien souffler après addition de 4 - 6 ml de milieu. Toutes les suspensions cellulaires sont ensuite ajoutées au flacon de culture pour une nuit de culture (ou la suspension cellulaire est ajoutée à une boîte de 6 cm) et incubées pendant la nuit. Changez de liquide le lendemain et vérifiez la densité cellulaire.

II. Passage cellulaire: si la densité cellulaire atteint 80% - 90%, la culture de passage peut être effectuée.

a）、 Pour les cellules adhérentes, le passage peut se référer aux méthodes suivantes:

1. Jeter le surnageant de culture et laver les cellules 1 - 2 fois avec du PBS sans ions calcium et magnésium.

Ajouter 1 - 2 ml de digestat (0,25% Trypsin - 0,53 mm EDTA) dans un flacon de culture, placer dans un incubateur à 37 ° C pour digérer pendant 1 - 2 min, puis observer la digestion des cellules sous un microscope, si la plupart des cellules deviennent rondes et tombent, rapidement revenir à la table d'Opération, après quelques clics sur le flacon de culture ajouter 5 ml de milieu de culture contenant 10% de sérum pour terminer la digestion.

3. Soufflez doucement les cellules, aspirez après la chute, centrifugez à 1000 RPM pendant 8 - 10 minutes, jetez le surnageant, ajoutez 1 - 2 ml de solution de culture et soufflez bien.

4. Compléter la solution de culture par 5 - 6 ml / flacon et distribuer la suspension cellulaire dans un rapport de 1: 2 dans de nouvelles boîtes ou des flacons contenant 5 - 6 ml de solution de culture.

b）、 Pour les cellules en suspension, le passage peut se référer aux méthodes suivantes:

Méthode 1: les cellules sont collectées, centrifugées pendant 8 - 10 minutes à 1000 RPM, le surnageant est jeté, soufflé après l'addition supplémentaire de 1 - 2 ml de la solution de culture, la suspension cellulaire est divisée dans de nouvelles boîtes ou des bouteilles neuves contenant 8 ml de milieu dans un rapport de 1: 2 à 1: 5.

Méthode 2: la moitié de la solution peut être choisie, après avoir abandonné la moitié du milieu, les cellules restantes sont suspendues et la suspension cellulaire est divisée dans une nouvelle boîte de 8 ml de milieu ou dans un flacon dans un rapport de 1: 2 à 1: 3.

Comment sont traitées les cellules reçues?

1, tout d'abord, observez si le flacon de culture cellulaire est en bon état, si le liquide de culture a des fuites, des troubles et d'autres phénomènes. Si vous en avez, prenez des photos et contactez rapidement le support technique (les photos prises serviront de base au service de suivi).

2, essuyez la surface du flacon de culture cellulaire avec de l'alcool à 75%, observez l'état des cellules au microscope. En raison de problèmes de transport, une partie des cellules plaquées aura une petite quantité de tomber de la paroi de la bouteille; Ne pas ouvrir le bouchon du flacon de culture d'abord, placez les cellules dans un incubateur cellulaire et laissez - les incuber pendant 2 - 4 heures afin de stabiliser l'état cellulaire.

3, lisez attentivement les instructions cellulaires pour comprendre les informations relatives aux cellules, telles que les caractéristiques de l'application (application / suspension), la morphologie cellulaire, le milieu de base utilisé, la proportion de sérum, les Cytokines requises, la proportion de passage, la fréquence de changement de liquide, etc.

4, après l'achèvement du repos, retirer le flacon de culture cellulaire, la microscopie, prendre des photos, enregistrer l'état des cellules (les photos prises serviront de base pour le service ultérieur); Il est recommandé de prendre régulièrement des photos et d'enregistrer l'état de croissance cellulaire après la culture de passage cellulaire.

5, cellules plaquées: si la densité de croissance cellulaire est supérieure à 80%, elle peut être transmise normalement; Si ce n'est pas plus de 80%, retirez le milieu de culture cellulaire dans le flacon, Réservez environ 5 ML pour poursuivre la culture jusqu'à ce que la densité cellulaire soit d'environ 80%, puis effectuez le passage, le bouchon peut être légèrement dévissé.

6, cellules en suspension: Transférez tout le liquide dans le flacon de culture cellulaire dans un tube de centrifugation stérile de 50 ml, centrifugez à 1200 RPM pendant 5 min, après centrifugation, le milieu de culture peut être collecté en réserve, la précipitation des cellules à la base du tube est ajoutée à 5 ml de milieu de Culture soufflé, remis en suspension. Lors de la microscopie, si la densité cellulaire est supérieure à 80%, la suspension cellulaire peut être cultivée dans 2 flacons de culture cellulaire, en ajoutant du milieu de culture à 5 ml; si la densité cellulaire n'est pas supérieure à 80%, la suspension cellulaire peut être déplacée dans le flacon d'origine pour continuer la Culture jusqu'à ce que la densité cellulaire soit d'environ 80%, puis la manipulation de passage.

Produits vendus par la société:

Complexe majeur d'histocompatibilité du cobaye(MHC / gpla) elisay Elisa. 96T/48T

Synthase de type endothélial de cobaye(eNOS)ELISAKit Elisa. 96T/48T

Peptides liés au gène de la Calcitonine de cobaye(CGRP) effacer Elisa. 96T/48T

Complexe plasmine anti - plasmine de cobaye(PAP) elisay Elisa. 96T/48T

Monoamine oxydase de sourisA(MAOA)Kits de réactifs96T/48T

Kit ELISA pour peptidoglycan humain (PG)Peptidoglycanes humains(PG)Kits de réactifs

Glycogénphosphorylase humaineMM, GP-MMELISAKitGlycogène humain0Isoenzymes acidifiantesMM(GP-MM)Kits de réactifs96T/48TSous - assemblage importé

Bactéricide humain/protéine croissante de perméabilité, BPIKit stérilité humaine/Protéines augmentant la perméabilité(BPI)Spécifications du kit:96T/48T

Kit de quantification colorimétrique de l'Amylose ramifiée végétale20Une fois

HumaGF-bêta-induisable léarlyresponsegène-1,TIEG1ELISAKitpersonneTGFGène précoce d'induction bêta1(TIEG1)Spécifications du kit:96T/48T

ORC5LAnticorps contre les protéines

Mélanome exprimant préférentiellement des anticorps antigéniques

EPHB1Singe Cynomolgus reconstituéEphB1 / EPHT2Les protéines(Fc)Étiquettes) Protéines

Récepteur d'insuline-Alpha (ISR-Alpha 0.5mgRécepteur d'insuline-Alpha (ISR-Alpha)Récepteurs d'insuline-α(Antigènes) et

HTRA2Personnes reconstituéesHTRA2 / OMILes protéinesprotéines

FKBP14 protéine humainePersonnes reconstituéesFKBP14Les protéines

Souris protéine FIGFSouris recombinantesVEGF-D / VEGFD / FIGFLes protéines(Fc)Étiquettes) et

Récepteur d'insuline-Alpha (ISR-Alpha 0.5mgRécepteur d'insuline-Alpha (ISR-Alpha)Récepteurs d'insuline-α(Antigènes) et

FKBP14 protéine humainePersonnes reconstituéesFKBP14Les protéines

EPHB1Singe Cynomolgus reconstituéEphB1 / EPHT2Les protéines(Fc)Étiquettes) Protéines

Souris protéine FIGFSouris recombinantesVEGF-D / VEGFD / FIGFLes protéines(Fc)Étiquettes) et

HTRA2Personnes reconstituéesHTRA2 / OMILes protéinesprotéines

Cellules souches mésenchymateuses de moelle osseuse porcineProtéine de choc thermique hypersensible de rat70 (HSP-70)Kit, nom anglais:Kit d'ELISA HSP-70

Kit ELISA de cadhérine E de souris / cadhérine épithéliale (E-Cad)SourisEProtéines adhésives calciques/Protéines épithéliales d'adhésion au calcium(E-Cad)Kits de réactifs

ELISASourisC-peptide(peptide C de souris) Sous - assemblage importé

Cliakildl Islande attractionComplexe immunologique de lipoprotéines de basse densité de rat

Type universelKSHV(KAPOSISARCOMA-HERPESVIRUS ASSOCIÉ)Kit de caractérisation virale20Une fois

Elisabeth nottan - 1Molécules solubles d'adhésion intercellulaire de singe1