Le principe du BCA est que les ions de cuivre bivalent, dans des conditions basiques, peuvent être réduits par des protéines en ions de cuivre monovalents, qui interagissent avec le BCA solution a (contenant du BCA) pour produire des réactions de couleur sensibles. Deux molécules de BCA chélatent un ion cuivre pour former un complexe réactif violet. Ce complexe soluble dans l'eau montre une forte absorption de lumière à 562 nm, avec une bonne relation linéaire entre l'Absorbance et la concentration en protéines sur une large gamme, de sorte que la concentration en protéines peut être extrapolée à partir des valeurs d'absorption de lumière.
Caractéristiques du produit:
- Les étapes sont simples, la détermination est effectuée en 45 minutes, ce qui est 4 fois plus rapide et plus pratique que la méthode classique de Lowry.
- La sensibilité est élevée, la limite inférieure de concentration de détection atteint 25 μg / ML, la quantité de petite protéine de détection zui atteint 0,5 μg et le volume d'échantillon à tester est de 1 à 20 μl.
- La méthode BCA pour déterminer la concentration en protéines n'est pas affectée par les produits chimiques tels que les agents de décontamination dans la grande majorité des échantillons et peut être compatible avec jusqu'à 5% de SDS, 5% de Triton X - 100, 5% de Tween 20, 60, 80 dans les échantillons.
- Il existe une bonne relation linéaire dans la gamme de concentrations de 20 à 2000 μg / ML.
- Le coefficient de variation pour la détection de différentes molécules de protéines est bien inférieur à celui de la quantification de la leucoplasmose de coomassie.