Nfkb (p65) surexpression de lignées cellulaires stables

Nfkb est composé de nfkb1 (P50), nfkb2 (p52), RELA (p65), relb, et C - rel (REL) 5 homogènes et hétérodimères de la famille rel. Le dimère principal RELA (p65) / P50 est libre dans la matrice cytoplasmique non stimulée par les ikbs. L'induction du signal provoque la dissociation et la dégradation de l'IKB et active le complexe nfkb. Le complexe nfkb activé est transféré au noyau, se lie au motif de liaison à l'ADN KB, puis initie la transcription du gène cible. Nfkb joue un rôle important dans de nombreux processus biologiques tels que la différenciation, la prolifération et l'apoptose. Le dysfonctionnement de nfkb peut causer de nombreuses maladies telles que l'inflammation et le cancer. La lignée cellulaire Cos - 7 stabilisée par surexpression nfkb (p65) de signosis peut être utilisée efficacement pour étudier la voie nfkb.
A. avantages:
Stabilisation continue – la protéine p65 de type sauvage est exprimée de manière stable dans les cellules et évite les différences de test;
Gain de temps – les lignées cellulaires peuvent être utilisées pour étudier la voie de signalisation p65;
B. principe:
La lignée cellulaire a été établie par transfection du vecteur d'expression de l'étiquette nfkb (p65) CMV myc. Ce vecteur d'expression porte un marqueur de criblage à l'hygromycine, criblage à l'hygromycine, criblage des clones résistants à l'hygromycine, criblage de l'expression des marqueurs nfkb (p65) et myc, sélection des clones à haute expression, multiplication en lignées cellulaires.