EV-Save™ Stabilisateur de la conservation des vésicules extracellulaires (pour TFF)

EV-Save™Stabilisateur de la conservation des vésicules extracellulaires (pour TFF)

La filtration à flux tangentiel (TFF) est utilisée comme méthode hautement efficace pour la concentration de vésicules extracellulaires (ve) et le déplacement de tampon. Le TFF réduit autant que possible la perte d'échantillon en empêchant l'accumulation d'échantillons sur la membrane filtrante en l'écoulant parallèlement à la membrane filtrante. En outre, les échantillons facilement adsorbables tels que EV peuvent être récupérés moins en raison des contraintes physiques dans les opérations d'adsorption membranaire et de filtration.

EV-Save ™ Les stabilisateurs extracellulaires de conservation des vésicules (pour TFF) sont conçus pour améliorer la récupération des ve en atténuant les contraintes physiques lors du traitement de TFF ainsi que l'adsorption de la membrane. L'utilisation de ce produit permet un recyclage efficace et stable de l'EV.

◆ caractéristiques

● inhibition des lésions ev et de l'adsorption de la membrane filtrante par EV lors de la purification ev, de la concentration et du déplacement du tampon à l'aide de TFF

●Facile à utiliser, il suffit d'ajouter ce produit et le tampon d'équilibrage à l'échantillon

●Ce produit prévient la perte d'EV due à l'adsorption sur le tube à essai et prévient les dommages de gel - dégel, la solution EV filtrée (TFF) peut être conservée directement.

(Remarque: cet effet ne peut être obtenu qu'en ajoutant ce produit lors de l'échange de tampon)

◆ échantillon recommandé

●Ev purifié

●Culture cellulaire supérieure

L'effet anti - adsorbant peut être réduit dans les échantillons à haute teneur en sérum, plasma et substances perturbatrices

◆ module TFF recommandé

Microkros mpes 100 kDa (repligen, numéro d'usine: C02 - E100 - 05 - n)

Il a été confirmé que les modules suivants peuvent être utilisés:

●Pellicon XL UF Mod Biomax 100 kD 0,005m2 (Millipore)

●Découvrez à usage unique 12" 100 kD 0,5 mm (Sartorius)

Veuillez noter que les modules suivants ne sont pas disponibles:

●Capsules TFF minimales avec membrane Omega - 100K (Cytiva)

●TFF-Easy - concentrateur EV à filtration tangentielle (HansaBio)

◆ données

Données de performance

▼ amélioration de la récupération des EV purifiés lors du déplacement du tampon

Utilisation de massivev ™ Ev purification column PS (numéro de produit: 131 - 19491) Purifie EV à partir d'un surnageant de culture cellulaire de cellules souches mésenchymateuses dérivées de moelle osseuse (bmmsc) et de cellules souches mésenchymateuses dérivées de tissu adipeux (admsc) puis, en utilisant le système TFF de repligen, le tampon HBs additionné au 1 / 100 de la quantité de ce produit est remplacé pour l'échange de tampon. Avec PS capture ™ Kit ELISA exosomal (Streptavidine HRP) (référence 298 - 80601, anticorps de détection utilisant des anticorps anti - cd63 ou anti - cd81), évaluation de la récupération EV après déplacement du tampon. ， La distribution granulométrique des particules EV est détectée par Nanoparticle Tracking Analysis (NTA).

1) L'ELISA

[résultats]

En ajoutant ce produit, on peut observer une récupération élevée de EV dans le tampon de déplacement à base de TFF.

2) NTA

[résultats]

Après l'ajout de ce produit, on n'observe pas de changement notable dans la distribution granulométrique des particules EV purifiées.

▼ amélioration de la récupération des EV purifiés à partir du surnageant de culture cellulaire à base de TFF

Le surnageant de culture cellulaire a été concentré 20 fois à l'aide de TFF, puis déplacé avec 100 fois le tampon. Ce produit est ajouté au surnageant de culture cellulaire et au tampon de déplacement à raison de 1 / 100. Le taux de récupération des EV a été détecté à l'aide de kits ELISA pour cd63 et cd81 et la distribution de la taille des particules EV a été détectée à l'aide de Nanoparticle Tracking Analysis (NTA).

(1) ELISA

[résultats]

En ajoutant ce produit, on peut observer une amélioration de la récupération des EV purifiés à partir du surnageant cellulaire.

2) NTA

[résultats]

Après l'ajout de ce produit, aucun changement significatif n'a été observé dans la distribution de la taille des particules de EV.

▼ effet purifié d'inhibition de l'adsorption ev et de cryoprotection

(1) effet inhibiteur d'adsorption

Év - Save séparément ™ Stabilisateur de conservation des vésicules extracellulaires (numéro de produit: 058 - 09261, ci - dessous « produits conventionnels») et Ev - Save ™ Un stabilisant de conservation des vésicules extracellulaires (pour TFF) (ci - après dénommé "ce produit") est ajouté à la solution EV purifiée à raison de 1 / 100. Après cela, transférer dans le Microtube et conserver pendant 48 heures. La teneur en EV est détectée à l'aide de kits ELISA pour cd63 et cd81.

(2) effet de cryoprotection

L'EV est purifié à partir d'un surnageant de culture de cellules souches mésenchymateuses dérivées de moelle osseuse (bmmsc) à l'aide de TFF. Ce produit est ajouté à la solution EV purifiée à raison de 1 / 100 puis soumis à 3 séances de gel - dégel (de - 20°C à température ambiante). La teneur en EV avant et après Gel - dégel est détectée à l'aide de kits ELISA pour cd63 et cd81.

[résultats]

Ce produit a un effet inhibiteur d'adsorption et un effet cryoprotecteur, idéal pour la conservation EV.

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Par modification polymérique, on entend que lorsque le gel de silice est ODS, les agents silylants multifonctionnels sont polymérisés les uns avec les autres, ou qu'un agent silylant unique est lié à plusieurs endroits au gel de silice pour former la structure d'une couche à base d'octadécane de haute densité.

< modification monomère >

< modification polymère >

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Mise à jour: 2025 / 8 / 18

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