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ADN terminal plat plus a Kit T4 principe vecteur et autres

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Vue d'ensemble

Les produits de PCR amplifiés par des ADN polymérases haute fidélité ayant une activité exonérase 3 '→ 5', telles que Pfu, hifi, vent ou kod, sont des fragments d'ADN terminaux plats sans queue A. si ce fragment d'ADN terminal plat nécessite une ligation avec le vecteur T, il est nécessaire d'utiliser d'abord la Taq DNA polymérase après le fragment terminal plat plus la queue a avant de pouvoir se ligaturer de manière complémentaire avec la tête T du vecteur T. Ce kit fournit tous les ingrédients nécessaires pour ajouter une queue a et peut compléter l'ensemble du processus en environ 20 minutes. $R $N ADN terminal plat plus a Kit T4 principe vecteur et autres

Détails du produit

NoboladeADN terminal plat plus a Kit T4 principe vecteur et autres


Kit ADN terminal plat plus a

Numéro de catalogue:42016

Composition du kit, stockage, stabilité:

composition

25 fois (42016 - 25)

50 fois (42016 - 50)

Taq ADN polymérase

25ml

50ml

10 x tampon A-tailing

25ml

50ml

mélange dATP

25ml

50ml

Stockage: - 20 ° C de conservation.


Introduction du produit:

ParPfuEt,HiFi、 Les produits de PCR amplifiés par des ADN polymérases haute fidélité à activité exonérase 3 '5', tels que vent ou kod, sont des fragments d'ADN plats terminaux sans queue A. si ce fragment d'ADN plats terminaux doit être ligaturé avec le vecteur T, il est nécessaire d'utiliser d'abord la Taq DNA polymérase après les fragments plats terminaux plus la queue a avant de pouvoir se ligaturer de manière complémentaire avec la tête T du vecteur T. Ce kit fournit tous les ingrédients nécessaires pour ajouter une queue a et peut compléter l'ensemble du processus en environ 20 minutes.

Étapes opérationnelles:

1. Les produits de PCR plats - terminaux sont nettoyés par PCR (sans amplification non spécifique) ou purifiés par récupération de colle (avec amplification non spécifique).

2. Les fragments d'ADN terminaux plats purifiés sont additionnés d'une queue a selon le système réactionnel suivant:

Fragments d'ADN terminaux plats

1 à 7mL (pas plus de 1mg)

mélange dATP

1ml

10 x tampon A-tailing

1ml

Taq ADN polymérase

1ml

3. Maintenir au chaud à 72 ℃ pendant 20 - 30 minutes après le mélange doux.

4. Le produit ajouté à la queue a peut être purifié sans avoir besoin d'être nettoyé à nouveau ou de récupération de colle, prendre 1 - 2mL directement pour la réaction de connexion.


ADN terminal plat plus a Kit T4 principe vecteur et autres