Cellules souches endodontiques humaines

Propriétés du produit:

Source du tissu: tissu endodontique

Spécifications du produit: 5 × 105cells / t25 bouteille de culture cellulaire

Introduction aux cellules:

Cellules souches endodontiques humainesSéparation du tissu synovial; Le tissu endodontique est situé dans la cavité endodontique à l'intérieur de la dent. La forme extérieure de la cavité pulmonaire est à peu près similaire à la morphologie du corps dentaire, la cavité pulmonaire de la Couronne est plus grande, appelée chambre pulmonaire, la cavité pulmonaire de la racine est plus petite, appelée canal radiculaire, avec de petits trous à l'apex de la racine, appelés trous apicaux. Le tissu pulpaire contient principalement des nerfs, des vaisseaux sanguins, des lymphes et des tissus conjonctifs, ainsi que des cellules dentifrices disposées à la périphérie externe de la pulpe, dont le rôle est de fabriquer de la dentine. La Pulpe dentaire en raison de l'action différente des irritants pathogènes et des différences dans la résistance de l'organisme, différents changements pathologiques apparaissent et se manifesteront cliniquement sous la forme d'une série de signes et de symptômes différents. Après une longue durée de l'état de congestion pulmonaire se traduit par une inflammation pulmonaire aiguë. Les cellules souches mésenchymateuses (MSC) sont dérivées du tissu mésodermique au cours de la période embryonnaire, ont un fort potentiel d'auto - réplication et de différenciation multidirectionnelle, ont la capacité de se différencier directionnellement vers un large éventail de cellules terminales telles que les Adipocytes, les ostéoblastes, les Chondrocytes et les myocytes, l'utilisation de MSc pour réparer les lésions cartilagineuses a de bonnes perspectives d'application, et sont maintenant capables d'isoler et de préparer des cellules souches mésenchymateuses à partir de la moelle osseuse, de la graisse, de la synoviale, des os, des muscles et d'autres tissus, ainsi que du liquide amniotique, du cordon OMB

Introduction à la méthode:

Les Clones isolés par le laboratoire de la société ont été préparés par digestion à la collagénase, dilution à faible densité, pour un total de cellules d'environ 5 × 10? Cellules / bouteilles.

Détection de qualité:

Les isolats de laboratoire de la société sont identifiés par immunofluorescence cd90, peuvent atteindre une pureté supérieure à 90% et ne contiennent pas de VIH - 1, de VHB, de VHC, de mycoplasmes, de bactéries, de levures et de champignons, etc.

Information sur la culture:

Milieu de culture: avec FBS, additifs de croissance, Penicillin, streptomycine, etc.

Fréquence de changement de liquide: tous les 2 - 3 jours

Caractéristiques de croissance: Wall

Forme cellulaire: comme fibroblaste

Caractéristiques de la génération: peut transmettre environ 3 - 5 générations

Sucs digestifs: 0,25%

Conditions de culture: phase gazeuse: air, 95%; CO2，5%

Méthode de Cryoconservation des cellules?

Méthode de Cryoconservation I: le tube de congélation est placé à 4 ℃ 30 ~ 60 minutes → (- 20 ℃ 30 minutes *) → - 80 ℃ 16 ~ 18 heures (ou toute la nuit) → réservoir d'azote liquide VaporPhase stockage à long terme.

Méthode de Cryoconservation II: le tube de congélation est placé dans le refroidisseur Programmable du programme défini, chaque minute tombe de 1 - 3 ℃ à - 80 ℃, puis dans le réservoir d'azote liquide Vapor phase de stockage à long terme. - 20 ℃ ne peut pas être plus d'une heure pour empêcher les cristaux de glace trop gros, provoquant la mort massive des cellules, ou sauter cette étape directement dans le réfrigérateur à - 80 ℃, mais la survie est légèrement réduite.

Opérations de culture:

1) réanimer les cellules: décongeler le lyseur contenant 1 ml de suspension cellulaire en agitant rapidement dans un bain - Marie à 37 ° C, ajouter 4 ml de milieu de culture et bien mélanger. Centrifuger 4 min à 1000 RPM, éliminer le surnageant et bien souffler après addition de 1 - 2 ml de milieu. Toutes les suspensions cellulaires sont ensuite ajoutées au flacon de culture pour une nuit de culture (ou la suspension cellulaire est ajoutée à une boîte de 10 cm, environ 8 ml de milieu sont ajoutés pour une nuit de culture). Changez de liquide le lendemain et vérifiez la densité cellulaire.

2) Passage cellulaire: si la densité cellulaire atteint 80% - 90%, la culture de passage peut être effectuée.

1. Jeter le surnageant de culture et laver les cellules 1 - 2 fois avec du PBS sans ions calcium et magnésium.

Ajouter 1 ml de digestat (0,25% Trypsin - 0,53 mm EDTA) dans un flacon de culture, placer dans un incubateur à 37 ° C pour la digestion pendant 1 - 2 minutes, puis observer la digestion des cellules sous un microscope, si la plupart des cellules deviennent rondes et tombent, rapidement revenir à la table d'opération, tapoter quelques flacons de culture après avoir ajouté une petite quantité de milieu pour terminer la digestion.

3. Appuyez sur 6 - 8 ml / flacon pour compléter le milieu de culture, bien agiter et bien aspirer, centrifuger à 1000 RPM pendant 4 minutes, retirer le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de milieu de culture et bien souffler.
4. Distribuer la suspension cellulaire dans une nouvelle boîte contenant 8 ml de milieu ou dans un flacon dans un rapport de 1: 2.

3) lyophilisation cellulaire: la lyophilisation cellulaire peut être effectuée lorsque la croissance cellulaire est en bon état. La bouteille t25 ci - dessous est de catégorie;

Lorsque les cellules sont congelées, après avoir abandonné le milieu de culture, le PBS est lavé une fois et ajouté 1 ml, après que les cellules deviennent rondes et tombent, ajouter 1 ml de milieu de culture contenant du sérum pour terminer la digestion, peut être compté à l'aide d'une plaque de comptage de globules.

2. 4min 1000rpm centrifuger pour enlever le nettoyage supérieur. Ajouter 1 ml de sérum pour remettre en suspension les cellules, ajouter le sérum et le DMSO en fonction du nombre de cellules, mélanger doucement, la concentration finale de DMSO est de 10%, la densité cellulaire n'est pas inférieure à 1x106 / ML, chaque lyophilisateur conserve 1 ml de suspension cellulaire, faites attention au lyophilisateur pour bien identifier.

3. Placez le réservoir de congélation dans la boîte de refroidissement du programme, mettez - le dans le réfrigérateur à - 80 degrés, 2 heures plus tard dans le stockage d'irrigation à l'azote liquide. Enregistrez la position de la lyophilisation pour la récupérer la prochaine fois.

Rapport expérimental:

Produits pour la recherche scientifique uniquement:

I. séparation et culture:

1, dans des conditions aseptiques, retirer le tissu auriculaire de rats SD d'âge 1 - 3D, puis laver ce bloc de tissu 2 fois avec du PBS, après quoi il sera d'environ 1 mm 3;

Ajouter 4 ml de digestat enzymatique (0,1% et 0,1% collagénase de type I) dans le bloc de tissu, suspendre pendant 10 s, digérer à 37 ° C pendant 10 min, puis souffler avec un compte - gouttes pour faire une suspension unicellulaire, précipiter naturellement et recueillir le surnageant, mettre 4 ° c après la fin de la digestion avec un milieu contenant 10 ° s;

3, le tissu restant est ajouté à 3 ~ 4 ml de digestat enzymatique, suspendu pendant 10 s, après la digestion à 37 ℃ pendant 10 min, selon la méthode ci - dessus pour recueillir le surnageant et terminer la digestion après 4 ℃ placer, répétez cette étape 2 - 3 fois jusqu'à ce que le tissu soit digéré;

4, filtrer le digestat cellulaire avec un tamis en acier inoxydable de 200 Mesh, centrifuger à 1200r / min pendant 10 min, éliminer le surnageant, les cellules précipitées sont suspendues avec du milieu contenant 10% de FBS dmem / F12, ensemencées dans des flacons de culture de 25 cm 2, placés à 37 ° C, incubés Dans un incubateur à 5% de CO2;

5, après l'application différentielle de la paroi 1H, le milieu de culture est aspiré et la culture continue comme l'expérience nécessite l'ensemencement dans une plaque de 6 puits.
II. Identification par immunofluorescence:
1, à la croissance des myocytes auriculaires à 80% de fusion, le milieu de culture est abandonné et les cellules sont rincées 2 fois avec du PBS incubé pendant 10 min, puis les cellules sont fixées avec du paraformaldéhyde à 4% pendant 15 min à température ambiante;

2, PBS rincer les cellules 2 fois pendant 10 min, puis à 4 ° c Avec 0,1% Triton X - 100 perméable pendant 15 min;

3, PBS rincer les cellules 2 fois, chaque fois pendant 10 min, puis à température ambiante, fermer les cellules avec 4% BSA pendant 30 min;

4, diluer alpha - Actin un anti dans un rapport de 1: 100, puis placez - le dans un réfrigérateur à 4 ° C pour incuber les cellules pendant la nuit;

5, PBS rincer les cellules 3 fois, chaque fois pendant 10 min, diluer le bis - anti - alpha - actine dans un rapport de 1: 150, 37 ℃ condition de laisser 1 h;

6, rincer 3 fois avec du PBS pendant 10 min, puis observer l'image sous un microscope à fluorescence inversé et prendre des photos.
Angiotensine II anticorps

Angiotensine II Receptor 1 anticorps

Angiogenin - 1 anticorps

Angiogenin like protein 2 anticorps

Test gratuit du kit ELISA pour le récepteur de Chimiokine CC humain 5 (ccr5)

Kit de détection ELISA pour le récepteur de Chimiokine CC humain 2 (ccr2)

Kit de détection ELISA pour le récepteur de Chimiokine CC humain 1 (ccr1)

Kit de détection ELISA pour la Chimiokine CC humaine 7 (ccl7 / mcp3 / scya6 / scya7)

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