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Milieu spécifique aux cellules INS - 1

NégociableMise à jour sur06/11

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Nature du fabricant: producteurs

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Vue d'ensemble

Produits associés milieu spécifique pour les cellules INS - 1 Spleen lymphocytes de rat cellules primaires de la gaine radiculaire externe humaine NB 4 souches de promyélocytes aigus sang périphérique humain cellules nucléaires individuelles cellules musculaires lisses du côlon de rat cellules souches mésenchymateuses du sang périphérique primaire humain BJ fibroblastes de la peau humaine macrophages du sang périphérique primaire de rat fibroblastes du côlon cellules tumorales de la colonne vertébrale caudale primaire humaine

Détails du produit

Propriétés du produit:

Nom du produit	spécification	Forme du produit
Milieu spécifique aux cellules INS - 1	125 ml × 4	liquide

Présentation détaillée des marchandises:

Soigneusement optimisé par l'équipe technique et testé sur le long terme, ce produit maintientL'état optimal de croissance des cellules INS - 1. Les différents ingrédients nécessaires à la croissance des cellules INS - 1 sont déjà inclus dans ce produit sans aucun ajout et peuvent être utilisés directement dans la culture in vitro des cellules INS - 1. Ce produit est destiné à une utilisation scientifique ultérieure et ne doit pas être utilisé à des fins diagnostiques, thérapeutiques, cliniques, domestiques ou autres.

Description du produit

Forme du produit: liquide

Concentration du produit: 1 ×

Spécifications du produit: 125mL × 4

Ingrédients du milieu de cultureRPMI-1640 + 10% FBS + 50 μmol / L β-mercaptoéthanol + 1% P / S

Détection des bactéries: négatif

Détection de champignons: négatif

Détection de mycoplasmes: négatif

Expériences de croissance cellulaire: bonne croissance cellulaire, morphologie normale

Teneur en endotoxines(UE/mL): ≤3

Conditions de stockage: 2 ~ 8 ℃, stockage à l'abri de la lumière

Conditions de transport: transport réfrigéré en sacs de glace

Durée de validité: 3 mois

Rapport expérimental:

I. séparation et culture:

II. Identification par immunofluorescence:

1, dans des conditions aseptiques, retirer le tissu auriculaire de rat SD d'âge 1 - 3D, puis laver ce bloc de tissu avec du PBS 2 fois, et finalement sera d'environ 1 mm 3;
Ajouter 4 ml de digestat enzymatique (0,1% et 0,1% collagénase de type I) dans le bloc de tissu, suspendre pendant 10 s, mettre à 37 ℃ pour la digestion pendant 10 min, après quoi souffler avec un compte - gouttes pour faire une suspension unicellulaire, précipiter naturellement et recueillir le surnageant, mettre 4 ℃ après la fin de la digestion avec un milieu contenant 10% de FBS;
3, le tissu restant est ajouté 3 ~ 4 ml de digestat enzymatique, suspendu pendant 10 s, après la digestion à 37 ℃ pendant 10 min, selon la méthode ci - dessus pour recueillir le surnageant et terminer la digestion après 4 ℃ placer, répétez cette étape 2 - 3 fois jusqu'à ce que le tissu soit digéré;
4, filtrer le digestat cellulaire avec un tamis en acier inoxydable de 200 Mesh, centrifuger à 1200r / min pendant 10 min, éliminer le surnageant, les cellules précipitées sont suspendues avec du milieu contenant 10% de FBS dmem / F12, ensemencées dans des flacons de culture de 25 cm 2, placés à 37 ° C, incubés Dans un incubateur à 5% de CO2;
5, après l'application différentielle de la paroi 1H, le milieu de culture est aspiré et la culture continue comme l'expérience nécessite l'ensemencement dans une plaque de 6 puits;

1, à la croissance des myocytes auriculaires à 80% de fusion, le milieu de culture est abandonné et les cellules sont rincées 2 fois avec du PBS incubé pendant 10 min, puis les cellules sont fixées avec du paraformaldéhyde à 4% pendant 15 min à température ambiante;
2, PBS rincer les cellules 2 fois pendant 10 min, puis à 4 ° c Avec 0,1% Triton X - 100 perméable pendant 15 min;
3, PBS rincer les cellules 2 fois, chaque fois pendant 10 min, puis dans des conditions de température ambiante, fermer les cellules avec BSA 4% pendant 30 min;
4, diluer alpha - Actin un anti dans un rapport de 1: 100, puis placez - le dans un réfrigérateur à 4 ° C pour incuber les cellules pendant la nuit;
5, PBS rincer les cellules 3 fois, chaque fois pendant 10 min, diluer le bis - anti - alpha - actine dans un rapport de 1: 150, 37 ℃ condition de laisser 1 h;
6, rincer 3 fois avec du PBS pendant 10 min, et enfin observer l'image sous un microscope à fluorescence inversé et prendre des photos.

Discipline opérationnelle:
Préparation du milieu de culture et des conditions de congélation:
1) Préparation du milieu rpmi - 1640, 90%; Sérum de veau foetal de haute qualité, 10%.
2) conditions de culture: phase gazeuse: air, 95%; CO2, 5%. Température: 37 ℃, l'humidité de l'incubateur est de 70% - 80%.
3) lyophilisat: 90% sérum, 10% DMSO, maintenant utilisé avec le dosage actuel, stockage d'azote liquide.
II. Traitement cellulaire:
1) réanimer les cellules: Placez rapidement le lyophilisateur contenant 1 ml de suspension cellulaire dans un bain - Marie à 37 ° C (la surface de l'eau doit être inférieure au couvercle du lyophilisateur) secouez et décongelez, déplacez - le dans un tube à centrifuger de 15 ml préparé au préalable contenant 4 ml de milieu de culture et mélangez bien. Centrifuger 4 min à 1000 RPM, éliminer le surnageant et bien souffler après addition de 1 ml de milieu. Toutes les suspensions cellulaires sont ensuite transférées pour culture dans des flacons de culture contenant 5 ml de milieu pendant une nuit. Changez de liquide le lendemain et vérifiez la densité cellulaire.
2) Passage cellulaire: si la densité cellulaire atteint 80% - 90%, la culture de passage peut être effectuée.
Pour les cellules en suspension, le passage peut se référer aux méthodes suivantes:
Méthode 1: collecter les cellules,1000RPM， Centrifuger à température normale pendant 5 minutes, éliminer le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de la solution de culture après soufflage et distribuer la suspension cellulaire dans de nouvelles boîtes contenant 8 ml de milieu de culture ou des flacons dans un rapport de 1: 2 à 1: 5.
Produits de la société pour la recherche scientifique uniquement

Dscr3 antibody Blocking Peptide syndrome de Down région critique protéine 3 polypeptide bloqué

Dscr4 antibody Blocking Peptide syndrome de Down région critique protéine 4 polypeptide bloquant

Dscam antibody Blocking Peptide syndrome de Down molécule d'adhésion cellulaire polypeptide bloquant

Dscaml1 antibody Blocking Peptide syndrome de Down molécule d'adhésion cellulaire 2 polypeptide bloqué

Btbd10 antibody Blocking Peptide protéines liées au métabolisme du sucre 1 polypeptide bloqué

Gpa33 antibody Blocking Peptide glycoprotéine 33 polypeptide bloquant

Gypc antibody Blocking Peptide glycoprotéine C polypeptide bloquant

Mgat5 antibody Blocking Peptide glycoprotéine gntva polypeptide bloqué

Lrp2 antibody Blocking Peptide glycoprotéine gp330 polypeptide bloqué

Rbmx antibody Blocking Peptide glycoprotéine p43 polypeptide bloquant

Gp6 antibody Blocking Peptide glycoprotéine VI / polypeptide bloquant l'hexaglycoprotéine

Hpx antibody Blocking Peptide glycoprotéine bêta - 1b polypeptide bloqué

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