Acétylcholine poisson zèbre (ACH) ELISA test kit odvalue

Acétylcholine poisson zèbre (ACH) ELISA test kit odvalueMéthodes de traitement avant échantillon et précautions après réception du kit pour référence:

I. méthode de traitement avant échantillon

Différents types d'échantillons sont traités différemment, il est nécessaire de suivre strictement les instructions du kit. Voici les points de traitement pour les types d'échantillons courants:

1. Sérum / plasma

• Collecte: le sang est recueilli à l'aide d'un tube anticoagulant à l'EDTA ou à l'héparine qui ne contient pas d'indicateur de test pour éviter l'hémolyse.
• Centrifugation: 2000 - 3000 × G, centrifugation à 4 ° C pendant 10 - 15 minutes, séparation du sérum / plasma.
• Conservation: stockage de congélation de - 80 ℃ après la séparation (évitez le gel et la dégel répétés), peut être conservé à court terme à - 20 ℃ (doit être détecté dès que possible).

2. Homogénat de tissus

• Ingrédients: tissus frais, aspirer l'humidité sèche après rinçage salin physiologique.
• Homogénat: en poids (g): volume (ML) = 1: 9 - 10 ajouter du PBS prérefroidi ou du lysat (contenant un inhibiteur de protéase) et laisser reposer sur la glace pendant 30 minutes après l'homogénat.
• Centrifugation: 12000 × G, centrifugation à 4 ℃ pendant 10 - 15 minutes, enlèvement de la limpidité.
• Conservation: même sérum / plasma.

3. Lysat cellulaire

• Collecte des cellules: les cellules sont lavées 2 - 3 fois avec du PBS et le nettoyage est éliminé par centrifugation.
• Lyse: ajout du lysat Ripa (contenant un inhibiteur de protéase), fragmentation par ultrasons ou lyse répétée par Gel - dégel.
• Centrifugation: 12000 x G, centrifugation à 4°C pendant 20 minutes, élimination.
• Conservation: idem.

4. Excréments / autres échantillons biologiques

• Prétraitement: les lipides sont extraits par addition d'un solvant (par exemple un mélange chloroforme - méthanol) après homogénation des fèces et la phase organique est reprise à sec après centrifugation.
• Conservation: éviter l'oxydation, il est recommandé de conserver - 80 ℃ après le fractionnement.

Notes clés:

• Évitez la contamination lipidique (par exemple, le Chedi est nécessaire pour éliminer les résidus de solvant lors de l'extraction au chloroforme).
• Les échantillons peuvent contenir des protéines de liaison de manière endogène et doivent être assurés que la lyse est adéquate.
• Évitez la congélation et la dégel répétés (recommandé pour la conservation par fractionnement).

II. Traitement après réception du kit

1. Vérifiez l'intégrité du kit:

   • Confirmation réactifs, produits d'étalonnage, contrôle de qualité, instructions, etc. complet.
   • Vérifiez que le flacon de réactif est bien scellé, sans fuite ni phénomène de délamination.

2. Conditions de conservation:

   • Kit non ouvert: conserver selon les instructions (généralement réfrigéré à 2 - 8 ° c).
   • Réactifs ouverts: l'utilisation à court terme peut être stockée à 2 - 8 ℃, la conservation à long terme à - 20 ℃ (par exemple, les lamelles d'enzyme ont besoin d'un sac de papier d'aluminium scellé à l'abri de la lumière).

3. Montage et utilisation:

   • Les produits d'étalonnage, les produits de contrôle de la qualité sont recommandés pour la congélation après le chargement et éviter la congélation et la dégel répétées.
   • Les réactifs doivent être réchauffés à la température ambiante (15 - 30 minutes) avant d'être utilisés pour éviter les changements de température qui affectent la réaction.

4. Calibration et contrôle qualité:

   • Lors de la fabrication de la courbe standard, vous devez diluer l'étalon strictement selon le gradient de concentration.
   • Les résultats du contrôle de la qualité doivent être dans les limites permises, sinon des problèmes opérationnels ou de réactifs doivent être examinés.

Iii. Questions fréquemment posées et solutions

1. Valeurs de do faibles ou élevées après le traitement de l'échantillon:

   • Vérifiez si l'échantillon est dégradé (p. ex. oxydation causée par une mauvaise conservation).
   • Vérifiez que le multiple de dilution de l'échantillon est approprié (ajustement nécessaire au - delà de la plage linéaire).

2. Anomalies du rendu des couleurs (p. ex. arrière - plan élevé, couleurs inégales):

   • Vérifiez si vous ajoutez trop ou pas assez de liquide de terminaison.
   • Confirmez si le temps d'incubation, la température sont conformes.

3. La courbe d'étalonnage n'est pas idéale:

   • Vérifiez que les normes sont correctement remises en solution et qu'il n'y a pas de contamination.
   • Confirmer le réglage de la longueur d'onde de l'étalon enzymatique (généralement 450 nm ± 10 nm).

4. Défaillance du réactif:

   • Si le kit n'est pas correctement conservé (par exemple, gel - dégel répété ou température élevée) et peut entraîner une défaillance du réactif, il est recommandé de contacter le fournisseur pour le remplacer.

Iv. Autres recommandations

• Les pré - expériences pré - expérimentales optimisent les étapes de traitement des échantillons (par exemple, différents tissus peuvent nécessiter un ajustement des conditions de lyse).
• Évitez strictement la contamination croisée (utilisez des têtes de pistolet de pipette spéciales, des lattes).
• Si les résultats sont anormaux, il est recommandé de refaire le test ou de contacter le support technique du fournisseur du kit.

Acétylcholine poisson zèbre (ACH) ELISA test kit odvalue
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