Poisson zèbre conversion facteur de croissance bêta (TGF - β) ELISA test kit recherche scientifique

Shanghai Enzyme Australia Biotechnology Co., Ltd (marque: meiaobio) est une entreprise de haute technologie axée sur les sciences de la vie, qui se consacre à fournir des réactifs biologiques innovants et de haute qualité et des solutions pour les instituts de recherche scientifique, les institutions médicales et les utilisateurs industriels du monde entier. S'appuyant sur les avantages de Shanghai en tant que centre international d'innovation scientifique et technologique, la société a réuni les meilleures équipes techniques de l'industrie et les ressources de R & D pour soutenir la recherche en sciences de la vie et le développement industriel avec un concept de service professionnel, précis et fiable. Les principaux produits meiaobio couvrent les quatre grandes orientations de la biologie moléculaire, de la biologie cellulaire, des tests immunologiques et de la Banque d'échantillons biologiques, notamment les kits ELISA: des outils de détection hautement sensibles et spécifiques, largement utilisés dans l'analyse de marqueurs de maladies, de Cytokines, d'hormones, etc. Kit biochimique: couvre les voies métaboliques, la détection de l'activité enzymatique et d'autres domaines, soutient la recherche fondamentale et les besoins industriels en matière d'inspection de la qualité. Kit PCR: fournit des solutions d'amplification d'acides nucléiques rapides et précises pour le clonage de gènes, la détection d'agents pathogènes et l'analyse de l'expression. Produits de banque d'échantillons biologiques: y compris les souches cellulaires, les sérums normalisés, les souches microbiennes et les réactifs biochimiques pour assurer la répétabilité des expériences et la fiabilité des données. La force technique et l'assurance de la qualité de la société ont établi un système de contrôle de qualité strict avec l'innovation technologique comme force motrice principale. Dans le même temps, meiaobio travaille en étroite collaboration avec les instituts de recherche et les universités nationales et internationales pour optimiser continuellement les performances des produits, promouvoir les itérations technologiques et garantir aux utilisateurs des outils expérimentaux de pointe et stables. Meiaobio adhère à l'objectif de service « axé sur le client», qui consiste à fournir des programmes expérimentaux personnalisés, des conseils techniques professionnels et un soutien logistique efficace. De la sélection des produits au suivi après - vente, meiaobio fournira aux clients une solution unique tout au long du processus, contribuant à l'amélioration de l'efficacité de La recherche scientifique et à la conversion des résultats. Vision et Mission À l'avenir, meiaobio continuera à travailler en profondeur dans le domaine des sciences de la vie, à promouvoir la recherche scientifique et médicale mondiale avec des technologies innovantes, à promouvoir le progrès de la médecine de précision, de la biomédecine et d'autres industries, à contribuer à la santé humaine et au développement social. Positionnement de marque: fournisseur professionnel, fiable et innovant de solutions biotechnologiques. Promesse de la marque: la qualité est basée, le service est basé et contribue à chaque exploration scientifique!
Poisson zèbre conversion facteur de croissance bêta (TGF - β) ELISA test kit recherche scientifique

I. composition de base du kit ELISA

Les kits ELISA contiennent généralement les composants clés suivants, qui peuvent varier légèrement d'un type à l'autre (par exemple, méthode sandwich, méthode indirecte, etc.):

1. Plaque de revêtement: le pain de table est muni de 96 puits d'anticorps (ou d'antigènes) spécifiques (polystyrène) pour capturer la molécule cible dans l'échantillon.
2. étalon / étalon: molécule cible à concentration connue (p. ex., antigène recombinant, anticorps purifié) utilisée pour tracer une courbe standard qui quantifie la concentration de la molécule cible dans un échantillon.
3. Anticorps de détection: anticorps spécifiques dirigés contre la molécule cible (souvent marqués avec des enzymes telles que la peroxydase de raifort HRP, la phosphatase alcaline AP).
4. Dilution de conjugué enzymatique: tampon utilisé pour diluer les anticorps marqués enzymatiquement.
5. Solution de substrat: substrat catalysé par l'enzyme (par exemple, le chromogène TMB correspondant au HRP, le chromogène OPD); AP correspondent au PNPP chromogène liquide), la réaction conduit à un produit coloré.
6. Liquide de terminaison: termine la réaction enzymatique, fixe le résultat du rendu des couleurs.
7. Liquide de lavage (pbst ou tbst): utilisé pour laver les substances non spécifiques non liées et réduire les interférences de fond.
8. Liquide de fermeture: les sites non liés de la microplaque sont fermés après le package, empêchant l'adsorption non spécifique.
9. Dilution de l'échantillon: pour diluer l'échantillon à mesurer (p. ex., sérum, plasma, homogénat de tissus, etc.), en faisant correspondre le système réactionnel.

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Principe de détection ELISA

Au cœur de l’elisa se trouve le couplage de la liaison spécifique antigène - anticorps à une réaction chromogène enzymatique, les principales étapes étant les suivantes (exemple de la « méthode sandwich »):

1. Packaging: des anticorps spécifiques (anticorps de capture) sont encapsulés sur la surface de la microplaque pour former des anticorps en phase solide.
2. Fermeture: ajouter le liquide de fermeture, remplir les sites où l'anticorps n'est pas lié et éviter l'adsorption non spécifique des hétéro - protéines dans l'échantillon.
3. Ajout: ajout de l'échantillon à tester (contenant l'antigène cible) ou de l'étalon, l'antigène de l'échantillon étant lié à l'anticorps en phase solide.
4. Incubation avec lavage: incubation à température ambiante ou à 37°c pour permettre une liaison adéquate antigène - anticorps; Le lavage élimine les substances non liées.
5. Ajout d'anticorps de détection: un anticorps de détection marqué par l'enzyme (lié à un autre épitope de l'antigène cible) est ajouté pour former un complexe « anticorps solide - antigène - anticorps enzymatique » (structure sandwich).
6. Laver à nouveau: les anticorps marqueurs enzymatiques non liés sont éliminés.
7. Coloration du substrat ajouté: une solution de substrat est ajoutée et une enzyme (p. ex. HRP) Catalyse le substrat pour produire un produit coloré (la nuance de couleur est positivement corrélée à la concentration de l'antigène cible).
8. Mettre fin à la réaction: ajouter un liquide de terminaison (par exemple de l'acide sulfurique) et arrêter la réaction de rendu des couleurs.
9. Analyse de lecture: détermination de l'Absorbance (valeur OD) à une longueur d'onde spécifique (par exemple HRP correspond à 450 nm) avec un étalon enzymatique, la concentration de l'antigène cible dans l'échantillon est calculée à l'aide d'une courbe standard.

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Iii. Principaux types d’elisa

En fonction de la cible de détection (antigène / anticorps) et du principe de réaction, les ELISA peuvent être classées dans les catégories suivantes:

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Iv. Précautions opérationnelles

Pour assurer la précision et la répétabilité des résultats de détection, il est important de noter les points clés suivants:

1. Manipulation des échantillons: éviter les interférences hémolytiques, Lipo - sanguines ou lysozymiques; Les échantillons doivent être dilués selon les instructions.
2. Conditions d'incubation: contrôle strict de la température (généralement 37 ° c) et de la durée (30 minutes - 2 heures) pour éviter les fluctuations de température ou le temps insuffisant / excessif.
3. Opération de lavage: un lavage insuffisant conduit à un fond élevé et un lavage excessif peut éluer le liant; Il est recommandé d'utiliser un lave - plaque (réglage de 5 lavages de 30 secondes chacun).
4. Contrôle du rendu des couleurs: le substrat doit être préservé à l'abri de la lumière et le temps de rendu des couleurs doit être ajusté en fonction de la concentration de l'échantillon.
5. Paramètres de contrôle: les contrôles blancs, les contrôles négatifs, les contrôles positifs et les critères doivent être définis pour vérifier la validité de l'expérience.

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V. Contrôle de la qualité et interprétation des résultats

1. Courbe Standard: avec la concentration de l'étalon en abscisse et la valeur od en ordonnée, tracer une courbe standard (généralement une courbe de type s), calculer la concentration à laquelle correspond la valeur od de l'échantillon (attention à la plage linéaire, au - delà de laquelle il faut diluer ou concentrer l'échantillon).
2. Sensibilité vs spécificité: la sensibilité (zui faible limite de détection) et la spécificité (taux de réactivité croisée avec des analogues) sont des indicateurs de base pour évaluer les performances des kits, qui doivent être vérifiés par référence aux instructions ou par des pré - expériences.
3. Validité des données: si le r² de la courbe standard est & lt; 0,99, si la do du contrôle négatif est trop élevée (> 0,1) ou si le contrôle positif n’est pas conforme, il est nécessaire de réessayer.

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Vi. Domaines d'application

• Domaine scientifique: recherche scientifique uniquement.

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Recommandations pour le choix des kits ELISA

• Cible de détection claire: s'agit - il d'un antigène (p. ex., une protéine virale) ou d'un anticorps (p. ex., IgG / IgM)? Les petites molécules (p. ex., les médicaments) doivent être sélectionnées pour les kits de droit de la concurrence.
• Type d'échantillon: sérum, plasma, homogénat de tissus ou surnageant cellulaire? Une dilution d'échantillon correspondante doit être sélectionnée.
• Besoins de performance: la détection quantitative doit se concentrer sur la gamme linéaire et la répétabilité; La détection qualitative peut se concentrer sur le réglage de la valeur critique (CUT - off).

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