Fonctionnement du kit de détection ELISA de myéloperoxydase de poisson zèbre (MPO)

I. nom du produit

Fonctionnement du kit de détection ELISA de myéloperoxydase de poisson zèbre (MPO)
Numéro de fret:MO-Q91343T

II. Spécifications d'emballage

96 trous / boîte (avec un ensemble complet de composants tels que des étalons, des réactifs, etc., peut détecter 90 échantillons + 6 étalons)

Iii. Utilisation prévue

Ce kit est utilisé in vitro pour la détection quantitative de la concentration de MPO dans des échantillons tels que le sérum de poisson zèbre, le plasma, les homogénats de tissus, les surnageants cellulaires, etc., et peut être utilisé dans des domaines tels que la recherche immunologique.

Iv. Principe de détection

Basé sur le test d'immunoadsorption enzymatique (ELISA) par la méthode sandwich à deux anticorps.

1. Plaquettes encapsulées: les microplaques sont pré - encapsulées avec un anticorps monoclonal anti - MPO humain (anticorps de capture) qui peut se lier spécifiquement à la MPO dans l'échantillon.
2. Incubation de l'échantillon: l'échantillon à tester est ajouté et le MPO de l'échantillon est lié au paquet par des anticorps.
3. Anticorps de détection: un anticorps polyclonal anti - MPO marqué à la biotine (anticorps de détection) est ajouté pour se lier à un autre épitope de MPO pour former le complexe « Packed - by - antibody - MPO - Detection antibody ».
4. Enzyme étalon avidine: ajouter le complexe Streptavidine - peroxydase de raifort (HRP), se lier à la biotine, amplifier le signal.
5. Réaction de rendu des couleurs: la solution de substrat (TMB) est ajoutée et le HRP catalyse le rendu des couleurs du substrat avec des nuances de couleur directement proportionnelles à la concentration en MPO.
6. Terminaison vs lecture: l'addition du liquide de terminaison termine la réaction, l'Absorbance (valeur OD) est déterminée à la longueur d'onde de 450 nm avec un étalon enzymatique, la concentration de MPO dans l'échantillon est calculée par une courbe standard.
   

   Précautions

   1. Les kits doivent être équilibrés à la température ambiante (20 - 25 ° c) avant utilisation, afin d'éviter que la condensation n'affecte les résultats.
   2. Évitez les bulles d'air lors de l'échantillonnage, la pipette doit être calibrée pour s'assurer que la quantité d'échantillonnage est précise.
   3. Un lavage inadéquat peut entraîner un arrière - plan élevé, le liquide de lavage doit couvrir les micropores et sécher lors de la vidange (pour éviter les résidus dans les pores).
   4. Les substrats TMB doivent être conservés à l'abri de la lumière et le temps de rendu des couleurs doit être strictement contrôlé (une durée trop longue peut entraîner une couleur trop foncée).
   5. S'il s'agit d'un échantillon congelé, évitez de le congeler et de le dégeler à plusieurs reprises (la conservation par assemblage est recommandée).
   6. Un contrôle à blanc (dilution standard uniquement) et un contrôle négatif (échantillon à faible concentration connu) doivent être établis dans l'expérience pour vérifier la validité de l'expérience.
   
   

   Type d'échantillon applicable

   Sérum, plasma (EDTA / héparine anticoagulant), homogénat de tissu, surnageant de culture cellulaire, liquide céphalo - rachidien et autres échantillons de fluides corporels.
   Fonctionnement du kit de détection ELISA de myéloperoxydase de poisson zèbre (MPO)
   Ce kit est destiné uniquement à la recherche scientifique et n'est pas destiné au diagnostic ou au traitement clinique.
   
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