Kit de détection PCR par méthode de sonde

Les kits de détection PCR par la méthode de la sonde sont médiés par une paire d'amorces capables d'effectuer une amplification enzymatique rapide d'un fragment spécifique de gène (ADN) in vitro chez les animaux et les plantes, après n cycles thermiques d'amplification, le nombre de gènes spécifiques contenus dans le produit d'amplification étant (1 + e) N (0 < e < 1) du nombre de matrices d'origine, l'efficacité d'amplification = x, permettant la détection de gènes spécifiques dans le produit d'amplification.

Caractéristiques du produit:

Ce produit est un produit de PCR quantitative fluorescente hautement sensible développé en fonction de la conception d'amorces dans la zone conservatrice.

Le principe est médié par une paire d'amorces capables d'effectuer une amplification enzymatique rapide d'un fragment spécifique de gène (ADN) in vitro chez les animaux et les plantes, amplifié par n cycles thermiques, le nombre de gènes spécifiques contenus dans le produit d'amplification étant (1 + e) N (0) du nombre de matrices d'origine.

Transport: basse température

Conservation: moins 20 degrés

Validité: un an

Délai de livraison: 2 - 3 semaines

Précautions:

1. Procédure de base;

2, température d'amplification et température d'extension;

3, temps de réaction;

4, nombre de cycles;

5, formulation du liquide réactionnel PCR;

Principe de base de la technologie PCR;

7, cinétique de réaction de PCR;

8, produits d'amplification PCR;

Système de réaction PCR et conditions de réaction.

Méthode d'utilisation:

I. diluer l'échantillon de courbe standard (en prenant comme exemple les 6 dilutions 10x 10e2 - 10e7 copies / µl). En raison de la très forte concentration des étalons, les opérations de dilution suivantes doivent être effectuées dans des zones séparées et ne doivent pas contaminer l'échantillon ou d'autres composants de ce kit.

1. Marquer 6 tubes centrifuges, 7, 6, 5, 4, 3, 2.

2. Ajouter 45 UL de dilution de pochoir PCR Fluorescent avec la tête de pistolet à noyau séparément, avec la tête de pistolet à noyau, la même chose).

Ajouter 5 μl de contrôle positif (concentration de 1 × 10e8 copies / μl, fourni avec le kit) dans le tube 7, bien commotionner pendant 1 minute pour obtenir un échantillon de courbe standard de 1 × 10e8 copies / μl. Mettez de la glace à utiliser.

Changez la tête du pistolet, ajouter 5 μl 1 × 10e7 copies / μl de contrôle positif (résultant de la dilution de l'étape supérieure) dans le tube 6, bien commotionner pendant 1 minute pour obtenir 1 × 10e7 copies / μl de l'échantillon de courbe standard. Mettez de la glace à utiliser.

Changez la tête du pistolet, ajouter 5 μl 1 × 10e6 copies / μl de contrôle positif (résultant de la dilution de l'étape supérieure) dans le tube n ° 5, bien commotionner pendant 1 minute pour obtenir un échantillon de courbe standard de 1 × 10e6 copies / μl. Mettez de la glace à utiliser.

6. Répétez les opérations ci - dessus jusqu'à ce que vous obteniez 6 échantillons de courbe standard dilués. Mettez de la glace à utiliser.

Préparation de l'ADN de l'échantillon

7. L'ADN de l'échantillon est purifié par la méthode d'auto - sélection, ce produit est compatible avec la grande majorité des produits de purification d'acide nucléique sur le marché.

S'il y a n échantillons, N + 2 échantillons doivent être prélevés, l'un supplémentaire étant utilisé comme soin positif pour la préparation de l'échantillon et l'autre comme soin négatif pour la préparation de l'échantillon.

Iii. Mise en place de la réaction QPCR (système de 20 μl, effectué dans la Chambre de préparation des échantillons)

Si vous effectuez une analyse quantitative et ne faites qu'une seule répétition, marquez n + 9 tubes PCR, dont n + 2 pour les n + 2 échantillons obtenus à l'étape précédente, 1 pour les contrôles PCR négatifs (avec de l'eau pour le gabarit) et 6 pour la courbe standard. Si l'analyse qualitative est effectuée et qu'une seule répétition est effectuée, N + 4 tubes PCR sont marqués, dont n + 2 pour les n + 2 échantillons obtenus à l'étape précédente, 1 pour les contrôles PCR négatifs (avec de l'eau pour le gabarit) et 1 pour les contrôles PCR positifs.

Recoverin (rcvrn) SEL allicine

Calsequestrin (casq) SEL Topotécan

Calsequestrin 2 (casq2) SEL berbéramine

Histatine 1 (htn1) SEL berbérine

Junctophiline 2 (jph2) Base de racine saline

Junctophiline 3 (jph3) SEL Irinotécan

Sel d'intersectine 2 (itsn2) Yohimbine

Janus kinase 3 (jak3) myringoside

　　Kit de détection PCR par méthode de sondePrix Janus kinase 2 (JAK2) myricine

Kisspeptin receptor (kiss1r) artichautine (1,3 - dicaféoylquinine) virus de la grippe A H5N1 lectine H5N1 hemagglutinine

Anticorps contre la protéine ul49 du cytomégalovirus humain HCMV ul49

Facteur nucléaire hépatocytaire 1β / HNF - 1β anticorps hnf1 bêta

Anticorps contre la protéine hhla3

Hhip - like protein 2 anticorps hhipl2

Virus de la grippe A H3N2 - anticorps contre la protéine m2 H3N2 Matrix Protein 2

HSH2D抗体HSH2D

Hirudine anticorps Hirudin

Anticorps antigène leucocytaire a Hla classe 1 ABC

Virus du papillome humain type 16 E7 anticorps HPV16 E7

Précautions:

① l'ordre dans lequel les réactifs sont ajoutés doit être cohérent pour garantir le même temps d'incubation pour tous les puits de la plaque de réaction.

② Configurez le liquide de lavage avec un récipient en plastique propre.

③ les opérations d'incubation sont effectuées selon la durée, la quantité et l'ordre indiqués dans les instructions du kit de test ELISA pour l'hémoglobine de poulet (HB).

④ Le substrat a doit être volatilisé pour éviter une ouverture prolongée du couvercle. Le substrat B est sensible à la lumière et évite une exposition prolongée à la lumière. Eviter le contact avec les mains, toxique. La valeur od doit être lue immédiatement après la fin de l'expérience.

⑤ laver la plaque de marquage enzymatique doit être bien tamponné à sec, ne pas mettre le papier absorbant directement dans le trou de réaction de marquage enzymatique pour absorber l'eau.

⑥ utilisez une tête d'aspiration à usage unique pour éviter la contamination croisée, lors de l'aspiration du liquide de terminaison et du liquide de substrat a, B, évitez d'utiliser l'éprouvette avec une partie métallique.

⑦ les lattes qui ne sont pas utilisées dans l'expérience doivent être immédiatement remises dans le sac d'emballage, scellées et conservées afin de ne pas se détériorer.

⑧ le réactif doit être stocké selon les instructions de l'étiquette et ramené à la température ambiante avant utilisation. Les standards après dilution doivent être jetés et ne peuvent pas être conservés.

Les autres réactifs non utilisés doivent être emballés ou bien couverts. Ne pas mélanger les réactifs avec des numéros de lot différents. Utiliser avant conservation.