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Milieu spécifique pour les cellules Rd

NégociableMise à jour sur06/11

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Détails du produit

Présentation détaillée des marchandises:

Soigneusement optimisé par l'équipe technique et testé sur le long terme, ce produit maintientL'état de croissance des cellules Rd. Les différents ingrédients nécessaires à la croissance des cellules RD sont déjà inclus dans ce produit, sans ajout d'ingrédients, et peuvent être utilisés directement dans la culture in vitro des cellules Rd. Ce produit est destiné à une utilisation scientifique ultérieure et ne doit pas être utilisé à des fins diagnostiques, thérapeutiques, cliniques, domestiques ou autres.

Description du produit

Forme du produit: liquide

Concentration du produit: 1 ×

Spécifications du produit: 125mL × 4

Ingrédients du milieu de culture: DMEM + 10% FBS + 1% P / S

Détection des bactéries: négatif

Détection de champignons: négatif

Détection de mycoplasmes: négatif

Expériences de croissance cellulaire: bonne croissance cellulaire, morphologie normale

Teneur en endotoxines(UE/mL): ≤3

Conditions de stockage: 2 ~ 8 ℃, stockage à l'abri de la lumière

Conditions de transport: transport réfrigéré en sacs de glace

Période de validité: 3 mois

Produits de la société pour la recherche scientifique uniquement

Propriétés du produit:

Nom du produit	spécification	Forme du produit
Milieu spécifique pour les cellules Rd	125 ml × 4	liquide

RD细胞专用培养基

Rapport expérimental:

I. séparation et culture:

II. Identification par immunofluorescence:

1, dans des conditions aseptiques, retirer le tissu auriculaire de rat SD d'âge 1 - 3D, puis laver ce bloc de tissu avec du PBS 2 fois, et finalement sera d'environ 1 mm 3;
Ajouter 4 ml de digestat enzymatique (0,1% et 0,1% collagénase de type I) dans le bloc de tissu, suspendre pendant 10 s, mettre à 37 ℃ pour la digestion pendant 10 min, après quoi souffler avec un compte - gouttes pour faire une suspension unicellulaire, précipiter naturellement et recueillir le surnageant, mettre 4 ℃ après la fin de la digestion avec un milieu contenant 10% de FBS;
3, le tissu restant est ajouté 3 ~ 4 ml de digestat enzymatique, suspendu pendant 10 s, après la digestion à 37 ℃ pendant 10 min, selon la méthode ci - dessus pour recueillir le surnageant et terminer la digestion après 4 ℃ placer, répétez cette étape 2 - 3 fois jusqu'à ce que le tissu soit digéré;
4, filtrer le digestat cellulaire avec un tamis en acier inoxydable de 200 Mesh, centrifuger à 1200r / min pendant 10 min, éliminer le surnageant, les cellules précipitées sont suspendues avec du milieu contenant 10% de FBS dmem / F12, ensemencées dans des flacons de culture de 25 cm 2, placés à 37 ° C, incubés Dans un incubateur à 5% de CO2;
5, après l'application différentielle de la paroi 1H, le milieu de culture est aspiré et la culture continue comme l'expérience nécessite l'ensemencement dans une plaque de 6 puits;

1, à la croissance des myocytes auriculaires à 80% de fusion, le milieu de culture est abandonné et les cellules sont rincées 2 fois avec du PBS incubé pendant 10 min, puis les cellules sont fixées avec du paraformaldéhyde à 4% pendant 15 min à température ambiante;
2, PBS rincer les cellules 2 fois pendant 10 min, puis à 4 ° c Avec 0,1% Triton X - 100 perméable pendant 15 min;
3, PBS rincer les cellules 2 fois, chaque fois pendant 10 min, puis dans des conditions de température ambiante, fermer les cellules avec BSA 4% pendant 30 min;
4, diluer alpha - Actin un anti dans un rapport de 1: 100, puis placez - le dans un réfrigérateur à 4 ° C pour incuber les cellules pendant la nuit;
5, PBS rincer les cellules 3 fois, chaque fois pendant 10 min, diluer le bis - anti - alpha - actine dans un rapport de 1: 150, 37 ℃ condition de laisser 1 h;
6, rincer 3 fois avec du PBS pendant 10 min et enfin observer l'image sous un microscope à fluorescence inversé et prendre des photos.

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NARS antibody Blocking Peptide aspartyl ARNt liaison bloquante polypeptide

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Discipline opérationnelle:
Préparation du milieu de culture et des conditions de congélation:
1) Préparation du milieu rpmi - 1640, 90%; Sérum de veau foetal de haute qualité, 10%.
2) conditions de culture: phase gazeuse: air, 95%; CO2, 5%. Température: 37 ℃, l'humidité de l'incubateur est de 70% - 80%.
3) lyophilisat: 90% sérum, 10% DMSO, maintenant utilisé avec le dosage actuel, stockage d'azote liquide.
II. Traitement cellulaire:
1) réanimer les cellules: Placez rapidement le lyophilisateur contenant 1 ml de suspension cellulaire dans un bain - Marie à 37 ° C (la surface de l'eau doit être inférieure au couvercle du lyophilisateur) secouez et décongelez, déplacez - le dans un tube à centrifuger de 15 ml préparé au préalable contenant 4 ml de milieu de culture et mélangez bien. Centrifuger 4 min à 1000 RPM, éliminer le surnageant et bien souffler après addition de 1 ml de milieu. Toutes les suspensions cellulaires sont ensuite transférées pour culture dans des flacons de culture contenant 5 ml de milieu pendant une nuit. Changez de liquide le lendemain et vérifiez la densité cellulaire.
2) Passage cellulaire: si la densité cellulaire atteint 80% - 90%, la culture de passage peut être effectuée.
Pour les cellules en suspension, le passage peut se référer aux méthodes suivantes:
Méthode 1: collecter les cellules,1000RPM， Centrifuger à température normale pendant 5 minutes, éliminer le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de la solution de culture après soufflage et distribuer la suspension cellulaire dans de nouvelles boîtes contenant 8 ml de milieu de culture ou des flacons dans un rapport de 1: 2 à 1: 5.

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