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Milieu de culture de cellules musculaires lisses oesophagiennes de rat

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Vue d'ensemble

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Détails du produit

Présentation détaillée des marchandises:

Soigneusement optimisé par l'équipe technique et testé à long terme, ce produit maintient les cellules musculaires lisses de l'œsophage de rat dans un état optimal de croissance. Divers ingrédients nécessaires à la croissance des cellules musculaires lisses oesophagiennes de rat ont été inclus dans ce produit, sans ajout d'ingrédients, et peuvent être utilisés directement dans la culture in vitro de cellules musculaires lisses oesophagiennes de rat. Ce produit est destiné à une utilisation scientifique ultérieure et ne doit pas être utilisé à des fins diagnostiques, thérapeutiques, cliniques, domestiques ou autres.

Description du produit

Forme du produit: liquide

Concentration du produit: 1 ×

Spécifications du produit: 100mL / 125mL × 4

Détection des bactéries: négatif

Détection de champignons: négatif

Détection de mycoplasmes: négatif

Expériences de croissance cellulaire: bonne croissance cellulaire, morphologie normale

Teneur en endotoxines(UE/mL): ≤3

Conditions de stockage: 2 ~ 8 ℃, stockage à l'abri de la lumière

Conditions de transport: transport réfrigéré en sacs de glace

Période de validité: 3 mois

Produits de la société pour la recherche scientifique uniquement

Propriétés du produit:

Nom du produit

spécification

Forme du produit

Milieu de culture de cellules musculaires lisses oesophagiennes de rat

100mL / 125mL × 4

liquide

1.png

Rapport expérimental:

I. séparation et culture:

II. Identification par immunofluorescence:


1, dans des conditions aseptiques, retirer le tissu auriculaire de rat SD d'âge 1 - 3D, puis laver ce bloc de tissu avec du PBS 2 fois, et finalement sera d'environ 1 mm 3;
Ajouter 4 ml de digestat enzymatique (0,1% et 0,1% collagénase de type I) dans le bloc de tissu, suspendre pendant 10 s, mettre à 37 ℃ pour la digestion pendant 10 min, après quoi souffler avec un compte - gouttes pour faire une suspension unicellulaire, précipiter naturellement et recueillir le surnageant, mettre 4 ℃ après la fin de la digestion avec un milieu contenant 10% de FBS;
3, le tissu restant est ajouté 3 ~ 4 ml de digestat enzymatique, suspendu pendant 10 s, après la digestion à 37 ℃ pendant 10 min, selon la méthode ci - dessus pour recueillir le surnageant et terminer la digestion après 4 ℃ placer, répétez cette étape 2 - 3 fois jusqu'à ce que le tissu soit digéré;
4, filtrer le digestat cellulaire avec un tamis en acier inoxydable de 200 Mesh, centrifuger à 1200r / min pendant 10 min, éliminer le surnageant, les cellules précipitées sont suspendues avec du milieu contenant 10% de FBS dmem / F12, ensemencées dans des flacons de culture de 25 cm 2, placés à 37 ° C, incubés Dans un incubateur à 5% de CO2;
5, après l'application différentielle de la paroi 1H, le milieu de culture est aspiré et la culture continue comme l'expérience nécessite l'ensemencement dans une plaque de 6 puits;

1, à la croissance des myocytes auriculaires à 80% de fusion, le milieu de culture est abandonné et les cellules sont rincées 2 fois avec du PBS incubé pendant 10 min, puis les cellules sont fixées avec du paraformaldéhyde à 4% pendant 15 min à température ambiante;
2, PBS rincer les cellules 2 fois pendant 10 min, puis à 4 ° c Avec 0,1% Triton X - 100 perméable pendant 15 min;
3, PBS rincer les cellules 2 fois, chaque fois pendant 10 min, puis dans des conditions de température ambiante, fermer les cellules avec BSA 4% pendant 30 min;
4, diluer alpha - Actin un anti dans un rapport de 1: 100, puis placez - le dans un réfrigérateur à 4 ° C pour incuber les cellules pendant la nuit;
5, PBS rincer les cellules 3 fois, chaque fois pendant 10 min, diluer le bis - anti - alpha - actine dans un rapport de 1: 150, 37 ℃ condition de laisser 1 h;
6, rincer 3 fois avec du PBS pendant 10 min et enfin observer l'image sous un microscope à fluorescence inversé et prendre des photos.

Ca2 antibody Blocking Peptide anhydride carbonique 2 polypeptide bloqué

Ca3 antibody Blocking Peptide anhydride carbonique 3 polypeptide bloqué

Ca4 antibody Blocking Peptide anhydride carbonique 4 Polypeptides bloqués

Ca4 antibody Blocking Peptide anhydride carbonique 4 Polypeptides bloqués

CA6 antibody Blocking Peptide anhydride carbonique polypeptide bloqué

Ca7 antibody Blocking Peptide anhydride carbonique 7 polypeptide bloqué

Ca9 antibody Blocking Peptide anhydride carbonique 9 polypeptide bloqué

Ca10 antibody Blocking Peptide Carbon anhydride related Protein / brain Protein 10 polypeptide bloqué

Ca8 antibody Blocking Peptide Carbonic anhydride related Protein 8 polypeptide bloqué

Slc5a11 antibody Blocking Peptide hydrocarbure de sodium co - transporteur 4 - A11 polypeptide bloqué

Slc5a11 antibody Blocking Peptide hydrocarbure de sodium co - transporteur 4 - A11 polypeptide bloqué

Slc4a4 antibody Blocking Peptide hydrocarbure de sodium co - transporteur 4 - A4 polypeptide bloqué

Monkey neuronal nitric oxide synthase, ns ELISA Kit Monkey neurotype Synthesis (NS) ELISA kits autres catégories ELISA kits 48T

Monkey Glial fibrillary acidic protein, GFAP ELISA Kit Monkey Glial Fibrosis Protein (GFAP) ELISA kits autres catégories ELISA kits 48T

Complexe Rhesus Thrombin - antithrombine, kit ELISA tat Kit ELISA Monkey coagulation anticoagulant Complex (TAT) Kits ELISA autres catégories kits ELISA 48T

Monkey endothelial nitric oxide synthase, es ELISA Kit Monkey endothelial Synthesis (es) ELISA kits autres catégories ELISA kits 48T
Milieu de culture de cellules musculaires lisses oesophagiennes de ratPatu 8988t (cellules cancéreuses pancréatiques humaines) (identification Str correcte) immortalisation des cellules souches adipeuses humaines

A - 498 (cellules cancéreuses du rein humain) (identification Str correcte) immortalisation des cellules endothéliales du Corps caverneux de rat

Immortalisation des cellules musculaires squelettiques de poulet A2 (cellules cancéreuses kystiques adénoïdes humaines)

Ma - 782 (cellules de cancer du sein de souris) immortalisation des cellules épithéliales muqueuses du côlon de souris

Es - 2 (cellules cancéreuses ovariennes claires humaines) (identification Str correcte) immortalisation des fibroblastes cutanés porcins
Discipline opérationnelle:
Préparation du milieu de culture et des conditions de congélation:
1) Préparation du milieu rpmi - 1640, 90%; Sérum de veau foetal de haute qualité, 10%.
2) conditions de culture: phase gazeuse: air, 95%; CO2, 5%. Température: 37 ℃, l'humidité de l'incubateur est de 70% - 80%.
3) lyophilisat: 90% sérum, 10% DMSO, maintenant utilisé avec le dosage actuel, stockage d'azote liquide.
II. Traitement cellulaire:
1) réanimer les cellules: Placez rapidement le lyophilisateur contenant 1 ml de suspension cellulaire dans un bain - Marie à 37 ° C (la surface de l'eau doit être inférieure au couvercle du lyophilisateur) secouez et décongelez, déplacez - le dans un tube à centrifuger de 15 ml préparé au préalable contenant 4 ml de milieu de culture et mélangez bien. Centrifuger 4 min à 1000 RPM, éliminer le surnageant et bien souffler après addition de 1 ml de milieu. Toutes les suspensions cellulaires sont ensuite transférées pour culture dans des flacons de culture contenant 5 ml de milieu pendant une nuit. Changez de liquide le lendemain et vérifiez la densité cellulaire.
2) Passage cellulaire: si la densité cellulaire atteint 80% - 90%, la culture de passage peut être effectuée.
Pour les cellules en suspension, le passage peut se référer aux méthodes suivantes:
Méthode 1: collecter les cellules,1000RPM, Centrifuger à température normale pendant 5 minutes, éliminer le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de la solution de culture après soufflage et distribuer la suspension cellulaire dans de nouvelles boîtes contenant 8 ml de milieu de culture ou des flacons dans un rapport de 1: 2 à 1: 5.