Cellules embryonnaires de saumon; CHSE-214

Cellules embryonnaires de saumon; La base chse - 214 a été soigneusement optimisée par l'équipe et, après des tests à long terme, ce produit maintient un excellent état de croissance des macrophages pulmonaires primaires de rat.

Divers ingrédients nécessaires à la croissance des macrophages pulmonaires primaires de rat ont été inclus dans ce produit sans ajout d'ingrédients et peuvent être utilisés directement dans la culture des macrophages pulmonaires primaires de rat.

Précautions

Pour la recherche scientifique seulement.

Certains composants du système de culture sont des substances nocives pour la santé humaine, veuillez ne pas toucher le liquide du système de culture et l'intérieur du récipient avec des résidus de liquide du système de culture avec la peau exposée; La concentration et la nocivité de cette partie de la substance nocive sont faibles, en cas de contact, il suffit de rincer immédiatement à l'eau du robinet.

Récupération

1) préchauffer l'eau dans un bain - Marie thermostatique à 37 ° C;

2) préparer un tube de centrifugation de 15 ml, ajouter 5 ml de milieu contenant 10% de FBS, mettre dans un bain - Marie à 37 ° C et préchauffer;

3) après avoir mis des lunettes, des gants de laine épais, retirez les cellules à réanimer du réservoir d'azote liquide et Transférez - les dès que possible dans un bain - Marie thermostatique à 37 ℃.

Remise en température secoue le réservoir de congélation pour améliorer le taux de remise en température;

4) Les cellules dans le lyophilisateur fondu sont aspirées dans le tube de centrifugation préparé au préalable, après mélange, centrifuger à 1000 RPM pendant 5 min;

5) préparer un flacon de culture t - 25, écrire le nom de la cellule, la date et ajouter 4 ml de milieu;

6) après la fin de la centrifugation, abandonner le surnageant, après avoir remis les cellules en suspension avec 1 ml de milieu, transférer dans la culture de cellules T - 25, mélanger et transférer

Incubation au repos dans un incubateur CO2.

Passage (recommandation de passage cellulaire un passage deux)

1) Le passage peut être effectué lorsque la confluence cellulaire atteint plus de 85%.

2) dans l'armoire de biosécurité, ouvrez l'embouchure du flacon de culture et collectez le milieu de culture à l'intérieur du flacon;

3) après avoir ajouté 3 ml de PBS 1x stérile à l'intérieur du flacon de culture, placez le flacon de culture horizontalement afin que le PBS puisse s'infiltrer dans toute la surface de la surface inférieure du flacon de culture, aspirez le PBS;

4) Ajouter le suc digestif 1ml à l'intérieur de la bouteille, mettre dans un incubateur de CO2 à 37 ℃ et incuber pendant 1 ~ 2MIN après avoir infiltré la surface inférieure;

5) Observez si les cellules deviennent rondes et flottent sous un microscope inversé lorsque l'incubation est terminée, si tout est digéré, ajoutez 2 ml de milieu contenant 10% de FBS directement à l'intérieur du flacon de culture, aspirez la suspension dans un tube à centrifuger de 15 ml;

① préparer un tube de centrifugation stérile de 15 ml, ajouter 2 ml de milieu contenant 10% de FBS;

② inhaler les cellules digérées dans ① pour la neutralisation à l'intérieur du tube de centrifugation (éviter de souffler ③); Ajouter 1 mL au flacon de culture préalablement digéré poursuivre la digestion pendant environ 2 min, tapoter le flacon de culture et environ 95% des cellules sont déprimées.

6) centrifugation à 1000rpm pendant 5min;

7) préparer deux nouveaux flacons de culture t - 25, chacun avec 4 ml de milieu.

8) Une fois la centrifugation terminée, abandonner le surnageant et remettre en suspension les cellules avec 2 ml de milieu, transférer les cellules remises en suspension dans 2 flacons de culture t - 25 de 1 mL chacun;

9) placez le flacon de culture horizontalement et après mélange sous commotion, placez le flacon de culture à 37 ° C dans un incubateur à 5% de CO2 pour la culture.

Lyophilisation (lyophilisation cellulaire recommande de congeler une unité par flacon de t25)

1) ~ 6) Étapes de passage de référence

7) Une fois la centrifugation terminée, le surnageant est abandonné et les cellules sont remises en suspension avec 1 ml de lyophilisat pour précipitation, puis transférées dans un lyophilisateur de 1,8 ml;

8) transférer le tube de congélation dans une boîte de refroidissement programmée remplie d'alcool isopropylique, puis dans un réfrigérateur à - 80 ℃ pendant la nuit pour refroidir;

9) Le deuxième jour, retirez le tube de congélation dans la boîte de refroidissement séquentiel où le refroidissement est terminé et Transférez - le dans le réservoir d'azote liquide dès que possible pour le conserver.

Récepteur de produit final glycosylé avancé(AGER)Protéines recombinantesRécepteur spécifique au produit final de glycosylation avancée recombinant (AGER)

EPCAM protéine humainePersonnes reconstituéesEpCAM / TROP-1 / TACSTD1Les protéines

PNR1Personnes reconstituéesNeuropiline-1 / NRP1Les protéines(Fc)Étiquettes) Protéines

Protéine HA H1N1Grippe A recombinanteH1N1 (A/WSN/1933)HémagglutinineHA1 (hémagglutinine)Les protéines

fairePersonnes reconstituéesLALBA / Alpha-lactalbumineLes protéines(Fc)Étiquettes) Protéines

Facteur de stimulation des colonies de macrophages granulocytes de rat(GMCSF/CSF2)Kits de réactifs , nom anglais:Kit d'ELISA GMCSF/CSF2

Kit d'ELISA pour le facteur aocrine des kératinocytes de souris (KAF) / Kit d'ELISA pour l'amphiréguline (AR)Facteurs endocriniens des kératinocytes de souris(KAF)Kits de réactifs/Double tonine(AR)Kits de réactifs

Mousebonemorphogeneticproteins, BMPsELISAKitProtéines formant os de souris(BMP)Kits de réactifs96T/48TSous - assemblage importé

CLIAKitforHumanpaxillin, PaxELISAKitProtéine de pile humaine

Isotopes[γ32P]ATPKit d'amplification de microsatellite marqué kinase20Une fois

ELISAKitPIAb-IgG/IgMrat0Lipoylinositol anticorpsIgG / IgM

Kit de transenzyme de souris Kit de transenzyme de souris Spécifications modèle:96T/48T Kit de transenzyme de souris, spécifications modèle:96T/48T, source: kits (sous - ensembles importés), alias du produit: kits de transférase de souris, souris transféraseeisaKits de réactifs Conditions de conservation:2 - 8℃ Durée de conservation:6Mois.

Kit de transférase à base de souris Kit de transférase à base de souris Spécifications modèle:96T/48T Kit de transférase à base de souris, spécifications modèle:96T/48T, source: kits (sous - ensembles importés), alias du produit: kits de transférases à base de souris, transférases à base de souriseisaKits de réactifs Conditions de conservation:2 - 8℃ Durée de conservation:6Mois.

Kit de facteur de croissance épidermique de souris Kit de facteur de croissance épidermique de souris Spécifications modèle:96T/48T Kit de facteur de croissance épidermique de souris, spécifications modèle:96T/48T, source: Kit (sous - ensemble importé), alias du produit: kit de facteur de croissance épidermique de souris, facteur de croissance épidermique de souriseisaKits de réactifs Conditions de conservation:2 - 8℃ Durée de conservation:6Mois.

Trousse de Corynebacterium murinum Trousse de Corynebacterium murinum Spécifications modèle:96T/48T Souris corynebacter Kit, spécifications modèle:96T/48T, source: kits (sous - ensembles importés), alias du produit: kits de Corynebacterium murinum, Corynebacterium murinumeisaKits de réactifs Conditions de conservation:2 - 8℃ Durée de conservation:6Mois.

Hexokinase de sourisELISA (HK)Kits de réactifs96T/48T

Kit ELISA de sorbitol déshydrogénase humaine (SDH)Déshydrogénase humaine(SDH)Kits de réactifs

ADN humainProtéine de liaison, DBPELISAKitpersonneADNProtéines de liaison(DBP)Kits de réactifs96T/48TSous - assemblage importé

HumanAi-glucoprotéine 210, GP210Kit glycoprotéine anti - RIB humaine210Anticorps(gp210)Spécifications du kit:96T/48T

Lyroxylase végétale(lysylhydroxylase)Kit de quantification colorimétrique active20Une fois

HumanVitamine A,Vaelisat tractionpersonneA(VA)Spécifications du kit:96T/48T

PAnticorps contre la substance

Lier les molécules d'adhésion2Anticorps

Cellules embryonnaires de saumon; CHSE-214PNR1Personnes reconstituéesNeuropiline-1 / NRP1Les protéines(Fc)Étiquettes) Protéines

Récepteur de produit final glycosylé avancé(AGER)Protéines recombinantesRécepteur spécifique au produit final de glycosylation avancée recombinant (AGER)

fairePersonnes reconstituéesLALBA / Alpha-lactalbumineLes protéines(Fc)Étiquettes) Protéines

EPCAM protéine humainePersonnes reconstituéesEpCAM / TROP-1 / TACSTD1Les protéines

Protéine HA H1N1Grippe A recombinanteH1N1 (A/WSN/1933)HémagglutinineHA1 (hémagglutinine)Les protéines

Opération stérile:La culture cellulaire doit être effectuée dans un environnement stérile, la stérilisation par irradiation ultraviolette de la table ultra - propre est nécessaire avant utilisation, l'incubateur est nettoyé régulièrement. Les expérimentateurs doivent changer leurs vêtements de travail, leurs couvre - chaussures, porter des masques et des gants.

Stérilisation des équipements:La verrerie, les instruments métalliques, etc. peuvent être stérilisés à la vapeur à haute pression, les produits en plastique peuvent être stérilisés à l'oxyde d'éthylène ou acheter des produits stérilisés.

Sélection des réactifs:Les réactifs tels que le fluide de culture, le sérum, le tampon utilisés doivent être stériles, non contaminés et doivent être testés stérilement avant utilisation. Différentes cellules ont des différences dans les exigences de composition du fluide de culture et le fluide de culture approprié doit être sélectionné par type de cellule.

Conditions de culture:La température de culture appropriée pour la plupart des cellules de mammifères est de 37 ° C et l'écart doit être contrôlé à ± 0,5 ° c. L'incubateur doit maintenir une bonne étanchéité, vérifier régulièrement la concentration et le débit de gaz, et la culture cellulaire nécessite généralement 5% de CO2 pour maintenir le pH du liquide de culture stable. L'humidité à l'intérieur de l'incubateur doit être maintenue à environ 95%.

‌Observations quotidiennes:La morphologie cellulaire, l'état de croissance et les changements de couleur du liquide de culture sont observés quotidiennement au microscope.

Tests réguliers:Les cellules sont régulièrement testées pour la contamination par mycoplasmes, bactéries, champignons, etc.