Milieu spécifique pour cellules endothéliales microvasculaires graisseuses primaires de lapin

Étapes de l'expérimentation cellulaire:

I. réanimation cellulaire

1. Placez des articles tels que la pipette de 10ml, le pistolet de pipette, la tête de pistolet de 1ml, le tube de centrifugation de 50ml, la bouteille de culture de t25, la lampe d'alcool, le cylindre de liquide de rebut et d'autres dans la table de travail ultra - propre, la lampe UV illuminée pendant 30min et ré - aérée pendant 30min;

2. Préchauffer le milieu de culture;

3. Mettre dans la table ultra - propre après la désinfection avec de l'alcool à 75%;

4. Retirer les cellules stockées congelées du réservoir d'azote liquide;

5. Mettez des gants jetables dans un bain - Marie 37 ℃ et secouez - les rapidement pour les faire fondre;

6. Mettre dans la table ultra - propre après la désinfection avec de l'alcool à 75%;

7. Aspirer 9 ml de milieu dans un tube à centrifuger de 50 ml;

8. Aspirer la suspension cellulaire décongelée dans le tube de centrifugation avec 1 ml de tête de pistolet;

9.1000r/min, Centrifugation pendant 5 min;

10. Mettre dans le banc ultra - net après la désinfection avec de l'alcool à 75%;

11. Aspirer le surnageant;

12. Aspirer 1 ml de milieu pour remettre les cellules en suspension, transférer la suspension cellulaire à l'intérieur du flacon de culture, compléter avec la bonne quantité de milieu, agiter doucement le flacon de culture pour que les cellules soient distribuées uniformément et bien étiquetées;

13. Observer la densité cellulaire et l'état de la réanimation au microscope;

14.replacez les cellules dans l'incubateur de dioxyde de carbone et laissez - les incuber.

Propriétés de la marchandise:

Le milieu de culture de cellules endothéliales microvasculaires adipeuses primaires de lapin est soigneusement optimisé par l'équipe et, après des tests à long terme, ce produit maintient un excellent état de croissance des cellules endothéliales microvasculaires adipeuses primaires de lapin.

Divers ingrédients nécessaires à la croissance des cellules endothéliales adipeuses microvasculaires primaires de lapin ont été inclus dans ce produit, sans ajout d'ingrédients, et peuvent être utilisés directement dans la culture des cellules endothéliales adipeuses microvasculaires primaires de lapin.

Précautions:

Pour la recherche scientifique seulement.

Certains composants du système de culture sont des substances nocives pour la santé humaine, veuillez ne pas toucher le liquide du système de culture et l'intérieur du récipient avec des résidus de liquide du système de culture avec la peau exposée; La concentration et la nocivité de cette partie de la substance nocive sont faibles, en cas de contact, il suffit de rincer immédiatement à l'eau du robinet.

Étapes de culture cellulaire:

Réanimation cellulaire:

Retirez les cellules stockées congelées du réservoir d'azote liquide et mettez - les rapidement dans un bain - Marie à 37 ° C pour les décongeler.

Après décongélation, les cellules sont transférées dans une boîte de pétri contenant du milieu frais, en agitant doucement pour répartir uniformément les cellules.

Incuber dans un incubateur à 37°c, 5% CO 2.

Échanges cellulaires:

Aspirez ou versez l'ancien liquide de culture à l'intérieur de la boîte de pétri.

Ajouter le tampon PBS et rincer doucement les cellules pour éliminer les débris en suspension à la surface des cellules, en répétant plusieurs fois.

Ajouter le nouveau milieu.

Passage cellulaire:

Lorsque les cellules atteignent 80% ~ 90%, le passage est effectué.

Aspirer ou verser l'ancienne solution de culture dans le flacon et rincer avec du tampon PBS.

Ajouter le suc digestif et agiter doucement pour permettre au suc digestif de circuler sur toutes les surfaces cellulaires.

Placez le flacon de culture dans un incubateur à 37 ° C pendant quelques minutes au repos et observez les changements cellulaires. Lorsque l'espace entre les cellules augmente, l'addition du liquide de culture contenant le sérum termine la digestion.

Les cellules soufflées en font une suspension, transférée dans un tube de centrifugation pour centrifugation.

Défausser et ajouter la bonne quantité de solution de culture cellulaire pour remettre les cellules en suspension.

Doser proportionnellement dans de nouvelles boîtes de pétri, compléter avec du milieu frais.

Bien marquer et incuber dans un incubateur à 37 ° C, 5% de CO2.

Lyophilisation des cellules:

Les cellules en phase de croissance logarithmique sont sélectionnées pour la Cryoconservation.

Transférez les cellules dans un tube de centrifugation pour centrifuger et défausser le limpide.

Ajouter la bonne quantité de lyophilisat (par exemple 90% de milieu + 10% de DMSO) et souffler doucement les cellules suspendues.

Transférez les cellules dans un tube de Cryoconservation, placez - les dans la boîte de refroidissement du programme après le marquage, puis mettez - les au réfrigérateur à - 80 ℃ pour les congeler. Après quelques heures ou toute la nuit, transférer au réservoir d'azote liquide pour la conservation.

Produits vendus par la société:

Facteur de croissance des fibroblastes5(FGF5)Protéines recombinantesFacteur de croissance de fibroblastes recombinant 5 (FGF5)

FCGR3A protéine humainePersonnes reconstituéesCD16a / FCGR3ALes protéines(176 Val, Son & AVI)Étiquettes), biotinylé

TWSG1Souris recombinantesTWSG1Les protéines(SaÉtiquettes) Protéines

Protéine CD83 CynomolgusSinge Cynomolgus reconstituéCD83Les protéines(SaÉtiquettes) et

JAM3Personnes reconstituéesJAM3 / JAM-CLes protéinesprotéines

Tyraminase de rat(TYR)Kits de réactifs , nom anglais:Kit TYR ELISA

Kit ELISA pour acides gras libres de souris (FFA)Acides gras libres de souris(FFA)Kits de réactifs

Ratai-cardiolipinaibodyIgG, ACA-IgGELISAKitRat résistant au cœur0Anticorps lipidiquesIgG (ACA-IgG)Kits de réactifs Sous - assemblage importé

CLIAKitforF-TESTO (Testoterone humaine libre) ELISAKitTesticules libres de l'homme

Peroxydase cellulaire(peroxydase)Kit de quantification colorimétrique active20Une fois

Rathorse, abandonnerCo - récepteur de grossesse chez le rat(PGR)Kits de réactifs

Acyltransférase (AAT) boîte de test Spectrophotométrie visible 50Tubes/ 48L'échantillon

Lipoprotéines estérases (LPL) & Lipase hépatique (HL) boîte de test Spectrophotométrie visible 50Tubes/ 48L'échantillon

Triglycérides (TG) boîte de test de contenu Spectrophotométrie visible 50Tubes/ 48L'échantillon

Sérum total (TC) boîte de test de contenu Spectrophotométrie visible 50Tubes/ 48L'échantillon

Dipeptidylpeptidase de souris Ⅳ(DPP)ⅣELISAKits de réactifs

Kit ELISA pour la sérine protéase humaine (PRSS)Protéase de soie humaine(PRSS)Kits de réactifs

HumanProthrombine anormale, APTELISAKitAnomalie humaine(APT)Kits de réactifs Sous - assemblage importé

Gaze de régulation du signal de l'apoptose humaine1, ASK-1Kit kinase de régulation du signal d'apoptose humaineI(ASK-1)Kits de réactifs

Kit de séparation de retrait grossier de chloroplastes de feuilles de plantes20Une fois

Inhibiteurs de la métalloprotéinase3,TIMP-3ELISAKitFacteur inhibiteur de la métalloprotéase matricielle humaine3(TIMP-3)Kits de réactifs

SGK196Anticorps contre les protéines

Protéine kinase phosphoryléeCAnticorps

Milieu spécifique pour cellules endothéliales microvasculaires graisseuses primaires de lapinTWSG1Souris recombinantesTWSG1Les protéines(SaÉtiquettes) Protéines

Facteur de croissance des fibroblastes5(FGF5)Protéines recombinantesFacteur de croissance de fibroblastes recombinant 5 (FGF5)

JAM3Personnes reconstituéesJAM3 / JAM-CLes protéinesprotéines

FCGR3A protéine humainePersonnes reconstituéesCD16a / FCGR3ALes protéines(176 Val, Son & AVI)Étiquettes), biotinylé

Protéine CD83 CynomolgusSinge Cynomolgus reconstituéCD83Les protéines(SaÉtiquettes) et