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Fourniture de kits de détection du pH cellulaire

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Vue d'ensemble

Kit de détection du pH cellulaire (fluorescence bleue) précautions d'utilisation 1. Bouchon à vis microréactif tube contenant des réactifs s'il vous plaît centrifuger brièvement avant d'ouvrir le couvercle, recueillir le liquide sur la paroi interne du couvercle au fond du tube, éviter l'arrosage du liquide lors de l'ouverture du couvercle. Avant utilisation, le produit est d'abord repris à température ambiante et une courte centrifugation permet de concentrer la solution de DMSO sur le fond du tube. 2. La sonde de pH est une solution de DMSO, l'état de coagulation à la température ambiante en hiver lorsque la température de l'air est basse, très facile à adhérer à la paroi du tube, paroi de la tête d'aspiration. Notez que la dissolution de la chaleur est nécessaire, la tête d'aspiration doit également être placée dans l'incubateur pour le préchauffage, sans quoi il est facile de solidifier à nouveau dans la paroi interne de la tête d'aspiration pour produire des pertes.

Détails du produit

Introduction aux kits de détection du pH cellulaire

Température de conservation: 2 - 8 ℃ protégé de la lumière
Précautions
1. Le kit de test de pH cellulaire (fluorescence bleue) ne peut pas être conservé à long terme à - 20 ℃. Évitez le gel - dégel répété.
2. La sonde a est une solution de DMSO, l'état de coagulation en hiver lorsque la température de l'air est basse, très facile à adhérer à la paroi du tube, paroi de la tête d'aspiration. Notez la nécessité de chauffer pour fondre, devenir liquide après centrifugation au fond du tube pour rouvrir le couvercle.
Validité: 6 mois
Méthode de détection: cytométrie en flux / / confocalisation laser / Microscopie à fluorescence
Échantillon applicable: cellules
Application du produit: cytomètre en flux / / confocation laser / Microscopie à fluorescence
Préparation des instruments
1. Cytométrie en flux ou microscopie confocale ou à fluorescence au laser
2. Centrifugeuse
3. Pipette
4. Réfrigérateur
5. Boîte à glace
Préparation des réactifs
1. Tampon PBS 2. Hbss 3. (alternative) Sel de sodium de nigericine (produit connexe BB - 94002)
Préparation des consommables
1. Tube de centrifugation
2. Tête d'aspiration
3. Gants jetables

Kit de détection du pH des cellules lysosomales (fluorescence bleue) précautions d'emploi

1. Bouchon à vis micro réactif tube de réactif emballé s'il vous plaît centrifuger brièvement avant d'ouvrir le couvercle, recueillir le liquide sur la paroi intérieure du couvercle au fond du tube, éviter l'arrosage du liquide lors de l'ouverture du couvercle. Avant utilisation, le produit est d'abord repris à température ambiante et une courte centrifugation permet de concentrer la solution de DMSO sur le fond du tube.
2. La sonde de pH est une solution de DMSO, l'état de coagulation à la température ambiante en hiver lorsque la température de l'air est basse, très facile à adhérer à la paroi du tube, paroi de la tête d'aspiration. Notez que la dissolution de la chaleur est nécessaire, la tête d'aspiration doit également être placée dans l'incubateur pour le préchauffage, sans quoi il est facile de solidifier à nouveau dans la paroi interne de la tête d'aspiration pour produire des pertes.
  Les kits de détection du pH cellulaire détectent le pH à l'intérieur des cellules à l'aide d'un indicateur de pH ou d'une sonde de détection du pH. Il existe généralement plusieurs façons dePour:
Méthode de sonde fluorescente:
Certains kits de pH cellulaire utilisent des sondes de détection du pH marquées par fluorescence qui peuvent se lier aux ions hydrogène (h⁺) à l'intérieur de la cellule. L'intensité de fluorescence de la sonde varie en fonction de la variation du pH. En mesurant les variations de fluorescence, il est possible d'extrapoler le pH à l'intérieur des cellules.
Par exemple, les sondes fluorescentes couramment utilisées sont snarf - 1 et bcecf, qui changent d'intensité de fluorescence et de longueur d'onde d'émission dans différents environnements de pH, analysés à l'aide d'appareils tels que la microscopie confocale au laser ou le spectrophotomètre à fluorescence.
Méthode de l'indicateur de ph:
Une autre méthode courante consiste à utiliser des indicateurs de pH qui changent de couleur à différents ph. Cette méthode est généralement utilisée pour l'observation au microscope ou en combinaison dans un cytomètre de flux. Par exemple, les indicateurs de pH tels que le rouge de phénol peuvent prendre différentes couleurs avec le changement de pH dans le milieu de culture cellulaire.
Méthode de cytométrie de flux (FACS):
En utilisant la cytométrie de flux combinée à une sonde fluorescente, le pH des cellules individuelles est mesuré. Cette méthode permet une détection de pH à haut débit dans une population cellulaire.
Méthode potentiométrique:
La loi du potentiel utilise une électrode de pH ou une électrode sélective ionique (ISE) pour mesurer directement la variation du potentiel à l'intérieur de la cellule et ainsi calculer le pH.

Questions fréquemment posées:

Q1: Quel est le principe généralement utilisé pour les tests de pH cellulaire?
A1: on utilise principalement des sondes fluorescentes sensibles au pH. Ces sondes changent d'intensité de fluorescence ou de longueur d'onde d'émission à différentes acidités et alcalinités, reflétant ainsi avec précision le pH à l'intérieur des organites (tels que les lysosomes) ou du cytoplasme.
  Q2: pourquoi le pH des cellules doit - il être testé?
A2: le pH intracellulaire est un paramètre physiologique clé, il affecte l'activité enzymatique, la prolifération cellulaire, l'endocytose, l'apoptose et de nombreuses autres activités vitales. Les anomalies de pH sont étroitement liées aux processus pathologiques tels que les tumeurs, les maladies neurodégénératives, etc.
  Q3: Quelles sont les applications courantes des kits de test de pH cellulaire?
A3: largement utilisé pour étudier l'autophagie cellulaire (surveillance de l'acidification des lysomes autophagiques), le métabolisme des cellules tumorales (effet waborg), les changements de pH au cours de l'endocytose médiée par les récepteurs, et l'impact des médicaments sur l'environnement intracellulaire, etc.
  Q4: Quelles sont les principales considérations lors de la détection du pH cellulaire?
A4: les points clés comprennent: s'assurer que la courbe d'étalonnage est précise, éviter l'extinction de la sonde, maintenir la stabilité de l'environnement de culture (par exemple, la concentration de co₂) pendant le test et mettre en place des contrôles positifs et négatifs raisonnables pour assurer la fiabilité des résultats.
  Q5: Comment choisir la sonde de test de pH cellulaire appropriée?
A5: les sondes spécifiques doivent être sélectionnées en fonction des organites cibles (p. ex., cytoplasme, lysosomes) et en fonction de la configuration du laser et du filtre de l'équipement expérimental (p. ex., Microscopie à fluorescence, cytométrie en flux), la sonde à la longueur d'onde d'excitation / émission appropriée doit être sélectionnée.