Kit de test génétique pour rapport luciférase luciférase de Firefly en une étape

Les tests génétiques sont un outil important dans le domaine de la recherche moderne en biologie moléculaire pour analyser les interactions potentielles des éléments CIS (tels que les promoteurs, les intensificateurs et les silences, entre autres) et des facteurs de transaction dans les régions latérales des gènes structuraux.
La luciférase de Firefly est largement utilisée dans des domaines tels que la régulation génétique et le dépistage de médicaments. La luciférase de luciole est une protéine d'un poids moléculaire d'environ 61 KD qui, en présence d'ATP, d'ions magnésium et d'oxygène, catalyse la fluorescéine pour produire de la fluorescéine oxydée (oxyluciferine) qui, au cours de l'oxydation de la fluorescéine, produit un signal lumineux, comme indiqué dans la figure 1.
Le signal lumineux de ce kit est instantané et doit être détecté immédiatement après l'ajout du liquide de travail. La demi - vie du signal lumineux est d'environ 5 minutes.

Composants du produit:

1, configuration du liquide de travail
(1) ramener tous les composants à température ambiante.
(2) diluer suffisamment le composant B (réservoir) avec le composant a, formuler dans un liquide de travail luciférase de luciole à 0,2 mg / ML, commotion au vortex, assurer un mélange adéquat.
Remarque: le liquide de travail luciférase de Firefly ne peut pas être congelé et dégelé à plusieurs reprises, si une seule expérience est moins utilisée, il est recommandé de le distribuer en une seule utilisation. A température ambiante, l'activité diminue d'environ 10% après 3 h de configuration du liquide de travail et d'environ 25% après 5 h.
2, détection de valeur de Luminescence chimique
(1) Retirez la plaque de culture cellulaire de l’incubateur et incuber à température ambiante pendant 20 min pour la ramener à température ambiante (22 - 25 °C).
(2) Ajouter un volume égal de liquide de travail luciférase de luciole avec le milieu de culture à la plaque de culture, mélanger.
(3) incuber à température ambiante pendant 5 min.
Remarque: le temps d'incubation peut être ajusté de manière appropriée avec le type et le nombre de cellules.
(4) Les valeurs sont lues avec un étalon enzymatique multifonction ou un chimiluminescent (paramètres de l'instrument: temps de dosage de 10 s, intervalle de dosage de 2 s).

- 80 ° C de conservation. Le composant B est recommandé d'utiliser au préalable de l'eau stérile configurée comme un réservoir de 2 mg / ML, le composant a et le composant B configuré comme un réservoir, selon l'expérience
Besoin de petites quantités de fractionnement. Le liquide de travail de détection est recommandé pour une utilisation actuelle, évitant la congélation et la dégel répétées.

1, veuillez centrifuger momentanément le produit au fond du tube avant utilisation, puis effectuer une expérience ultérieure.
La longueur d'onde zui forte de la bioluminescence catalysée par la luciférase de Firefly est de 560 nm.
3, pour éviter les interférences entre les trous, il est recommandé d'utiliser une plaque de trou blanche imperméable à la lumière.

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