Kits de détection de prolifération cellulaire MTS

Kits de détection de prolifération cellulaire MTS(MTS cell proliferation Assay Kit) est un kit commun de détection de la prolifération cellulaire et de la toxicité. Le MTS est un nouveau sel de tétrazole qui peut être réduit par la succinate déshydrogénase dans les mitochondries des cellules vivantes en un produit soluble dans l'eau, le formazan. Le méthyl 臜 a une absorption spécifique à 490 nm, de sorte que la prolifération cellulaire peut être reflétée par la détermination de l'Absorbance à 490 nm. Plus les cellules prolifèrent rapidement, plus les valeurs d'Absorbance sont élevées.
Par rapport aux kits MTT communs, ce kit n'a pas besoin d'éliminer le milieu de culture original, ni d'utiliser un solvant supplémentaire pour dissoudre le Formol ഐ, il est plus pratique à utiliser, tout en évitant les erreurs expérimentales causées par l'élimination d'une partie du formol ഐ lors de l'élimination du milieu. Ce kit est très flexible à utiliser et l'incubation peut être poursuivie après la détection pour un meilleur rendu des couleurs. En outre, ce kit présente également les avantages d'une large plage linéaire, d'une sensibilité élevée et d'une utilisation sûre.
Composants du produit:

Opérations expérimentales:
1, formule de liquide de travail MTS:
Mélanger MTS solution et PMS solution dans un rapport de 20: 1 est un liquide de travail MTS. Le liquide de travail MTS formulé doit être conservé à - 20 ℃ à l'abri de la lumière si nécessaire, à ce stade, il est recommandé de le doser en portions appropriées pour éviter le gel et la dégel répétés.
Remarque: MTS solution et PMS solution voient que la lumière se décompose facilement, de sorte qu'elle doit être protégée de la lumière pendant la formulation et l'utilisation (peut être enveloppée dans du papier étain). Pour une utilisation fréquente, il est souhaitable de conserver ce kit à 4°C, moment auquel le liquide de travail MTS doit être formulé à chaque fois avant la détection. Les liquides de travail MTS non utilisés doivent être conservés à - 20°C à l'abri de la lumière.
2, culture cellulaire:
Les cellules sont ensemencées dans des récipients appropriés tels que des plaques à puits. Pour les plaques de 96 puits, il est recommandé d'ajouter 100 µl de milieu par puits, tandis qu'il est recommandé d'ensemencer 5 - 100 × 10 par puits.3Une cellule. Les cellules du Groupe expérimental peuvent être traitées avec le médicament d'intérêt selon la conception expérimentale pendant un certain temps, lorsque des groupes blancs supplémentaires (contenant uniquement le milieu de culture) et des groupes témoins (contenant le milieu de culture, les cellules et le solvant du médicament) doivent être établis.
Remarque: le nombre spécifique de cellules ensemencées par puits peut être ajusté en fonction de l'espèce cellulaire spécifique.
3, incubation MTS:
20 µl de liquide de travail MTS sont ajoutés par puits, puis placés dans un incubateur cellulaire pour incuber pendant 1 à 4 h.
Remarque: le temps d'incubation MTS peut être ajusté en fonction de l'expérience spécifique.
4, détection:
L'Absorbance (A) est déterminée à 490 nm avec un étalon enzymatique. Sans filtre 490 nm, vous pouvez choisir d'utiliser un filtre 450 - 540 nm.
Analyse des données:
La formule de calcul de la survie cellulaire est la suivante:
Survie cellulaire (%) = [(AGroupe expérimental- AGroupe vide) / (AGroupe contrôle- AGroupe vide)] × 100

1, lorsque les cellules sont cultivées pendant une longue période, les trous de bordure de la plaque de 96 puits sont sujets à des problèmes d'évaporation de liquide. Il est recommandé d'abandonner un cercle autour de la plaque 96 puits, en ajoutant de l'eau stérile, du milieu de culture ou du PBS; Dans le même temps, il est possible de placer la plaque 96 puits dans l'incubateur à proximité de la source d'eau.
2, MTS solution et PMS solution à basse température se solidifiera, s'il vous plaît revenir à la température ambiante ou 37 ℃ bain d'eau à l'avance pendant environ 10 minutes avant l'utilisation jusqu'à la fusion complète de Wan après l'utilisation.
MTS solution et PMS solution sont sensibles à la lumière, si elles sont conservées à 4 ° C, la couleur de la solution peut légèrement changer, ce changement peut augmenter la valeur de l'Absorbance de fond, mais n'affecte pas le résultat final de l'expérience.
Si elle n'est pas détectée à temps, la réaction peut être terminée par l'ajout de 25 UL de SDS à 10% par puits après la fin de l'incubation à l'étape 3. La plaque de trou après traitement SDS peut être placée
Conserver à l'abri de la lumière dans l'incubateur pendant 18 heures au maximum.
5, pour votre sécurité et votre santé, Veuillez porter des vêtements expérimentaux et utiliser des gants jetables.

Conserver le kit à -20°C à l'abri de la lumière et de l'humidité, stable pendant 1 an. Pour une utilisation fréquente, le kit peut être stocké à 4°C à l'abri de la lumière et de l'humidité, stable pendant 6 semaines.