Streaming absolu comptage microsphères

NégociableMise à jour sur05/06

Modèle

Nature du fabricant: producteurs

Catégorie de produit

Lieu d'origine

Consulter en ligne

Vue d'ensemble

Les Microsphères de comptage absolu en flux sont maintenant largement utilisées dans les expériences de comptage cellulaire ainsi que dans la recherche sur la progression de la maladie, en particulier dans le domaine de la recherche sur les cellules souches.

Détails du produit

Streaming absolu comptage microsphères

Description du produit

Description

L'analyse de comptage cellulaire par cytométrie de flux permet de quantifier rapidement les caractéristiques des cellules et les microsphères absolues de comptage cellulaire sont maintenant largement utilisées dans les expériences de comptage cellulaire ainsi que dans la recherche sur la progression de la maladie, en particulier dans le domaine de la recherche sur les cellules souches. Le flacon de ce produit contient des microparticules fluorescentes finement colorées qui ont une intensité de fluorescence optimale et un large spectre d'émission dans plusieurs canaux (FITC, PE, PE - Cy5). La surface hydrophile des microparticules élimine la production de dimères, garantissant la précision des comptages validés par le processus d'analyse, ainsi que la fiabilité des comptages absolus par cytométrie en flux.
L'obtention d'un nombre absolu de cellules est généralement obtenue par deux méthodes, l'une combinant les concentrations cellulaires provenant des tests effectués dans les instruments d'analyse cellulaire avec les données de population cellulaire issues des analyses de comptage cellulaire par cytométrie en flux (Test multiplateforme) et l'autre incorporant des étalons internes de comptage de microsphères dans les échantillons cellulaires en flux (Test monoplate - forme). La méthode de détection à plate - forme unique est très simple, évitant les différences entre les laboratoires, de sorte que le comptage absolu des cellules avec des microsphères de référence fluorescentes est l'une des méthodes de comptage absolu à plate - forme unique de cytométrie en flux largement reconnues par les chercheurs cliniques et scientifiques.

Application

Nombre absolu de lymphocytes T, nombre absolu de cellules souches hématopoïétiques CD34 +, nombre absolu de réticulocytes, nombre absolu de cellules tumorales circulantes, etc.

Concentration

6.4x107Microparticules / ML ± 5%

mode d'emploi

Exigences relatives aux échantillons:
1, avec l'héparine anticoagulant sang prélevé Guan pour recueillir plus de 200 UL d'échantillons.
2, l'échantillon doit être stocké à la température ambiante et éviter les tremblements, et utilisé dans les 24 heures après la collecte de sang.
3, protection contre la lumière après la coloration de l'échantillon est conservé à 2 - 8 ℃, dans les 24 heures sur l'appareil pour la détection.
4, si l'échantillon a la contamination microbienne, le sang lipidique, la coagulation et la mauvaise viabilité cellulaire, il devrait être évité, sauf si l'échantillon est irremplaçable, s'il vous plaît noter dans le rapport des résultats.

Matériel à apporter soi - même:
1, agent hémolytique pour fractions de cellules sanguines Xi J
2, réactif d'anticorps de flux
3, héparine anticoagulant prélèvement sanguin Guan
4, gamme de mesure pour 20ul, 100ul, 1ml pipette et tête d'aspiration jetable
5, oscillateur Scroll
6, cytomètre de flux

Étapes opérationnelles:
1, l'utilisation de la technologie de pipetage inverse pour aspirer l'échantillon mélangé 50ul, ajouter le compte absolu Guan fond, l'extrémité avant de la pipette pour éviter de toucher le fond du tube, éviter le sang de toucher la partie supérieure de la paroi du tube.
2, ajouter une certaine quantité de réactif d'anticorps de flux au fond du tube de flux.
3, couvrez le capuchon du tube, mélangez doucement par Vortex pendant environ 3 secondes, la température ambiante et la réaction à l'abri de la lumière pendant 25 minutes.
4, ajouter 450ul de fractions de cellules sanguines XI à l'intérieur du tube avec hémolyse Ji, couvrir le bouchon du tube, mélanger doucement au Vortex pendant environ 15 secondes, la température ambiante réagit à l'abri de la lumière pendant 10 minutes. Sans lavage, à examiner.
5, mélanger doucement par Vortex pendant environ 10 secondes, détection de la machine supérieure.
La méthode d'analyse exemplaire ci - dessous est donnée à titre d'exemple pour un échantillon de sang périphérique adulte normal, un kit d'anticorps monoclonaux fluorescents CD3 - FITC / CD8 - PE / CD45 - percp / CD4 - APC (cytométrie en flux).
Tout d'abord, un diagramme de dispersion CD45 / SSC a été établi, la population de lymphocytes montrant une expression élevée de CD45 et une expression faible de SSC, entourée de portes irrégulières, voir figure 1:

Figure 1: encercler la porte lymphocytaire dans le diagramme de dispersion CD45 / SSC

Deuxièmement, choisissez d'afficher les cellules intraportales lymphocytaires, définissez un diagramme de dispersion CD3 / SSC. Encerclez le CD3 +, voir figure 2.

Figure 2: encerclement des lymphocytes CD3 + dans le diagramme de dispersion CD3 / SSC

Sélectionnez afficher les cellules intra - porte lymphocytaire, définissez la limite quadruple de la carte de dispersion CD3 / CD4. Les cellules bismâles CD3, CD4 sont des lymphocytes T CD4 +, voir figure 3.

Figure 3: configuration du diagramme de dispersion CD3 / CD4 pour la porte limite quadruple

Enfin, sélectionnez afficher toutes les cellules, définissez le diagramme de dispersion CD3 / CD8, Encerclez les microsphères de comptage absolu, voir figure 4.

Figure 4: diagramme de dispersion CD3 / CD8 encerclant les microsphères de comptage absolu

Si vous n'utilisez pas de logiciel automatique de comptage absolu, vous pouvez compter manuellement avec l'équation suivante:
Logarithme absolu de la Sous - population lymphatique (cellules / UL) = (nombre de cellules de la Sous - population lymphatique dans la région × valeur indiquée pour les microsphères) / (nombre absolu de microsphères dans la région × volume de l'échantillon)

Méthodes de stockage / conservation

2 - 30 ℃ conserver, ne jamais congeler, date d'expiration 5 ans.

indicateurs techniques

Composant	Microsphères de polystyrène teintes fluorescentes multiples
Taille des microsphères	5 µm
couleur	Fluorescence verte (488 / 525 nm)
	Fluorescence Rouge (535 / 575 nm)
	Fluorescence proche infrarouge (635 / 660 nm)
Concentration	6,4 × 107Microparticules / ML ± 5%
Densité	1,05 g/cm³
Tous les temps	CV à 3%
additif	0,05% Tween - 20 Dispersant / tensioactif, conservateur 2mm

Précautions

1, ne jamais congeler.
2, avant d'utiliser l'effet ultrasonique commotion 10S zuijia.

Domaines de recherche
Domaines de recherche	Découverte de médicamentsDrogue de petite moléculeDécouverte de composés de plomb

Streaming absolu comptage microsphèresConseils chaleureux: ce produit est utilisé uniquement pour la recherche scientifique et expérimentale, ne supporte pas les études cliniques et autres

Produit similaire Recommander