Cellules myocardiques de rat h9c2

Cellules du muscle cardiaque de rat h9c2

L identification des cellules

Identification du genre passée

L source des cellules

Bibliothèque de ressources nationales

L fond cellulaire

B. kimes et B. Brandt ont sous - cloné la souche cellulaire h9c2 (2 - 1) à partir d'une souche cellulaire clonée dérivée du tissu cardiaque embryonnaire de rat bd1x, qui présente de nombreuses propriétés du muscle squelettique. Les myoblastes de cette souche cellulaire peuvent fusionner pour former un myotube multinucléé et réagir à la stimulation de l'acétylcholine. Si la concentration sérique dans le milieu chute à 1%, la fusion se produit rapidement.

L caractéristiques des cellules

1) Source: coeur

2) morphologie: myoblastes, croissance de la paroi

3) Contenu: > 1x106 nombre de cellules

4) Spécification: bouteille de t25 ou paquet de lyophilisateur de 1ml

5) Utilisation: utilisation scientifique seulement.

L conditions de culture:

1) Préparer le milieu dmem (contenant 1,5 g / L de NaHCO3 recommandé: awcell - 128 - 0001) ou (Gibco, numéro d'article 12800017, ajouter 1,5 g / L de NaHCO3); Sérum de veau foetal de haute qualité, 10%; Double résistance 1%.

2) conditions de culture: phase gazeuse: air, 95%; CO2, 5%. Température: 37 degrés Celsius, l'humidité de l'incubateur est de 70% - 80%.

L Notes:

Remarque: Cardiomyocyte de rat h9c2 cette cellule se développe bien dans le milieu dmem (contenant 1,5 g / lnahco3), la plupart des marques de dmem contiennent des concentrations plus élevées de NaHCO3 (3,7 G / l), si vous utilisez le milieu dmem (3,7 G / l NaHCO3) pour la culture des cellules, vous devez augmenter la concentration de CO2 (7% - 10%).

Pour le passage de cellules adhérentes, on peut se référer aux méthodes suivantes:

1. Jeter le surnageant de culture et laver les cellules 1 - 2 fois avec du PBS sans ions calcium et magnésium.

Ajouter 0,25% (P / v) trypsine - 0,53 mm EDTA dans un flacon de culture (flacon t25 1 - 2 ml, flacon T75 2 - 3 mL), placer dans un incubateur à 37 ° C pendant 1 - 2 minutes pour la digestion (les cellules difficiles à digérer peuvent prolonger correctement le temps de digestion), puis observer la digestion des cellules sous un microscope, si une grande partie des cellules s'arrondit et tombe, revenir rapidement à la table d'opération, tapoter quelques flacons de culture après l'ajout de 3 - 4 ml de milieu de culture contenant 10 s pour terminer la digestion.

3. Bien mélanger doucement et bien aspirer, centrifuger à 1000 RPM pendant 3 - 5 min, jeter le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de solution de culture et bien souffler. La suspension cellulaire est divisée dans de nouveaux flacons t25 dans un rapport de 1: 2, 6 - 8 ml d'un nouveau * Milieu configuré selon les instructions sont ajoutés pour maintenir la viabilité de croissance des cellules, et les passages suivants sont effectués dans un rapport de 1: 2 ~ 1: 5 selon la réalité.

3) lyophilisation cellulaire: après réception des cellules, il est recommandé de lyophiliser un lot de semences cellulaires pour une utilisation expérimentale ultérieure au cours des 3 premières générations de culture.

L forme de transport:

Basse température: (1) 1ml tube de congélation emballé pour le transport de glace sèche, après réception - 80 degrés réfrigérateur conservé pendant la nuit après le transfert à l'azote liquide ou la réanimation directe, si la glace sèche a été volatilisée propre, le bouchon du tube de congélation est tombé, cassé et les cellules sont contaminées, s'il vous plaît contactez - nous immédiatement.

Température normale (2) Les cellules viables réanimées par flacon t25 sont expédiées à température normale, après réception, en suivant la méthode de traitement après réception cellulaire.

L biosécurité:

Toutes les cellules animales sont considérées comme potentiellement dangereuses sur le plan biologique et doivent être manipulées à l'intérieur d'une table de sécurité biologique de niveau 2, veuillez prendre soin de la protection, tous les déchets liquides et les ustensiles qui ont été en contact avec ces cellules doivent être éliminés après stérilisation.

2. Il est toujours recommandé d'utiliser des gants de protection, des vêtements et de porter un masque de protection lors de la réanimation des cellules conservées congelées. Remarque: l'immersion du lyophilisateur dans l'azote liquide peut fuir et se remplir lentement d'azote liquide. Lors de la décongélation, la transformation de l'azote liquide en phase gazeuse peut provoquer l'explosion du récipient ou le soufflage de son couvercle avec une force dangereuse, créant ainsi des débris volants causant des blessures aux personnes.